| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-23页 |
| 1 蜡蚧轮枝菌 | 第12-16页 |
| ·形态特征 | 第12页 |
| ·培养性状 | 第12页 |
| ·镜检形态 | 第12页 |
| ·各种因子对蜡蚧轮枝菌的影响 | 第12-14页 |
| ·营养要求 | 第12-13页 |
| ·培养时间 | 第13页 |
| ·温度 | 第13页 |
| ·湿度 | 第13页 |
| ·酸碱度 | 第13页 |
| ·光照 | 第13页 |
| ·化学农药 | 第13-14页 |
| ·侵染过程和致病机理 | 第14-15页 |
| ·毒素 | 第15页 |
| ·培养条件 | 第15页 |
| ·安全性 | 第15页 |
| ·生物防治应用研究 | 第15-16页 |
| ·防治蚜虫 | 第15-16页 |
| ·防治温室白粉虱 | 第16页 |
| ·防治蚧壳虫 | 第16页 |
| ·防治其他害虫 | 第16页 |
| 2 几丁质酶 | 第16-21页 |
| ·作用 | 第17页 |
| ·种类 | 第17-18页 |
| ·分子生物学 | 第18-21页 |
| ·几丁质酶基因的特性 | 第18-19页 |
| ·表达调控 | 第19页 |
| ·结构和催化机制 | 第19-21页 |
| 3 昆虫病原真菌几丁质酶研究进展 | 第21-22页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 几丁质酶基因Aachit的克隆和序列分析 | 第23-44页 |
| 1 材料与方法 | 第23-32页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·菌株 | 第23页 |
| ·质粒载体 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·主要化学试剂 | 第23页 |
| ·常用的贮存液和缓冲液 | 第23-25页 |
| ·方法 | 第25-32页 |
| ·总DNA的提取 | 第25页 |
| ·总RNA的提取 | 第25页 |
| ·总DNA和总RNA的定性定量 | 第25页 |
| ·基因克隆和测序 | 第25-29页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第29页 |
| ·琼脂糖凝胶中回收PCR产物 | 第29页 |
| ·质粒连接 | 第29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·转化和筛选 | 第30页 |
| ·质粒提取 | 第30页 |
| ·克隆重组质粒的酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·重组克隆的PCR快速鉴定 | 第31页 |
| ·序列分析 | 第31页 |
| ·系统发育分析 | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-41页 |
| ·总DNA和总RNA的提取 | 第32页 |
| ·几丁质酶基因Aachit的克隆和序列分析 | 第32-40页 |
| ·系统发育分析 | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41-42页 |
| 4 小结 | 第42-44页 |
| 第三章 Aachit蛋白的表达、纯化及活性检测 | 第44-54页 |
| 1 材料与方法 | 第44-49页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·菌株 | 第44页 |
| ·表达载体 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·主要化学试剂 | 第44页 |
| ·常用的缓冲液和贮存液 | 第44-45页 |
| ·方法 | 第45-49页 |
| ·重组原核表达载体pMAL-c2X-Aachit的构建 | 第45-46页 |
| ·目的蛋白的诱导表达和纯化 | 第46-48页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第48页 |
| ·几丁质酶活性测定 | 第48-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-52页 |
| ·原核表达载体pMAL-c2X-Aachit的构建 | 第49-50页 |
| ·目的蛋白的诱导表达、可溶性分析和纯化 | 第50-52页 |
| ·几丁质酶活性测定 | 第52页 |
| 3 讨论 | 第52-53页 |
| 4 小结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59页 |