| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 植物转基因历史与现状 | 第11页 |
| 2 柑桔遗传转化研究现状 | 第11-14页 |
| ·国内柑桔遗传转化进展 | 第11-12页 |
| ·柑桔遗传转化国外研究进展 | 第12-13页 |
| ·雪柑离体培养和转化进展 | 第13-14页 |
| 3 转基因作物的安全性问题 | 第14-15页 |
| ·转基因植物环境安全性问题 | 第14页 |
| ·转基因食品安全性问题 | 第14-15页 |
| 4 生物安全标记基因研究现状 | 第15-18页 |
| ·生物安全选择标记基因 | 第15-18页 |
| 5 研究的背景和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 雪柑组织培养高效再生体系的建立 | 第19-32页 |
| 1 材料与方法 | 第19-23页 |
| ·外植体材料 | 第19页 |
| ·培养基和培养条件 | 第19-20页 |
| ·不定芽诱导 | 第20-21页 |
| ·不定芽壮苗 | 第21页 |
| ·不定根诱导 | 第21-22页 |
| ·苗的移栽 | 第22-23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-28页 |
| ·种子萌发条件及不同苗龄对不定芽诱导的影响 | 第23-24页 |
| ·光、暗培养对不定芽诱导的影响 | 第24页 |
| ·不同生长调节剂组合对不定芽诱导的影响 | 第24-25页 |
| ·不定芽的壮苗 | 第25页 |
| ·不定根的诱导 | 第25-28页 |
| ·移苗 | 第28页 |
| 3 讨论 | 第28-32页 |
| ·外植体状态与再生体系 | 第28-29页 |
| ·不定根的诱导 | 第29-32页 |
| 第三章 PMI为选择标记植物表达载体的构建 | 第32-48页 |
| 1 材料 | 第32-33页 |
| ·载体与菌株 | 第32页 |
| ·试剂及仪器 | 第32页 |
| ·细菌培养基的配制 | 第32-33页 |
| ·重要试剂及溶液 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-38页 |
| ·质粒提取 | 第33-34页 |
| ·DNA片段回收 | 第34页 |
| ·线性载体DNA5′末端去磷酸化 | 第34-35页 |
| ·限制性内切酶典型的酶切反应 | 第35页 |
| ·T4 DNA连接酶典型连接反应 | 第35-36页 |
| ·质粒DNA或连接产物的转化 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第37-38页 |
| 3 PMI为选择标记植物表达载体构建路线 | 第38页 |
| ·植物表达载体pBIPMI的构建 | 第38页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301PMI(pC1301PMI)的构建 | 第38页 |
| ·植物表达载体pC1301PMI-LFY的构建 | 第38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-39页 |
| ·植物表达载体pBIPMI的构建 | 第38-39页 |
| ·植物表达载体pC1301PMI的构建 | 第39页 |
| ·表达载体pC1301PMI-LFY的构建 | 第39页 |
| 5 讨论 | 第39-48页 |
| ·植物表达载体的选择 | 第39-40页 |
| ·质粒酶切的影响因素 | 第40页 |
| ·PCR引物设计及反应 | 第40-48页 |
| 第四章 以PMI基因为选择标记雪柑转化系统的建立 | 第48-62页 |
| 1 材料和方法 | 第48-52页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·培养基和培养条件 | 第48-49页 |
| ·方法 | 第49-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-55页 |
| ·头孢霉素对雪柑上胚轴不定芽再生的影响 | 第52页 |
| ·甘露糖选择压的确定 | 第52-53页 |
| ·不同侵染时间对转化的影响 | 第53页 |
| ·不同共培养时间对转化的影响 | 第53-54页 |
| ·不同浓度2,4-D预培养对转化的影响 | 第54-55页 |
| ·转基因植株的CPR检测 | 第55页 |
| 3 讨论 | 第55-59页 |
| ·转化体系参数的优化 | 第55-56页 |
| ·外植体与转化效率的关系 | 第56-57页 |
| ·农杆菌工程菌液的制备和使用 | 第57页 |
| ·抑菌 | 第57页 |
| ·甘露糖选择压 | 第57-58页 |
| ·逃逸体 | 第58-59页 |
| ·氯酚红(CPR)检测 | 第59页 |
| 4 问题及展望 | 第59-62页 |
| ·本研究的不足之处 | 第59页 |
| ·后续研究设想 | 第59-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 附录 | 第66-70页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |