| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-27页 |
| 一、马铃薯是重要的农作物 | 第10页 |
| 二、马铃薯病毒病与马铃薯病毒性病害的研究概况 | 第10-18页 |
| 1 马铃薯病毒病与马铃薯病毒性病害 | 第10-14页 |
| 2 马铃薯主要病毒简介 | 第14-18页 |
| ·马铃薯X病毒(PVX) | 第14-16页 |
| ·马铃薯Y病毒(PVY) | 第16-17页 |
| ·马铃薯卷叶病毒(PLRV) | 第17-18页 |
| 三、马铃薯病毒检测方法 | 第18-25页 |
| 1 电镜技术方法 | 第18-19页 |
| 2 以抗体为基础的免疫学检测方法 | 第19-20页 |
| 3 分子生物学方法检测技术 | 第20-24页 |
| ·RT-PCR检测技术 | 第21-22页 |
| ·核酸杂交技术 | 第22-23页 |
| ·指示分子核酸斑点杂交技术 | 第23-24页 |
| 4 马铃薯病毒检测方法讨论与前景 | 第24-25页 |
| 四、本研究的目的、意义 | 第25-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-36页 |
| 1 材料 | 第27-29页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·反应与测序引物 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27-28页 |
| ·缓冲液的配制 | 第28-29页 |
| ·仪器 | 第29页 |
| 2.方法 | 第29-36页 |
| ·贵州3种马铃薯病毒病发生情况调查 | 第29-31页 |
| ·病害调查与样品采集 | 第29-30页 |
| ·病毒样品的DAS-ELISA检测的操作步骤 | 第30-31页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第31-33页 |
| ·DEPC水、器具和容器的处理 | 第31-32页 |
| ·马铃薯叶片总RNA的提取(Trizol提取液法) | 第32页 |
| ·RNA的分析和定量 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR反应 | 第33-34页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第33页 |
| ·普通PCR反应 | 第33-34页 |
| ·免疫捕获反转录PCR(Immunocapture RT-PCR,IC-RT-PCR) | 第34页 |
| ·试剂的配制 | 第34页 |
| ·IC-RT-PCR操作步骤 | 第34页 |
| ·PCR产物纯化 | 第34-35页 |
| ·核苷酸序列测定与分析 | 第35-36页 |
| 第三章 贵州3种马铃薯病毒DAS-ELISA检测及分子鉴定 | 第36-69页 |
| 1.贵州3种马铃薯病毒DAS-ELISA检测 | 第36-50页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·方法 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-50页 |
| ·3种马铃薯病毒在贵州田间的主要表现症状 | 第43-46页 |
| ·3种马铃薯病毒在贵州几个种植区的分布情况 | 第46页 |
| ·3种马铃薯病毒的地理分布 | 第46-47页 |
| ·3种马铃薯病毒与种薯品种来源关系 | 第47-50页 |
| ·种马铃薯病毒的分子鉴定 | 第50-69页 |
| ·马铃薯Y病毒的分子鉴定 | 第50-59页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·方法 | 第51页 |
| ·结果与分析 | 第51-59页 |
| ·RNA的提取结果 | 第51-52页 |
| ·PVY CP的RT-PCR扩增 | 第52-53页 |
| ·PVY CP的IC-RT-PCR扩增 | 第53页 |
| ·PVY CP序列的测定与分析 | 第53-56页 |
| ·PVY不同分离物CP序列的同源性比较及分析 | 第56-59页 |
| ·马铃薯X病毒的分子鉴定 | 第59-63页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·方法 | 第60页 |
| ·结果与分析 | 第60-63页 |
| ·PVX CP IC-RT-PCR扩增 | 第60-61页 |
| ·PVX CP序列的测定与分析 | 第61-62页 |
| ·PVX不同分离物CP序列的同源性比较及分析 | 第62-63页 |
| ·马铃薯卷叶病毒的分子鉴定 | 第63-69页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·方法 | 第64页 |
| ·结果与分析 | 第64-69页 |
| ·PLRV CP IC-RT-PCR扩增 | 第64-65页 |
| ·PLRV CP序列的测定与分析 | 第65-67页 |
| ·PLRV不同分离物CP序列的同源性比较及分析 | 第67-69页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第69-74页 |
| 1 讨论 | 第69-72页 |
| ·3种马铃薯病毒的调查检测与分析 | 第69-70页 |
| ·RT-PCR与IC-RT-PCR两种方法的比较 | 第70-71页 |
| ·DNA测序技术与系统进化树 | 第71-72页 |
| 2 结论 | 第72-74页 |
| ·3种马铃薯病毒的DAS-ELISA检测 | 第72页 |
| ·PVY、PVX与PLRV的分子鉴定及分子变异分析 | 第72页 |
| ·基因序列登录 | 第72-73页 |
| ·进行了三种检测方法的比较 | 第73页 |
| ·优化IC-RT-PCR检测技术条件 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 附录1.发表文章及参加学术交流情况 | 第82-83页 |
| 附录2:论文所用缩写及中英文对照 | 第83-85页 |
| 图版 | 第85-91页 |
