| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-13页 |
| 2 材料与方法 | 第13-30页 |
| ·材料 | 第13-18页 |
| ·病毒及抗体 | 第13页 |
| ·试验用鸡 | 第13页 |
| ·菌种与质粒载体 | 第13页 |
| ·试验所需酶及主要试剂 | 第13-14页 |
| ·主要仪器 | 第14-15页 |
| ·试验所需主要溶液及其配制 | 第15-18页 |
| ·方法 | 第18-30页 |
| ·引物设计与合成 | 第18页 |
| ·病毒的增殖 | 第18页 |
| ·病毒基因组的提取 | 第18-19页 |
| ·PCR扩增EDSV Hexon基因 | 第19页 |
| ·PCR产物的凝胶回收纯化 | 第19-20页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第20-22页 |
| ·重组克隆载体的鉴定 | 第22-23页 |
| ·目的基因的序列测定及序列分析 | 第23页 |
| ·目的基因原核表达载体的构建 | 第23-25页 |
| ·阳性克隆的筛选及鉴定 | 第25页 |
| ·Hexon基因的表达 | 第25-27页 |
| ·重组蛋白表达条件的优化 | 第27页 |
| ·重组蛋白的大量表达 | 第27-28页 |
| ·表达蛋白溶解性的判定 | 第28页 |
| ·从包涵体中纯化表达蛋白 | 第28页 |
| ·表达重组蛋白的动物免疫 | 第28-29页 |
| ·间接ELISA方法检测免疫鸡抗体水平 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-40页 |
| ·鸡EDSV-HB株Hexon基因的PCR扩增 | 第30页 |
| ·PCR方法鉴定阳性克隆 | 第30-31页 |
| ·重组质粒测序鉴定及遗传变异分析 | 第31-33页 |
| ·重组表达质粒pET-H的酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第34-35页 |
| ·Western-blotting鉴定分析 | 第35页 |
| ·不同诱导温度对重组蛋白表达量的影响 | 第35-36页 |
| ·不同诱导时间对重组蛋白表达量的影响 | 第36页 |
| ·不同IPTG浓度对重组蛋白表达量的影响 | 第36-37页 |
| ·表达蛋白的溶解性判定试验 | 第37页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第37页 |
| ·间接ELISA方法检测重组蛋白免疫试验鸡后抗体水平 | 第37-40页 |
| ·重组蛋白抗原最适包被浓度的确定 | 第38页 |
| ·免疫鸡抗重组蛋白血清效价的检测 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 在读期间发表论文 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 附发表文章 | 第52-55页 |