| 缩略词表 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-36页 |
| ·课题的提出 | 第16-17页 |
| ·前人研究进展 | 第17-35页 |
| ·马铃薯加工品质育种目标和现状 | 第17-20页 |
| ·马铃薯块茎炸片质量的影响因素 | 第20-24页 |
| ·马铃薯贮藏块茎"低温糖化"的生理生化机理 | 第24-29页 |
| ·马铃薯块茎低温贮藏相关基因表达的研究 | 第29-30页 |
| ·马铃薯抗"低温糖化"的策略 | 第30-35页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第35-36页 |
| 第二章 材料与方法 | 第36-47页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·RNA与DNA的提取 | 第36-39页 |
| ·马铃薯块茎总RNA的提取(用于反转录和Northern分析) | 第36-37页 |
| ·马铃薯叶片RNA抽提(用于转基因植株Northern分析) | 第37页 |
| ·马铃薯叶片DNA小量抽提(用于转基因植株PCR检测) | 第37-38页 |
| ·马铃薯植株DNA的抽提与纯化(用于Southern杂交) | 第38-39页 |
| ·酸性转化酶全长编码序列的克隆 | 第39-40页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第39-40页 |
| ·酸性转化酶基因全长编码序列的克隆 | 第40页 |
| ·质粒的抽提及其向农杆菌的转化 | 第40-43页 |
| ·质粒DNA小量制备 | 第40-41页 |
| ·质粒DNA大量制备 | 第41-42页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第42页 |
| ·农杆菌感受态的制备及转化 | 第42页 |
| ·农杆菌介导的基因转化 | 第42-43页 |
| ·转基因植株的Northern杂交 | 第43-45页 |
| ·转基因植株的Southern杂交 | 第45-47页 |
| 第三章 马铃薯酸性转化酶全长CDS的克隆与载体构建 | 第47-56页 |
| ·前言 | 第47-48页 |
| ·材料与方法 | 第48-49页 |
| ·植物材料和菌株 | 第48页 |
| ·马铃薯酸性转化酶全长cDNA的克隆 | 第48页 |
| ·酸性转化酶反义表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-54页 |
| ·马铃薯酸性转化酶全长CDS的克隆与序列分析 | 第49-53页 |
| ·反义表达载体的构建 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 第四章 马铃薯酸性转化酶的反义抑制对块茎酸性转化酶活性和还原糖含量的影响 | 第56-72页 |
| ·前言 | 第56-57页 |
| ·材料与方法 | 第57-59页 |
| ·植物材料 | 第57页 |
| ·马铃薯遗传转化 | 第57页 |
| ·再生植株的鉴定 | 第57-58页 |
| ·马铃薯转基因株系块茎的贮藏及块茎酸性转化酶活性、还原糖含量以及淀粉和蔗糖含量的测定 | 第58页 |
| ·马铃薯转基因株系块茎的炸片加工及色泽确定 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-69页 |
| ·马铃薯遗传转化子的获得与鉴定 | 第59-61页 |
| ·转基因植株中反义inv的表达分析 | 第61-62页 |
| ·转基因块茎的酸性转化酶活性与还原糖含量的变化 | 第62-65页 |
| ·不同的插入片段大小和启动子驱动对转基因株系抗"低温糖化"能力的影响 | 第65-68页 |
| ·低温贮藏对转基因块茎炸片色泽的影响 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-72页 |
| 第五章 马铃薯酸性转化酶的干涉沉默 | 第72-79页 |
| ·材料与方法 | 第72-74页 |
| ·植物材料 | 第72页 |
| ·马铃薯Invertase基因RNAi载体构建与遗传转化 | 第72-73页 |
| ·再生植株的鉴定 | 第73-74页 |
| ·inv干涉转基因株系的植株酸性转化酶的测定 | 第74页 |
| ·结果与分析 | 第74-77页 |
| ·干涉载体构建 | 第74-75页 |
| ·遗传转化子的获得与鉴定 | 第75-76页 |
| ·转基因马铃薯植株Invertase活性测定 | 第76-77页 |
| ·讨论 | 第77-79页 |
| 第六章 讨论 | 第79-87页 |
| ·Invertase在马铃薯块茎淀粉—糖代谢中的调节作用 | 第79-80页 |
| ·Invertase调控低温糖化的作用机制 | 第80-81页 |
| ·Invertase在马铃薯"低温糖化"基因工程改良中的应用策略 | 第81-84页 |
| ·Invertase对低温糖化的重要调控功能 | 第81页 |
| ·反义抑制片段特异性和大小对转基因马铃薯抗"低温糖化"能力的影响 | 第81-83页 |
| ·不同启动子的应用对转基因马铃薯抗"低温糖化"能力的影响 | 第83-84页 |
| ·RNA干涉对转基因马铃薯抗"低温糖化"能力的影响 | 第84页 |
| ·研究展望 | 第84-87页 |
| 参考文献 | 第87-106页 |
| 附录A:Acid Invertase基因GenBank登录信息 | 第106-108页 |
| 附录B:Clustalw Result | 第108-111页 |
| 附录C:质粒图谱 | 第111-112页 |
| 附录D:发表论文 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
