| 致谢 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-30页 |
| 1 非生物胁迫下编码逆境蛋白的相关基因 | 第12-14页 |
| ·编码功能蛋白的基因 | 第12-13页 |
| ·编码渗透调节因子合成酶的基因 | 第13-14页 |
| ·编码毒性降解酶的基因 | 第14页 |
| 2 转录因子与植物抗逆性 | 第14-17页 |
| ·bZIP 类转录因子 | 第15页 |
| ·AP2/EREBP 类转录因子 | 第15页 |
| ·MYB 类转录因子 | 第15-16页 |
| ·WRKY 类转录因子 | 第16页 |
| ·NAC 类转录因子 | 第16-17页 |
| 3 逆境诱导启动子 | 第17页 |
| 4 杨树转基因的研究进展 | 第17-23页 |
| ·转抗虫基因 | 第18-20页 |
| ·Bt 基因 | 第18-19页 |
| ·蛋白酶抑制剂PI 基因 | 第19页 |
| ·植物凝集素基因 | 第19-20页 |
| ·转抗病基因 | 第20页 |
| ·转抗除草剂基因 | 第20-21页 |
| ·转降低木质素基因 | 第21-22页 |
| ·转抗非生物胁迫基因 | 第22页 |
| ·杨树转基因存在的问题及应用前景 | 第22-23页 |
| 5 DREB 转基因植物的抗逆性 | 第23-29页 |
| ·DREB 转录因子家族 | 第23-25页 |
| ·DREB 转录因子的调控机制 | 第25-27页 |
| ·DREB 转录因子在抗逆基因工程中的应用 | 第27-28页 |
| ·DREB 转录因子的研究展望 | 第28-29页 |
| 6 本研究的目的意义 | 第29-30页 |
| 第二章 拟南芥胁迫诱导启动子RD29A 克隆及活性检测 | 第30-41页 |
| 1 前言 | 第30页 |
| 2 材料和方法 | 第30-36页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·菌株和载体 | 第30-31页 |
| ·酶和试剂 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·细菌培养基 | 第31页 |
| ·植物培养基 | 第31页 |
| ·引物合成 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-36页 |
| ·植物总DNA 的提取（CTAB 法） | 第31-32页 |
| ·PCR 扩增 | 第32-33页 |
| ·PCR 产物的纯化回收 | 第33页 |
| ·回收产物与T 载体的连接 | 第33页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备（CaC12） | 第33页 |
| ·重组载体转化大肠杆菌 | 第33-34页 |
| ·转化子的检测鉴定 | 第34页 |
| ·菌液PCR | 第34页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第34页 |
| ·植物表达载体pBrd-GUS 构建及农杆菌转化 | 第34-35页 |
| ·酶切反应 | 第34页 |
| ·连接反应 | 第34页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第34-35页 |
| ·液氮冻融法转化农杆菌 | 第35页 |
| ·表达载体pBrd-GUS 的酶切鉴定 | 第35页 |
| ·rd29A 启动子的活性检测 | 第35-36页 |
| ·农杆菌介导法转化烟草 | 第35-36页 |
| ·转基因烟草的PCR 检测 | 第36页 |
| ·GUS 化学组织染色 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-40页 |
| ·rd29A 启动子克隆与序列分析 | 第36-37页 |
| ·启动子序列分析 | 第37-38页 |
| ·植物表达载体构建及酶切分析 | 第38-39页 |
| ·转基因烟草植株的获得及其PCR 检测 | 第39页 |
| ·rd29A 活性的GUS 检测 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-41页 |
| ·胁迫诱导型启动子rd29A 克隆 | 第40页 |
| ·启动子rd29A 的活性检测 | 第40页 |
| ·Rd29A 启动子的应用前景 | 第40-41页 |
| 第三章 诱导型植物表达载体构建及遗传转化研究 | 第41-52页 |
| 1 前言 | 第41页 |
| 2 材料与方法 | 第41-44页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·菌株和载体 | 第41页 |
| ·酶与试剂 | 第41-42页 |
| ·抗生素 | 第42页 |
| ·培养基 | 第42页 |
| ·细菌培养基 | 第42页 |
| ·植物培养基 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·植物表达载体pDR2-rd29A 构建 | 第42页 |
| ·重组子酶切鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组子的农杆菌转化 | 第43页 |
| ·潮霉素本底浓度的确定 | 第43页 |
| ·叶片分化的潮霉素本底浓度的确定 | 第43页 |
| ·生根的潮霉素本底浓度的确定 | 第43页 |
| ·农杆菌介导法转化895 杨 | 第43-44页 |
| ·目的基因DRE81C 在两种农杆菌中的转化效率 | 第44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-49页 |
| ·植物表达载体pDR2-rd29A 构建 | 第44-45页 |
| ·表达载体pDR2-rd29A 的酶切分析 | 第45页 |
| ·植物表达载体pDR2-rd29A 农杆菌转化 | 第45页 |
| ·潮霉素本底浓度的确定 | 第45-47页 |
| ·叶片分化的潮霉素本底浓度的确定 | 第45-46页 |
| ·生根的潮霉素敏感性试验 | 第46-47页 |
| ·南林895 杨的遗传转化 | 第47-48页 |
| ·抑菌性抗生素的选择 | 第47页 |
| ·叶片的预培养 | 第47页 |
| ·农杆菌转化的其它条件 | 第47页 |
| ·潮霉素抗性芽的筛选 | 第47-48页 |
| ·潮霉素抗性植株的获得 | 第48页 |
| ·两种载体的转化效率 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| ·植物表达载体pDR2-rd29A 构建及验证 | 第49-50页 |
| ·转化体的筛选 | 第50页 |
| ·产生假阳性转化体的原因 | 第50页 |
| ·目的基因DRE81C 转化杨树的可行性 | 第50-52页 |
| 第四章 转基因杨树的检测 | 第52-65页 |
| 1. 前言 | 第52页 |
| 2 材料与方法 | 第52-56页 |
| ·植物材料 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-56页 |
| ·转基因杨树DNA 提取 | 第52-53页 |
| ·转基因杨树PCR 分子检测 | 第53-54页 |
| ·引物设计 | 第53页 |
| ·PCR 反应体系 | 第53-54页 |
| ·PCR 反应程序 | 第54页 |
| ·电泳检测 | 第54页 |
| ·转基因植物的实时定量PCR 检测 | 第54-55页 |
| ·转基因植株与非转化植株的表型差异 | 第55页 |
| ·转基因植株的抗性实验 | 第55页 |
| ·抗旱性实验 | 第55页 |
| ·抗盐性实验 | 第55页 |
| ·转基因杨树叶片相对含水量的测定 | 第55页 |
| ·转基因植株的移栽 | 第55-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-63页 |
| ·转基因植株DNA 提取 | 第56页 |
| ·转基因植株PCR 检测 | 第56-57页 |
| ·实时定量PCR 检测 | 第57-60页 |
| ·两种启动子转化杨树的表型差异 | 第60页 |
| ·转基因植株的抗旱性检测 | 第60页 |
| ·转基因植株叶片相对含水量的检测 | 第60-61页 |
| ·转基因植株的抗盐性实验 | 第61-62页 |
| ·转基因植株的移栽 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第63页 |
| ·转基因植株的表型差异 | 第63-64页 |
| ·转基因植株的抗逆性实验 | 第64页 |
| ·转基因植株叶片相对含水量的测定 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |