转基因大麦的gfp基因遗传表达及整合位点结构
| 中文摘要 | 第1-3页 |
| 英文摘要 | 第3-8页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1 转基因植物研究的意义 | 第9页 |
| 2 转基因遗传表达的稳定性及不稳定性 | 第9-13页 |
| ·转基因遗传表达的稳定性 | 第9-10页 |
| ·转基因遗传表达的不确定性 | 第10-12页 |
| ·转化方法对转基因遗传稳定性的影响 | 第12-13页 |
| 3 转基因植物中外源基因的整合特性 | 第13-19页 |
| ·转基因整合位点的随机性 | 第13-14页 |
| ·转基因的整合方式 | 第14-16页 |
| ·单拷贝单位点整合 | 第14页 |
| ·串联多联体单位点整合 | 第14-15页 |
| ·单拷贝或多拷贝在多位点整合 | 第15-16页 |
| ·不同的整合方式对外源基因表达的影响 | 第16-18页 |
| ·转基因的拷贝数（位点数）对表达的影响 | 第16页 |
| ·转基因插入位点的位置效应 | 第16-17页 |
| ·转基因结构的改变对表达的影响 | 第17-18页 |
| ·转基因整合方式的研究策略 | 第18-19页 |
| ·Southern 杂交 | 第18页 |
| ·转基因旁侧序列的克隆及测定 | 第18-19页 |
| 4 展望 | 第19-21页 |
| 第二章 转基因遗传表达研究 | 第21-32页 |
| 1 材料与方法 | 第21-23页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-23页 |
| ·根尖染色体的制片 | 第21-22页 |
| ·荧光原位杂交 | 第22-23页 |
| ·田间杂交 | 第23页 |
| ·gfp基因的荧光检测 | 第23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-32页 |
| ·gfp 转基因在大麦染色体上的物理位置 | 第23-24页 |
| ·亲本根尖gfp 基因的表达 | 第24-26页 |
| ·F1 代根尖gfp 基因的表达 | 第26-27页 |
| ·gfp 基因在F2 代根尖的分离 | 第27-29页 |
| ·gfp 基因在亲本花粉中的表达 | 第29-30页 |
| ·gfp 基因在F1 代花粉的分离 | 第30-32页 |
| 第三章 转基因整合位点结构 | 第32-44页 |
| 1 材料与方法 | 第32-39页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·大麦基因组DNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·pMON30049 质粒的提取 | 第34页 |
| ·探针的标记 | 第34页 |
| ·Southern 印迹杂交 | 第34-36页 |
| ·植物总DNA 的酶切及电泳 | 第34-35页 |
| ·Southern 转膜 | 第35页 |
| ·Southern 杂交 | 第35-36页 |
| ·Southern 荧光检测与自显影 | 第36页 |
| ·质粒拯救法 | 第36-38页 |
| ·质粒拯救法原理 | 第36页 |
| ·基因组的酶切 | 第36-37页 |
| ·酶切产物纯化回收 | 第37页 |
| ·酶切产物自连接 | 第37页 |
| ·DH5ａ感受态细胞的制备及电击转化 | 第37-38页 |
| ·营救质粒的 PCR 检测及酶切 | 第38页 |
| ·PCR引物与反应体系 | 第38页 |
| ·营救质粒的酶切 | 第38页 |
| ·阳性克隆的测序 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-44页 |
| ·Southern 印迹结果分析 | 第39-41页 |
| ·质粒营救法结果分析 | 第41-44页 |
| ·基于质粒营救法获得的克隆的鉴定 | 第41-42页 |
| ·转基因大麦营救质粒序列的初步分析 | 第42-44页 |
| 第四章 讨论 | 第44-49页 |
| 1 gfp 在植物中的表达 | 第44页 |
| 2 外源基因在受体中表达的影响因素 | 第44-45页 |
| 3 转基因大麦后代的遗传分析 | 第45-47页 |
| 4 基因枪介导转化的外源基因在植物中的整合机制 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录 实验所用相关试剂及溶液的配制 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
