摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-26页 |
·△~(12) 脂肪酸脱氢酶基因的研究进展 | 第13-16页 |
·花生油酸、亚油酸生物生理学意义 | 第13-14页 |
·脂肪酸生物代谢途径 | 第14-15页 |
·花生脂肪酸脱氢酶基因的研究 | 第15-16页 |
·反义技术的机理和应用 | 第16-19页 |
·反义基因的基本概念 | 第16-17页 |
·反义技术在农作物改良上的应用 | 第17-19页 |
·农杆菌介导花生遗传转化的研究进展 | 第19-22页 |
·农杆菌介导遗传转化的原理 | 第19-21页 |
·影响农杆菌介导花生基因转化效率的因素 | 第21-22页 |
·植物基因转化辅助方法的研究进展 | 第22-23页 |
·添加Vir 区诱导物 | 第22-23页 |
·提高细胞膜通透性 | 第23页 |
·γ-维生素E 甲基转移酶基因的作用 | 第23-25页 |
·Bar 基因的作用 | 第25页 |
·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-36页 |
·花生ahFAD2B 基因反义表达载体的构建 | 第26-32页 |
·试验材料 | 第26页 |
·试验设计与方法 | 第26-32页 |
·影响农杆菌介导花生基因转化因素的研究 | 第32-36页 |
·试验材料 | 第32-33页 |
·试验设计与方法 | 第33-36页 |
3 结果和讨论 | 第36-49页 |
·花生ahFAD2B 基因反义表达载体的构建 | 第36-43页 |
·花生总DNA 的提取和纯化 | 第36-37页 |
·引物设计和PCR 扩增 | 第37-38页 |
·克隆载体的构建 | 第38-39页 |
·目的基因的测序结果 | 第39-41页 |
·ahFAD2B 基因反义表达载体的构建与鉴定 | 第41-43页 |
·影响农杆菌介导花生基因转化因素的研究 | 第43-49页 |
·超声波处理对花生基因转化的影响 | 第43-44页 |
·添加烟草提取液对花生基因转化的影响 | 第44-46页 |
·添加AS 对花生基因转化的影响 | 第46-48页 |
·抗性植株的PCR 检测 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-53页 |
·关于ahFAD2B 基因PCR 扩增中的问题及解决方法 | 第49-51页 |
·关于PCR 反应体系的优化 | 第49-50页 |
·适合花生PCR 反应的DNA 模板的提取 | 第50-51页 |
·PPT 对外植体的伤害 | 第51页 |
·添加物及超声波处理对基因转化率的影响分析 | 第51-52页 |
·进一步研究设想 | 第52-53页 |
5 结论 | 第53-55页 |
·克隆出花生ahFAD2B 基因并构建其反义表达载体 | 第53页 |
·适宜时间的超声波处理可有效提高花生基因转化率 | 第53-54页 |
·添加适量烟草提取液可有效提高花生基因转化率 | 第54页 |
·添加AS 不能提高花生的基因转化率 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
附录1:主要化学试剂及缓冲液配制 | 第62-64页 |
附录2:常用培养基配方 | 第64-66页 |
附录3:本试验所用质粒载体 | 第66-68页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第68-69页 |
图版 | 第69页 |