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花生ahFAD2B基因反义表达载体构建与基因转化影响因素的研究

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 引言第13-26页
   ·△~(12) 脂肪酸脱氢酶基因的研究进展第13-16页
     ·花生油酸、亚油酸生物生理学意义第13-14页
     ·脂肪酸生物代谢途径第14-15页
     ·花生脂肪酸脱氢酶基因的研究第15-16页
   ·反义技术的机理和应用第16-19页
     ·反义基因的基本概念第16-17页
     ·反义技术在农作物改良上的应用第17-19页
   ·农杆菌介导花生遗传转化的研究进展第19-22页
     ·农杆菌介导遗传转化的原理第19-21页
     ·影响农杆菌介导花生基因转化效率的因素第21-22页
   ·植物基因转化辅助方法的研究进展第22-23页
     ·添加Vir 区诱导物第22-23页
     ·提高细胞膜通透性第23页
   ·γ-维生素E 甲基转移酶基因的作用第23-25页
   ·Bar 基因的作用第25页
   ·本研究的目的和意义第25-26页
2 材料与方法第26-36页
   ·花生ahFAD2B 基因反义表达载体的构建第26-32页
     ·试验材料第26页
     ·试验设计与方法第26-32页
   ·影响农杆菌介导花生基因转化因素的研究第32-36页
     ·试验材料第32-33页
     ·试验设计与方法第33-36页
3 结果和讨论第36-49页
   ·花生ahFAD2B 基因反义表达载体的构建第36-43页
     ·花生总DNA 的提取和纯化第36-37页
     ·引物设计和PCR 扩增第37-38页
     ·克隆载体的构建第38-39页
     ·目的基因的测序结果第39-41页
     ·ahFAD2B 基因反义表达载体的构建与鉴定第41-43页
   ·影响农杆菌介导花生基因转化因素的研究第43-49页
     ·超声波处理对花生基因转化的影响第43-44页
     ·添加烟草提取液对花生基因转化的影响第44-46页
     ·添加AS 对花生基因转化的影响第46-48页
     ·抗性植株的PCR 检测第48-49页
4 讨论第49-53页
   ·关于ahFAD2B 基因PCR 扩增中的问题及解决方法第49-51页
     ·关于PCR 反应体系的优化第49-50页
     ·适合花生PCR 反应的DNA 模板的提取第50-51页
   ·PPT 对外植体的伤害第51页
   ·添加物及超声波处理对基因转化率的影响分析第51-52页
   ·进一步研究设想第52-53页
5 结论第53-55页
   ·克隆出花生ahFAD2B 基因并构建其反义表达载体第53页
   ·适宜时间的超声波处理可有效提高花生基因转化率第53-54页
   ·添加适量烟草提取液可有效提高花生基因转化率第54页
   ·添加AS 不能提高花生的基因转化率第54-55页
参考文献第55-62页
附录1:主要化学试剂及缓冲液配制第62-64页
附录2:常用培养基配方第64-66页
附录3:本试验所用质粒载体第66-68页
攻读学位期间发表论文情况第68-69页
图版第69页

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