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外源DNA导入花生方法的研究及抗叶斑病变异品系的鉴定

摘要第1-13页
ABSTRACT第13-18页
1 引言第18-31页
   ·花生基因转化方法的研究第19-23页
     ·农杆菌介导的转化方法第19-20页
     ·基因枪介导的转化方法第20-21页
     ·聚乙二醇介导的基因转化法第21页
     ·花粉管通道法的基因转化法第21-23页
   ·植物抗真菌病害基因工程的研究进展第23-30页
     ·植物抗病性的遗传基础及可能的作用机制第23-24页
       ·与不亲和因子相关的互作模式第23页
       ·与亲和因子相关的互作模式第23-24页
     ·植物抗真菌病害基因工程的策略第24-29页
       ·利用抗真菌蛋白基因第24-27页
       ·利用植物的抗病基因第27-28页
       ·利用植物的防卫基因第28-29页
     ·植物抗真菌基因工程面临的挑战第29-30页
   ·本研究的目的意义第30-31页
2 材料与方法第31-42页
   ·采用花粉管通道法和原位转化法进行花生基因转化的研究第31-34页
     ·试验材料第31页
     ·试验方法第31-34页
       ·菌液的制备和质粒DNA 的提取第31-32页
       ·外源基因的导入第32页
       ·除草剂抗性植株筛选第32-33页
       ·花生总DNA 的提取第33页
       ·转基因植株的 PCR 检测第33-34页
   ·花生叶斑病病原菌的分离纯化与致病性研究第34-35页
     ·试验材料第34页
     ·试验方法第34-35页
       ·培养基的配制第34页
       ·病菌的分离纯化方法第34页
       ·病菌培养与诱发产孢第34-35页
       ·致病性试验第35页
       ·发病叶片的病菌分离与鉴别第35页
   ·国槐DNA 与野生花生DNA 导入花生选育的抗叶斑病品系的鉴定..第35-42页
     ·试验材料第35页
     ·试验方法第35-42页
       ·花生变异品系田间抗病性调查及农艺性状考察第35-36页
       ·花生变异品系蛋白质含量的分析第36-37页
       ·花生变异品系脂肪含量的分析第37页
       ·花生变异品系糖分含量的分析第37-38页
       ·花生变异品系脂肪酸含量的分析第38页
       ·花生变异品系与受体DNA 差异的SSR 多态性分析第38-42页
         ·PCR 反应体系及条件第38页
         ·SSR 引物第38-39页
         ·变性胶的制备第39-40页
         ·PAGE 电泳第40页
         ·银染第40-42页
3 结果与分析第42-57页
   ·采用花粉管通道法和原位转化法进行花生基因转化的研究第42-45页
     ·两种转基因操作方法对花生的影响第42-43页
       ·不同导入方法对当代结实率的影响第42页
       ·不同导入方法对T1 代种子出苗率的影响第42-43页
     ·PPT 对转基因植株检测浓度的确定第43-45页
     ·抗PPT 转基因株的筛选第45页
     ·抗除草剂植株的PCR 分子检测第45页
   ·花生叶斑病病原菌的分离纯化与致病性研究第45-48页
     ·花生褐斑病、黑斑病和网斑病病原菌的获得第45页
     ·花生褐斑病病菌的培养特性研究第45-46页
       ·温度对花生褐斑病病菌生长及产孢的影响第45页
       ·光照对花生褐斑病病菌生长及产孢的影响第45-46页
     ·花生褐斑病病菌的致病性研究第46-48页
       ·离体叶片接种鉴定病菌的致病性第46-47页
       ·整株接种鉴定病菌的致病性第47-48页
   ·国槐DNA 与野生花生DNA 导入花生所选育抗叶斑病变异品系的鉴定第48-57页
     ·花生变异品系对花生褐斑病和网斑病的抗性鉴定第48-49页
     ·花生变异品系农艺性状考察及与抗病性的相关性分析第49-50页
     ·花生变异品系的品质性状比较第50-53页
       ·花生变异品系的蛋白质含量比较第50-51页
       ·花生变异品系的粗脂肪含量比较第51页
       ·花生变异品系的糖分含量比较第51-53页
       ·花生变异品系的脂肪酸含量比较第53页
     ·花生变异品系DNA 的SSR 差异分析第53-57页
       ·高纯度花生DNA 的获得第53-55页
       ·抗病变异品系与受体DNA 的SSR 多态性比较第55-57页
4 讨论第57-59页
   ·采用花粉管通道法和原位转化法进行花生基因转化的研究第57-58页
   ·花生叶斑病病原菌的分离纯化与致病性研究第58页
   ·国槐DNA 与野生花生DNA 导入花生所选育抗叶斑病变异品系的鉴定第58-59页
5 结论第59-63页
   ·采用花粉管通道法和原位转化法进行花生基因转化的研究第59页
   ·花生叶斑病病原菌的分离纯化与致病性研究第59-60页
   ·国槐DNA 与野生花生DNA 导入花生所选育抗叶斑病变异品系的鉴定第60-63页
     ·变异品系对花生褐斑病和网斑病抗性的鉴定第60页
     ·变异品系农艺性状的考察第60页
     ·变异品系品质性状的考察第60-61页
     ·变异品系与受体DNA 的SSR 多态性分析第61页
     ·花生抗叶斑病变异品系的综合评价第61-63页
参考文献第63-74页
致谢第74-75页
攻读学位期间发表论文情况第75页

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