蜡梅半胱氨酸合成酶基因CPCysA的克隆分析与表达载体构建
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第8-20页 |
| ·半胱氨酸合成酶基因研究现状 | 第8-15页 |
| ·植物硫的吸收过程 | 第8-9页 |
| ·半胱氨酸合成酶催化的反应 | 第9-10页 |
| ·半胱氨酸的生物功能 | 第10页 |
| ·植物半胱氨酸合成酶的种类及其在细胞中的定位 | 第10-12页 |
| ·SAT和OASTL复合体及其调控机理 | 第12-13页 |
| ·半胱氨酸合成酶的调节特性 | 第13-14页 |
| ·转半胱氨酸合成酶基因植物研究进展 | 第14-15页 |
| ·EST技术在植物基因克隆上的应用研究进展 | 第15-18页 |
| ·EST技术的原理和方法 | 第15-16页 |
| ·EST在发现新基因中的应用 | 第16-18页 |
| ·蜡梅的生物学特性 | 第18-20页 |
| ·蜡梅的形态特征和产地 | 第18-19页 |
| ·蜡梅的品种 | 第19-20页 |
| 第2章 引言 | 第20-21页 |
| 第3章 材料与方法 | 第21-29页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·菌株与质粒 | 第21页 |
| ·主要仪器设备和试剂 | 第21页 |
| ·常用溶液配方 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-29页 |
| ·主要技术路线 | 第22-23页 |
| ·EST序列的测定 | 第23页 |
| ·克隆子长度验证 | 第23页 |
| ·获取全长目的cDNA | 第23页 |
| ·总RNA抽提步骤 | 第23-24页 |
| ·半定量RT—PCR | 第24-25页 |
| ·表达载体构建 | 第25-29页 |
| 第4章 实验结果 | 第29-40页 |
| ·EST测序获得全长cDNA及其序列分析 | 第29-35页 |
| ·蜡梅半胱氨酸合成酶理化特性分析和二三级结构预测 | 第35-37页 |
| ·总RNA的提取 | 第37页 |
| ·表达分析 | 第37页 |
| ·植物表达载体构建 | 第37-40页 |
| ·构建流程 | 第37-39页 |
| ·酶切结果 | 第39页 |
| ·PCR验证 | 第39-40页 |
| 第5章 讨论 | 第40-43页 |
| ·总RNA提取 | 第40页 |
| ·全长cDNA的获得 | 第40页 |
| ·EST测序误差 | 第40-41页 |
| ·CPCysA基因序列分析及其编码蛋白的结构预测 | 第41页 |
| ·表达分析 | 第41-42页 |
| ·表达载体构建及后续研究 | 第42-43页 |
| 第6章 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-52页 |
| 缩略词表 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 附录 | 第54页 |
