摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
文献综述 | 第9-29页 |
一、嗜热酶概述 | 第9-11页 |
1 嗜热酶的特点 | 第9-10页 |
2 嗜热酶的耐热机制 | 第10-11页 |
3 嗜热酶的来源 | 第11页 |
二、古菌概述 | 第11-14页 |
1 概况 | 第11-13页 |
2 硫矿硫化叶菌概述 | 第13-14页 |
3 嗜热古菌的耐热机制 | 第14页 |
三、α-淀粉酶概述 | 第14-26页 |
1 淀粉的结构 | 第14-15页 |
2 普通α-淀粉酶的性质 | 第15-18页 |
3 α-淀粉酶的生产 | 第18-21页 |
4 耐高温α-淀粉酶 | 第21-23页 |
5 耐酸性α-淀粉酶 | 第23-26页 |
四、嗜热古菌的α-淀粉酶 | 第26-29页 |
材料与方法 | 第29-38页 |
1 材料 | 第29-30页 |
2 方法 | 第30-38页 |
结果与讨论 | 第38-67页 |
一、硫矿硫化叶菌Sulfolobus sofataricus P2α—淀粉酶基因的克隆和在大肠杆菌中的表达 | 第38-48页 |
1 Sulfolobus sofataricus P2α—淀粉酶基因(sspa)的克隆 | 第38-42页 |
2 重组表达质粒的构建 | 第42-45页 |
3 sspa基因在Escherichia coli BL21(DE3)中的表达 | 第45-46页 |
4 α—淀粉酶活性的测定 | 第46页 |
小结 | 第46-48页 |
二、硫矿硫化叶菌Sulfolobus sofataricus P2α—淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达 | 第48-54页 |
1 重组载体pP43NMK-sspa的构建 | 第48-49页 |
2 枯草芽孢杆菌1A771的转化 | 第49-52页 |
3 重组枯草芽孢杆菌表达产物酶活分析 | 第52-53页 |
小结 | 第53-54页 |
三、sspa基因的改造及在大肠杆菌中的表达 | 第54-59页 |
1 部分sspa基因的克隆 | 第54-56页 |
2 重组表达质粒的构建 | 第56页 |
3 sspa_(7a)、sspa_(11a)在Escherichia coli BL21中的表达 | 第56-57页 |
4 α—淀粉酶活性的测定 | 第57页 |
小结 | 第57-59页 |
四、定点突变提高sspa基因在枯草芽孢杆菌中的表达 | 第59-67页 |
1 sspa_(11a)的克隆 | 第59-60页 |
2 定点突变 | 第60-63页 |
3 重组载体pP43NMK-sspa4的构建 | 第63-64页 |
4 重组表达质粒在枯草芽孢杆菌1A771中的表达 | 第64-65页 |
5 B.S 1A771(pP43NMK-sspa4)表达产物的SDS-PAGE分析 | 第65-66页 |
6 重组枯草芽孢杆菌表达产物酶活的测定 | 第66页 |
小结 | 第66-67页 |
全文总结 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
附录 | 第74-76页 |
致谢 | 第76页 |