| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 前言 | 第5-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-23页 |
| ·枯草芽孢杆菌糖代谢 | 第8-17页 |
| ·糖吸收 | 第8-10页 |
| ·B. subtilis 中心代谢 | 第10-12页 |
| ·CCR 对中心代谢的影响 | 第12-15页 |
| ·磷酸戊糖途径 | 第15-17页 |
| ·核黄素及核黄素的生物合成途径 | 第17-21页 |
| ·核黄素的理化性质 | 第17-18页 |
| ·核黄素的功能和用途 | 第18页 |
| ·Bacillus subtilis 中核黄素的生物合成途径 | 第18-20页 |
| ·产核黄素基因工程菌构建的进展和国内外研究现状 | 第20-21页 |
| ·碳中心代谢通量分布及其对核黄素的影响 | 第21页 |
| ·本文研究内容 | 第21-23页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第23-36页 |
| ·实验材料 | 第23-27页 |
| ·菌种和质粒 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·主要药品 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-36页 |
| ·提取枯草芽孢杆菌染色体DNA 的方法 | 第27-28页 |
| ·引物及PCR 反应 | 第28-29页 |
| ·水溶液中DNA 的纯化和浓缩 | 第29页 |
| ·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
| ·DNA 的酶切与连接 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第31页 |
| ·枯草芽孢杆菌原生质体的制备与转化 | 第31页 |
| ·Spizzen 转化 | 第31-32页 |
| ·质粒的小规模制备 | 第32页 |
| ·质粒的大规模提取制备 | 第32-33页 |
| ·发酵液中核黄素的测定 | 第33页 |
| ·发酵液中残糖的测定 | 第33-36页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第36-58页 |
| ·B. subtilis pgi 的敲除 | 第36-44页 |
| ·pgi 基因同源片段及氯霉素抗性基因片段的PCR 扩增 | 第36-39页 |
| ·重组质粒pUC18-pgi::Cm 构建 | 第39-42页 |
| ·B.subtilis24A1 pgi 基因的敲除 | 第42-43页 |
| ·质粒pMX45 的转化 | 第43-44页 |
| ·B.subtilis24B/pMX45 的表型特征 | 第44-49页 |
| ·B.subtilis24B/pMX45 在基本培养基中的生长 | 第44-45页 |
| ·B.subtilis24B/pMX45 在 LB 培养基中的生长 | 第45-46页 |
| ·果糖浓度对 B.subtilis24B/pMX45 生长的影响 | 第46-48页 |
| ·葡萄糖浓度对 B.subtilis24B/pMX45 产核黄素的影响 | 第48-49页 |
| ·蔗糖作为碳源对 B.subtilis24B/pMX45 的影响 | 第49-50页 |
| ·B.subtilis 的zwf 和gndA 基因的克隆 | 第50-55页 |
| ·zwf、gndA 基因的PCR 扩增 | 第51-52页 |
| ·重组质粒pHP-g、pHP-z、pHP-zg 的构建 | 第52-54页 |
| ·重组质粒pHP-g、pHP-z、pHP-zg 的转化 | 第54-55页 |
| ·扩增zwf、gndA对 B. subtilis24B 的影响 | 第55-58页 |
| 第四章 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
