| 第一章 绪论 | 第1-17页 |
| ·研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| ·国内外研究进展 | 第15-16页 |
| ·研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 流产布鲁氏菌外膜蛋白基因omp25的克隆与序列分析 | 第17-26页 |
| ·材料 | 第17-18页 |
| ·菌种和质粒 | 第17页 |
| ·酶和试剂 | 第17页 |
| ·仪器与设备 | 第17-18页 |
| ·方法 | 第18-23页 |
| ·布鲁氏菌DNA的提取 | 第18页 |
| ·目的片段的扩增与回收 | 第18-20页 |
| ·目的基因的克隆 | 第20-21页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第21-23页 |
| ·结果 | 第23-25页 |
| ·PCR产物的电泳结果 | 第23页 |
| ·重组质粒pGEM-T-omp25的PCR和酶切鉴定 | 第23-24页 |
| ·重组质粒pGEM-T-omp25的序列分析 | 第24-25页 |
| ·讨论 | 第25-26页 |
| 第三章 流产布鲁氏菌omp25基因在大肠杆菌中的表达 | 第26-33页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·重组质粒、宿主菌株 | 第26页 |
| ·试剂、工具酶及试剂盒 | 第26页 |
| ·仪器与设备 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-29页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·目的片段的扩增 | 第26页 |
| ·目的片段与pGEX-6P-1载体的酶切回收 | 第26-27页 |
| ·目的片段与载体的连接转化 | 第27页 |
| ·重组质粒pGEX-omp25的提取与鉴定 | 第27页 |
| ·重组质粒pGEX-omp25的诱导表达 | 第27-28页 |
| ·表达产物的检测 | 第28-29页 |
| ·结果 | 第29-31页 |
| ·重组表达载体的构建和鉴定 | 第29-30页 |
| ·表达产物的检测 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第31页 |
| ·GST融合表达载体 | 第31-32页 |
| ·诱导表达 | 第32-33页 |
| 第四章 重组蛋白pGEX-Omp25免疫活性的初步研究 | 第33-43页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·试剂 | 第33-34页 |
| ·pGEX-OMP25工程菌 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·Omp25工程菌的诱导表达 | 第34页 |
| ·包涵体的制备与溶解 | 第34-35页 |
| ·Omp25蛋白变性液的复性 | 第35页 |
| ·重组表达蛋白的ELISA检测 | 第35页 |
| ·间接血凝试验 | 第35-36页 |
| ·Omp25蛋白的结构预测 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-40页 |
| ·包涵体的分离 | 第36-37页 |
| ·包涵体的变性 | 第37页 |
| ·包涵体的复性 | 第37页 |
| ·表达产物ELISA结果 | 第37-38页 |
| ·间接血凝试验结果 | 第38页 |
| ·omp25基因编码蛋白的结构预测 | 第38-40页 |
| ·讨论 | 第40-43页 |
| ·包涵体的变性、复性 | 第40-41页 |
| ·表达产物ELISA检测 | 第41页 |
| ·间接血凝试验 | 第41页 |
| ·流产布鲁氏菌表达重组蛋白Omp25的结构预测 | 第41-43页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第43页 |
| ·结论 | 第43-44页 |
| 第六章 文献综述 | 第44-58页 |
| ·布鲁氏菌免疫蛋白研究进展 | 第45-47页 |
| ·布鲁氏菌外膜蛋白研究进展 | 第45-47页 |
| ·细胞表面蛋白 | 第47页 |
| ·L7／L12核蛋白 | 第47页 |
| ·布鲁氏菌基因组研究情况 | 第47-51页 |
| ·控制脂多糖(LPS)合成的基因 | 第48-49页 |
| ·环B(122)葡聚糖(CyclicB(122)glucan)合成酶的编码基因cgs | 第49页 |
| ·胞浆膜转运蛋白的基因(bacA) | 第49页 |
| ·调控蛋白的基因簇(bvrR-bvrS) | 第49页 |
| ·合成细胞色素氧化酶的基因cydB | 第49-50页 |
| ·嘌呤合成和芳香族化合物合成系统的调控基因(purE，aroC) | 第50页 |
| ·热休克蛋白(Heat shock proteins)基因 | 第50页 |
| ·宿主因子-1基因hfg | 第50页 |
| ·过氧化物歧化酶(SOD)基因sod | 第50页 |
| ·毒力基因virB | 第50-51页 |
| ·布鲁氏菌毒力的致病机理 | 第51-52页 |
| ·Ⅳ型分泌系统(TFSS)与细菌毒力 | 第51页 |
| ·布鲁氏菌的致病机理 | 第51-52页 |
| ·布鲁氏菌的免疫机理 | 第52-54页 |
| ·先天性免疫 | 第52-53页 |
| ·获得性免疫 | 第53-54页 |
| ·布鲁氏菌病的诊断技术 | 第54页 |
| ·病原鉴定 | 第54页 |
| ·免疫血清学技术诊断 | 第54页 |
| ·目前发展的其他诊断技术 | 第54页 |
| ·布鲁氏菌疫苗研究进展 | 第54-58页 |
| ·过去用于控制布鲁氏菌病的主要疫苗 | 第54-55页 |
| ·布鲁氏菌疫苗应用现状及其前景 | 第55-56页 |
| ·基因工程苗 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 附录 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简历 | 第73页 |
