| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 文献综述 | 第12-30页 |
| 1 水稻花发育的研究进展 | 第12-19页 |
| 2 植物功能基因组学研究进展 | 第19-30页 |
| 材料与方法 | 第30-43页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第30-32页 |
| ·水稻材料 | 第30页 |
| ·菌株 | 第30页 |
| ·质粒载体 | 第30-31页 |
| ·试验所用主要试剂及酶 | 第31页 |
| ·测序和引物合成 | 第31页 |
| ·试验所用主要仪器 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31-32页 |
| ·水稻遗传转化培养基 | 第31-32页 |
| ·菌类培养基 | 第32页 |
| 2 研究方法 | 第32-43页 |
| ·PSD1野生型幼穗总RNA的提取 | 第32页 |
| ·CTAB法基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·总核酸提取质量的检测 | 第33页 |
| ·cDNA目的片段的克隆、筛选鉴定及克隆载体构建 | 第33-36页 |
| ·RT-PCR获得cDNA目的片段 | 第33-34页 |
| ·cDNA目的片段的回收纯化 | 第34页 |
| ·目的基因克隆载体构建 | 第34页 |
| ·E coli感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| ·目的片段的转化 | 第35页 |
| ·用菌液做PCR快速检测阳性 | 第35页 |
| ·E coli质粒DNA的提取 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的PCR及酶切鉴定分析 | 第36页 |
| ·测序检测 | 第36页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第36-38页 |
| ·含目的片段的pMD18-T-PSD1克隆载体DNA和pTCK303载体DNA的制备 | 第37页 |
| ·载体和目的片段的获得 | 第37-38页 |
| ·连接、转化及重组克隆的筛选与鉴定 | 第38页 |
| ·植物双元表达载体pTCK303-PSD1冻融法导入根癌农杆菌LBA4404及EHA105及其鉴定 | 第38-39页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的微量制备 | 第38页 |
| ·根癌农杆菌转化 | 第38-39页 |
| ·农杆菌转化子的鉴定 | 第39页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第39-41页 |
| ·水稻成熟胚的愈伤组织培养 | 第40页 |
| ·水稻转化 | 第40-41页 |
| ·抗性愈伤组织的分化及植株再生 | 第41页 |
| ·转基因植株后代的鉴定 | 第41-43页 |
| ·潮霉素基因鉴定转基因植株 | 第41页 |
| ·转基因植株进一步的PCR鉴定 | 第41-43页 |
| 结果与分析 | 第43-51页 |
| 1 PSD1野生型幼穗总RNA的获得 | 第43-44页 |
| 2 PSD1基因cDNA片段的克隆和鉴定 | 第44-45页 |
| 3 植物表达载体的构建 | 第45-47页 |
| ·含目的片段的pMD18-T-PSD1克隆载体和pTCK303载体的制备 | 第45页 |
| ·载体和目的片段的获得 | 第45页 |
| ·载体和目的片段的连接、转化及鉴定 | 第45-47页 |
| 4 植物双元表达载体pTCK303-PSD1冻融法导入根癌农杆菌LBA4404与EHA105及其鉴定 | 第47页 |
| ·根癌农杆菌菌株的选择 | 第47页 |
| ·根癌农杆菌转化子的鉴定 | 第47页 |
| 5 成熟胚胚性愈伤组织的诱导 | 第47-48页 |
| 6 转化及抗性愈伤组织的获得 | 第48-50页 |
| 7 转基因植株后代的鉴定 | 第50-51页 |
| ·潮霉素基因鉴定转基因植株 | 第50页 |
| ·转基因植株进一步的PCR鉴定 | 第50-51页 |
| 讨论 | 第51-53页 |
| 下一步工作计划 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录 本实验所采用的培养基配方 | 第61-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
