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微生物法制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 绪论第11-22页
   ·手性化合物研究的意义第11-12页
   ·手性化合物的研究方法第12-13页
     ·手性源法第12页
     ·外消旋体拆第12页
     ·不对称合成法第12-13页
   ·生物催化法制备手性化合物第13-15页
     ·生物催化的概念第13页
     ·生物催化应用于手性化合物的研究发展第13页
     ·生物催化法制备手性化合物的机理第13-14页
     ·利用完整细胞进行生物催化的形式第14页
     ·生物催化的特点第14-15页
     ·生物催化的优点第15页
   ·生物催化制备4-氯-3-羟基丁酸乙酯(CHBE)概况第15-20页
     ·产品概况第15-16页
     ·4-氯-3-羟基丁酸乙酯的制备方法第16-17页
     ·国内外技术概况和发展趋势第17-19页
       ·手性钌催化剂还原法第17页
       ·微生物酶催化转化法第17-19页
     ·本课题的来源及研究意义第19页
       ·本课题的来源第19页
       ·本课题的研究意义第19页
     ·本论文的研究内容第19-20页
 参考文献第20-22页
2 COBE 还原酶产生菌的筛选第22-35页
   ·前言第22页
   ·材料与方法第22-26页
     ·材料第22-24页
       ·试剂与原材料第22-23页
       ·菌种第23页
       ·仪器与设备第23-24页
       ·培养基第24页
     ·实验方法第24-26页
       ·菌种培养方法第24页
       ·菌种筛选方法第24-25页
       ·菌种的纯化第25页
       ·COBE 及CHBE 定量分析第25页
       ·产物CHBE对映体过量值(e.e.)测定第25-26页
   ·结果与讨论第26-33页
     ·COBE 及CHBE 定量分析第26-27页
     ·外消旋的CHBE 的制备第27页
     ·产物 CHBE 对映体过量值(e.e.)测定第27-28页
     ·菌种的初筛第28-30页
     ·产酶菌株的复筛第30页
     ·菌种的纯化第30-31页
     ·菌种的培养特征观察第31-33页
       ·菌体斜面形态的观察第31页
       ·菌落形态的观察第31-32页
       ·细胞形态的观察第32-33页
   ·本章小结第33-34页
 参考文献第34-35页
3 COBE 还原酶产生菌的发酵工艺优化第35-48页
   ·前言第35页
   ·材料与方法第35-39页
     ·材料第35-37页
       ·试剂与原材料第36页
       ·菌种第36页
       ·仪器与设备第36-37页
       ·培养基第37页
     ·实验方法第37-39页
       ·菌种培养方法第37页
       ·酶活力测定第37-38页
       ·生物量测定第38页
       ·COBE 及CHBE 定量分析第38-39页
       ·产物CHBE对映体过量值(e.e.)测定第39页
   ·结果与讨论第39-47页
     ·发酵产酶条件的研究第39-47页
       ·碳源的筛选第39-40页
       ·氮源的筛选第40-41页
       ·复合氮源筛选第41-42页
       ·无机盐对菌种产酶的影响第42-43页
       ·培养基正交实验第43-44页
       ·初始pH 对培养基产酶的影响第44-45页
       ·最适发酵温度实验第45-46页
       ·摇瓶装液量实验第46页
       ·菌体生长及产酶实验第46-47页
   ·本章小结第47页
 参考文献第47-48页
4 生物催化法还原 COBE 转化条件研究第48-65页
   ·前言第48页
   ·材料与方法第48-52页
     ·材料第48-50页
       ·试剂与原材料第48-49页
       ·菌种第49页
       ·仪器与设备第49页
       ·培养基第49-50页
     ·实验方法第50-52页
       ·菌种培养方法第50页
       ·酶源的获得第50页
       ·游离细胞转化方法第50页
       ·固定化细胞的制备第50-51页
       ·固定化细胞的转化方法第51页
       ·COBE/CHBE 浓度分析第51页
       ·产物 CHBE 对映体过量值(e.e.)测定第51-52页
   ·结果与讨论第52-63页
     ·不对称还原条件研究第52-59页
       ·辅助底物的种类对转化的影响第52-53页
       ·不同葡萄糖浓度对转化的影响第53页
       ·底物添加方式的比较第53-55页
       ·底物浓度对转化率及对映体过量值的影响第55-56页
       ·细胞浓度对转化的影响第56页
       ·不同温度对转化的影响第56-57页
       ·反应体系不同pH 对转化的影响第57-58页
       ·转化时间曲线第58-59页
     ·固定化细胞转化条件的初步研究第59-63页
       ·用不同包埋方法制备固定化细胞的比较第59-60页
       ·固定化细胞的最适添加量实验第60页
       ·pH 对转化的影响第60-61页
       ·温度对转化的影响第61-62页
       ·固定化细胞的转化时间曲线第62页
       ·游离菌与固定化重复利用对照实验第62-63页
   ·本章小结第63-64页
 参考文献第64-65页
5 转化产物 CHBE 的提取纯化及结构鉴定第65-74页
   ·前言第65页
   ·材料与方法第65-69页
     ·材料第65-66页
       ·试剂与原材料第65-66页
       ·菌种第66页
       ·仪器与设备第66页
       ·培养基第66页
     ·实验方法第66-69页
       ·菌种培养方法第67页
       ·酶源的获得第67页
       ·CHBE 的制备方法第67页
       ·产物提取纯化方法第67-69页
       ·纯度测定第69页
       ·比旋光度的测定第69页
   ·结果与讨论第69-73页
     ·产品的提取第69-70页
     ·产品的纯化第70-71页
       ·减压蒸馏第70页
       ·硅胶柱层析第70-71页
     ·产品鉴定第71-73页
       ·CHBE 的旋光度分析第71页
       ·产物的定性测定第71-72页
       ·核磁共振 NMR 分析第72-73页
   ·本章小结第73页
 参考文献第73-74页
结论与展望第74-76页
附录第76-82页
致谢第82-83页
硕士期间发表文章第83页

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