中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
缩略表 | 第9-11页 |
第一章 前言 | 第11-25页 |
一 盐胁迫对植物的伤害及植物耐盐的分子机理 | 第11-17页 |
1 盐胁迫对植物的伤害 | 第11-13页 |
1.1 抑制种子的萌发 | 第11页 |
1.2 盐分对植物生长发育的影响 | 第11-12页 |
1.3 植物光合作用的抑制 | 第12页 |
1.4 渗透胁迫的伤害 | 第12页 |
1.5 营养胁迫的伤害 | 第12页 |
1.6 盐分对质膜的伤害和活性氧的影响 | 第12-13页 |
2 植物耐盐的分子机理 | 第13-17页 |
2.1 细胞内的渗透调节机制 | 第13页 |
2.2 离子平衡调节机制 | 第13-16页 |
2.3 清除活性氧的膜保护系统 | 第16-17页 |
2.4 其它机制 | 第17页 |
二 植物耐盐基因工程 | 第17-22页 |
1 耐盐基因的遗传转化 | 第17-20页 |
1.1 转渗透调节物质合成的关键酶基因 | 第18页 |
1.2 转清除活性氧的酶基因 | 第18-19页 |
1.3 转转录因子基因 | 第19页 |
1.4 转编码逆向转运蛋白基因 | 第19-20页 |
2 植物的遗传转化 | 第20-22页 |
2.1 农杆菌转化的载体系统 | 第20-21页 |
2.2 农杆菌转化系统的优点 | 第21页 |
2.3 影响农杆菌介导的植物转化的因素 | 第21-22页 |
三 Na~+/H~+逆向转运蛋白研究进展 | 第22-24页 |
1 Na~+/H~+逆向转运蛋白的发现 | 第22页 |
2 Na~+/H~+逆向转运蛋白分子的结构 | 第22-23页 |
3 Na~+/H~+逆向转运蛋白与植物耐盐性的关系 | 第23-24页 |
四 本研究的主要目的及研究内容 | 第24-25页 |
1 本研究的主要目的 | 第24页 |
2 主要研究内容 | 第24-25页 |
第二章 转SynNhap基因烟草耐盐性的检测 | 第25-31页 |
一 材料与方法 | 第25-26页 |
1 材料 | 第25页 |
1.1 植物材料 | 第25页 |
1.2 试剂及仪器 | 第25页 |
2 方法 | 第25-26页 |
2.1 分子检测 | 第25-26页 |
2.2 发芽率的检测 | 第26页 |
2.3 植物的存活率 | 第26页 |
2.4 叶绿素含量的测定 | 第26页 |
2.5 耐盐性表现 | 第26页 |
2.6 Na~+含量的测定 | 第26页 |
二 结果与分析 | 第26-29页 |
1 分子检测 | 第27页 |
2 盐胁迫下转基因烟草的发芽及生存情况 | 第27-28页 |
3 叶绿素含量的测定 | 第28页 |
4 耐盐性表现 | 第28-29页 |
5 Na~+含量的测定 | 第29页 |
三 讨论 | 第29-31页 |
第三章 盐胁迫对转SynNhap基因烟草保护酶系统的影响 | 第31-37页 |
一 材料与方法 | 第31-33页 |
1 材料 | 第31页 |
1.1 植物材料 | 第31页 |
1.2 试剂和仪器 | 第31页 |
2 方法 | 第31-33页 |
2.1 盐胁迫处理 | 第31页 |
2.2 膜保护酶活性的测定 | 第31-32页 |
2.3 MDA含量的测定 | 第32页 |
2.4细胞膜透性测定 | 第32-33页 |
二 结果与分析 | 第33-35页 |
1.CAT活性变化 | 第33页 |
2.SOD活性变化 | 第33页 |
3.POD活性变化 | 第33-34页 |
4.MDA活性变化 | 第34页 |
5.叶片质膜通透性的变化 | 第34-35页 |
三 讨论 | 第35-37页 |
第四章 农杆菌介导SynNhap基因转化番茄的研究 | 第37-45页 |
一 材料与方法 | 第37-42页 |
1 材料 | 第37-39页 |
1.1 植物材料 | 第37页 |
1.2 菌株和质粒 | 第37页 |
1.3 植物激素 | 第37页 |
1.4 培养基 | 第37页 |
1.5 酶和生化试剂 | 第37页 |
1.6 主要实验仪器和设备 | 第37页 |
1.7 常用培养基和溶液的配置 | 第37-39页 |
2 方法 | 第39-42页 |
2.1 番茄的组织培养 | 第39页 |
2.2 农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第39-40页 |
2.3 转基因植株的检测 | 第40-42页 |
二 结果与分析 | 第42-43页 |
1 重组质粒的酶切鉴定 | 第42页 |
2 pBI121-SynNhap质粒转化农杆菌LBA4404 | 第42-43页 |
3 GUS活性的组织化学检测 | 第43页 |
4 PCR检测 | 第43页 |
三 讨论 | 第43-45页 |
1 外源基因在植物转化中的影响因素 | 第43-44页 |
2 关于转基因植物的筛选问题 | 第44页 |
3 GUS组织化学检测的假阳性 | 第44页 |
4 异源转化具有一定的盲目性 | 第44-45页 |
第五章 农杆菌介导SynNhap基因转化苜蓿的研究 | 第45-50页 |
一 材料与方法 | 第45-47页 |
1 材料 | 第45-46页 |
1.1 植物材料 | 第45页 |
1.2 菌株和质粒 | 第45页 |
1.3 培养基 | 第45-46页 |
1.4 酶和生化试剂 | 第46页 |
1.5 主要实验仪器和设备 | 第46页 |
1.6 GUS组织化学染色液配制 | 第46页 |
2 方法 | 第46-47页 |
2.1 苜蓿无菌苗的培养 | 第46页 |
2.2 侵染菌液的制备 | 第46页 |
2.3 感染和共培养 | 第46-47页 |
2.4 转化体的筛选、继代 | 第47页 |
2.5 GUS活性的组织化学检测 | 第47页 |
二 结果与分析 | 第47-48页 |
1 培养基的类型和外植体的种类对诱导抗性愈伤组织的影响 | 第47页 |
2 外植体预培养对转化的影响 | 第47-48页 |
3 GUS检测结果 | 第48页 |
三 讨论 | 第48-50页 |
1 培养基的类型和外植体的种类对诱导抗性愈伤组织的影响 | 第48页 |
2 外植体预培养对转化效率的影响 | 第48-49页 |
3 其它因素对转化效率的影响 | 第49页 |
4 本研究的现状 | 第49-50页 |
第六章 SynNhap基因原核表达的研究 | 第50-58页 |
一 材料与方法 | 第50-55页 |
1 材料 | 第50页 |
1.1 常规菌种和质粒 | 第50页 |
1.2 试剂 | 第50页 |
1.3 仪器 | 第50页 |
1.4 电泳缓冲液 | 第50页 |
2 方法 | 第50-55页 |
2.1 SynNhap基因原核表达载体的构建 | 第50-52页 |
2.2 将重组质粒pTWIN1-SynNhap转化受体菌ER2566 | 第52-53页 |
2.3 SynNhap基因的诱导 | 第53页 |
2.4 检测SynNhap基因的表达 | 第53-55页 |
二 结果与分析 | 第55-56页 |
1 SynNhap基因原核表达载体的构建 | 第55-56页 |
2 SynNhap基因的诱导表达及表达产物的SDS-PAGE分析 | 第56页 |
三 讨论 | 第56-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
图版Ⅰ 番茄遗传转化过程图示 | 第67-68页 |
图版Ⅱ 苜蓿子叶侵染后获得抗性愈伤组织的过程图示 | 第68页 |