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蓝藻Na~+/H~+ Antiporter基因的遗传转化研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-9页
缩略表第9-11页
第一章 前言第11-25页
 一 盐胁迫对植物的伤害及植物耐盐的分子机理第11-17页
  1 盐胁迫对植物的伤害第11-13页
   1.1 抑制种子的萌发第11页
   1.2 盐分对植物生长发育的影响第11-12页
   1.3 植物光合作用的抑制第12页
   1.4 渗透胁迫的伤害第12页
   1.5 营养胁迫的伤害第12页
   1.6 盐分对质膜的伤害和活性氧的影响第12-13页
  2 植物耐盐的分子机理第13-17页
   2.1 细胞内的渗透调节机制第13页
   2.2 离子平衡调节机制第13-16页
   2.3 清除活性氧的膜保护系统第16-17页
   2.4 其它机制第17页
 二 植物耐盐基因工程第17-22页
  1 耐盐基因的遗传转化第17-20页
   1.1 转渗透调节物质合成的关键酶基因第18页
   1.2 转清除活性氧的酶基因第18-19页
   1.3 转转录因子基因第19页
   1.4 转编码逆向转运蛋白基因第19-20页
  2 植物的遗传转化第20-22页
   2.1 农杆菌转化的载体系统第20-21页
   2.2 农杆菌转化系统的优点第21页
   2.3 影响农杆菌介导的植物转化的因素第21-22页
 三 Na~+/H~+逆向转运蛋白研究进展第22-24页
  1 Na~+/H~+逆向转运蛋白的发现第22页
  2 Na~+/H~+逆向转运蛋白分子的结构第22-23页
  3 Na~+/H~+逆向转运蛋白与植物耐盐性的关系第23-24页
 四 本研究的主要目的及研究内容第24-25页
  1 本研究的主要目的第24页
  2 主要研究内容第24-25页
第二章 转SynNhap基因烟草耐盐性的检测第25-31页
 一 材料与方法第25-26页
  1 材料第25页
   1.1 植物材料第25页
   1.2 试剂及仪器第25页
  2 方法第25-26页
   2.1 分子检测第25-26页
   2.2 发芽率的检测第26页
   2.3 植物的存活率第26页
   2.4 叶绿素含量的测定第26页
   2.5 耐盐性表现第26页
   2.6 Na~+含量的测定第26页
 二 结果与分析第26-29页
  1 分子检测第27页
  2 盐胁迫下转基因烟草的发芽及生存情况第27-28页
  3 叶绿素含量的测定第28页
  4 耐盐性表现第28-29页
  5 Na~+含量的测定第29页
 三 讨论第29-31页
第三章 盐胁迫对转SynNhap基因烟草保护酶系统的影响第31-37页
 一 材料与方法第31-33页
  1 材料第31页
   1.1 植物材料第31页
   1.2 试剂和仪器第31页
  2 方法第31-33页
   2.1 盐胁迫处理第31页
   2.2 膜保护酶活性的测定第31-32页
   2.3 MDA含量的测定第32页
   2.4细胞膜透性测定第32-33页
 二 结果与分析第33-35页
  1.CAT活性变化第33页
  2.SOD活性变化第33页
  3.POD活性变化第33-34页
  4.MDA活性变化第34页
  5.叶片质膜通透性的变化第34-35页
 三 讨论第35-37页
第四章 农杆菌介导SynNhap基因转化番茄的研究第37-45页
 一 材料与方法第37-42页
  1 材料第37-39页
   1.1 植物材料第37页
   1.2 菌株和质粒第37页
   1.3 植物激素第37页
   1.4 培养基第37页
   1.5 酶和生化试剂第37页
   1.6 主要实验仪器和设备第37页
   1.7 常用培养基和溶液的配置第37-39页
  2 方法第39-42页
   2.1 番茄的组织培养第39页
   2.2 农杆菌介导的番茄遗传转化第39-40页
   2.3 转基因植株的检测第40-42页
 二 结果与分析第42-43页
  1 重组质粒的酶切鉴定第42页
  2 pBI121-SynNhap质粒转化农杆菌LBA4404第42-43页
  3 GUS活性的组织化学检测第43页
  4 PCR检测第43页
 三 讨论第43-45页
  1 外源基因在植物转化中的影响因素第43-44页
  2 关于转基因植物的筛选问题第44页
  3 GUS组织化学检测的假阳性第44页
  4 异源转化具有一定的盲目性第44-45页
第五章 农杆菌介导SynNhap基因转化苜蓿的研究第45-50页
 一 材料与方法第45-47页
  1 材料第45-46页
   1.1 植物材料第45页
   1.2 菌株和质粒第45页
   1.3 培养基第45-46页
   1.4 酶和生化试剂第46页
   1.5 主要实验仪器和设备第46页
   1.6 GUS组织化学染色液配制第46页
  2 方法第46-47页
   2.1 苜蓿无菌苗的培养第46页
   2.2 侵染菌液的制备第46页
   2.3 感染和共培养第46-47页
   2.4 转化体的筛选、继代第47页
   2.5 GUS活性的组织化学检测第47页
 二 结果与分析第47-48页
  1 培养基的类型和外植体的种类对诱导抗性愈伤组织的影响第47页
  2 外植体预培养对转化的影响第47-48页
  3 GUS检测结果第48页
 三 讨论第48-50页
  1 培养基的类型和外植体的种类对诱导抗性愈伤组织的影响第48页
  2 外植体预培养对转化效率的影响第48-49页
  3 其它因素对转化效率的影响第49页
  4 本研究的现状第49-50页
第六章 SynNhap基因原核表达的研究第50-58页
 一 材料与方法第50-55页
  1 材料第50页
   1.1 常规菌种和质粒第50页
   1.2 试剂第50页
   1.3 仪器第50页
   1.4 电泳缓冲液第50页
  2 方法第50-55页
   2.1 SynNhap基因原核表达载体的构建第50-52页
   2.2 将重组质粒pTWIN1-SynNhap转化受体菌ER2566第52-53页
   2.3 SynNhap基因的诱导第53页
   2.4 检测SynNhap基因的表达第53-55页
 二 结果与分析第55-56页
  1 SynNhap基因原核表达载体的构建第55-56页
  2 SynNhap基因的诱导表达及表达产物的SDS-PAGE分析第56页
 三 讨论第56-58页
结论第58-59页
参考文献第59-66页
致谢第66-67页
图版Ⅰ 番茄遗传转化过程图示第67-68页
图版Ⅱ 苜蓿子叶侵染后获得抗性愈伤组织的过程图示第68页

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