中文摘要 | 第1-3页 |
英文摘要 | 第3-9页 |
插图和附表清单 | 第9-11页 |
符号与缩写 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-31页 |
1.1 项目来源与目的意义 | 第12页 |
1.2 乙烯对植物生长发育的意义 | 第12-17页 |
1.2.1 乙烯调节休眠和种子萌发 | 第12-13页 |
1.2.2 乙烯诱导三重反应并调控根、茎和枝叶的生长 | 第13-14页 |
1.2.3 增加雌花率 | 第14页 |
1.2.4 促进器官衰老与脱落 | 第14-16页 |
1.2.5 促进果实成熟 | 第16页 |
1.2.6 调控胁迫反应 | 第16-17页 |
1.3 乙烯生物合成的调控 | 第17-19页 |
1.3.1 ACC合成酶 | 第17-19页 |
1.3.2 ACC氧化酶 | 第19页 |
1.3.3 乙烯合成的反馈调控 | 第19页 |
1.4 拟南芥乙烯信号转导研究进展 | 第19-24页 |
1.4.1 乙烯信号转导线性模型 | 第19-20页 |
1.4.2 乙烯受体结构 | 第20-21页 |
1.4.3 乙烯受体对乙烯反应的负调控 | 第21-22页 |
1.4.4 乙烯受体与CTR1共同实现负调控 | 第22-23页 |
1.4.5 乙烯信号转导途径的正调控 | 第23-24页 |
1.5 乙烯与其它植物激素的相互关系 | 第24-25页 |
1.5.1 乙烯与脱落酸和生长素的关系 | 第24-25页 |
1.5.2 乙烯与其它植物激素的关系 | 第25页 |
1.6 番茄果实成熟突变体和乙烯信号转导研究进展 | 第25-28页 |
1.6.1 番茄果实成熟变体 | 第26-27页 |
1.6.2 番茄乙烯信号转导 | 第27-28页 |
1.7 反义RNA技术在植物基因工程中的研究进展 | 第28-30页 |
1.7.1 反义RNA在真核生物细胞中的作用原理 | 第28-29页 |
1.7.2 反义RNA在植物上的应用 | 第29-30页 |
1.8 本项研究工作基础与目标 | 第30-31页 |
第二章 反义LeETR1和LeETR2基因株系的鉴定 | 第31-35页 |
2.1 前言 | 第31页 |
2.2 材料与方法 | 第31-33页 |
2.2.1 标记基因NPT Ⅱ PCR鉴定 | 第31-32页 |
2.2.2 标记基因NPT Ⅱ的Southern blot分析 | 第32页 |
2.2.3 反义序列的PCR鉴定 | 第32页 |
2.2.4 β-葡萄糖苷酸酶(GUS)活性鉴定 | 第32-33页 |
2.3 结果 | 第33-34页 |
2.3.1 标记基因NPT Ⅱ PCR扩增结果均为阳性 | 第33页 |
2.3.2 转基因株系npt Ⅱ基因Southern blot结果 | 第33页 |
2.3.3 反义序列的PCR扩增结果 | 第33-34页 |
2.3.4 GUS活性鉴定结果 | 第34页 |
2.4 结论 | 第34-35页 |
第三章 乙烯受体LeETR1和LeETR2与番茄植侏生长发育的关系 | 第35-42页 |
3.1 前言 | 第35页 |
3.2 材料与方法 | 第35-36页 |
3.2.1 三重反应试验 | 第35页 |
3.2.2 成长植株形态特征调查 | 第35-36页 |
3.3 结果与分析 | 第36-40页 |
3.3.1 反义转基因株系遮光幼苗上胚轴缩短增粗 | 第36-37页 |
3.3.2 乙烯受体基因反义表达对株高和主茎的影响 | 第37-38页 |
3.3.3 叶柄上位生长特性 | 第38页 |
3.3.4 侧枝发育情况 | 第38-39页 |
3.3.5 开花和花序发育特征 | 第39页 |
3.3.6 开花期和座果率的变化 | 第39-40页 |
3.4 讨论 | 第40-42页 |
第四章 乙烯受体LeETR1和LeETR2与衰老和脱落的关系 | 第42-47页 |
4.1 前言 | 第42页 |
4.2 材料与方法 | 第42-43页 |
4.2.1 叶柄外植体脱落试验处理方法 | 第42页 |
4.2.2 花梗外植体脱落试验处理方法 | 第42页 |
4.2.3 花外植体衰老试验处理方法 | 第42-43页 |
4.2.4 乙烯和1-MCP处理方法 | 第43页 |
4.3 结果 | 第43-45页 |
4.3.1 叶柄和花梗外植体脱落 | 第43-44页 |
4.3.2 花朵衰老特征 | 第44-45页 |
4.4 讨论 | 第45-47页 |
第五章 乙烯受体LeETR1和LeETR2与果实成熟的关系 | 第47-56页 |
5.1 前言 | 第47页 |
5.2 材料与方法 | 第47-49页 |
5.2.1 果实呼吸强度测定 | 第47-48页 |
5.2.2 果实色泽测定方法 | 第48页 |
5.2.3 色素含量测定方法 | 第48页 |
5.2.4 果实硬度测定方法 | 第48页 |
5.2.5 果胶酶和果胶酯酶活性测定方法 | 第48-49页 |
5.3 结果 | 第49-55页 |
5.3.1 呼吸强度和乙烯释放量的变化 | 第49-50页 |
5.3.2 果实成熟过程色泽变化 | 第50-54页 |
5.3.3 果实成熟过程质地变化 | 第54-55页 |
5.4 讨论 | 第55-56页 |
第六章 LeETR1和LeETR2反义转基因番茄乙烯合成特性 | 第56-62页 |
6.1 前言 | 第56页 |
6.2 材料与方法 | 第56-57页 |
6.2.1 乙烯测定方法 | 第56-57页 |
6.2.2 花、叶乙烯释放量测定 | 第57页 |
6.2.3 果实成熟过程乙烯释放量测定 | 第57页 |
6.2.4 果实伤害乙烯测定 | 第57页 |
6.2.5 ACC含量和ACO活性测定方法 | 第57页 |
6.3 结果 | 第57-60页 |
6.3.1 花、叶乙烯产量 | 第57-58页 |
6.3.2 果实成熟过程乙烯释放量 | 第58-59页 |
6.3.4 伤害果实乙烯释放量 | 第59页 |
6.3.5 果实成熟过程ACC含量和ACO活性的变化 | 第59-60页 |
6.4 讨论 | 第60-62页 |
第七章 LeETR1和LeETR2反义转基因番茄的乙烯受体基因家族表达特性 | 第62-70页 |
7.1 前言 | 第62页 |
7.2 材料与方法 | 第62-64页 |
7.2.1 植物材料 | 第62-63页 |
7.2.2 RNA提取 | 第63页 |
7.2.3 探针合成的模板制备 | 第63页 |
7.2.4 探针合成与纯化 | 第63-64页 |
7.2.5 核酸酶保护分析操作 | 第64页 |
7.3 结果 | 第64-68页 |
7.3.1 RNA探针合成结果 | 第65-66页 |
7.3.2 LeETR1-LeETR5 mRNA表达丰度的RPA结果 | 第66-68页 |
7.4 讨论 | 第68-70页 |
第八章 总结与讨论 | 第70-79页 |
8.1 实验结果总结 | 第70-71页 |
8.2 乙烯受体表达与乙烯合成和乙烯反应的关系 | 第71-72页 |
8.3 乙烯受体家族成员结构差异与功能特性 | 第72-74页 |
8.4 乙烯受体基因家族成员表达时空差异与功能特异性 | 第74-77页 |
8.5 问题与新的研究方向 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-93页 |
致谢 | 第93-94页 |
作者简历 | 第94页 |