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野油菜黄单胞菌中编码磷酸葡萄糖异构酶的基因与致病性相关

第一章 前言第1-25页
   ·野油菜黄单胞菌致病机理研究进展第9-13页
     ·野油菜黄单胞菌概述第9页
     ·野油菜黄单胞菌的基因组结构第9-10页
     ·野油菜黄单胞菌的主要致病生化因子第10-13页
     ·黄单胞菌致病相关基因第13页
   ·病原菌碳代谢第13-20页
     ·微生物的碳源代谢第13-15页
     ·病原菌碳代谢的生理意义-代谢反应对宿主信号应答与病原微生物的致病性相关第15-20页
       ·碳源利用能力在适应性应答调节致病性中的作用第15-18页
       ·代谢对环境营养压力的适应性应答是维持致病性必须第18-20页
   ·糖异生-适应寄主免疫反应造成的的碳源饥饿第20-24页
     ·碳饥饿的产生第20页
     ·糖异生途径是碳饥饿条件下病原菌通常采用的代谢通路第20-23页
     ·糖异生途径的磷酸葡萄糖异构酶参与多种生物学功能第23-24页
   ·本研究工作的目的、内容及意义第24-25页
     ·目的与内容第24页
     ·意义第24-25页
第二章 材料和方法第25-37页
   ·材料第25-28页
     ·本实验所用菌株和质粒(表2-1)第25-26页
     ·培养基及生长条件第26-27页
     ·抗生素和其他药剂储存、使用浓度(表2-2)第27页
     ·溶液与缓冲液第27-28页
   ·方法第28-37页
     ·DNA的提取第28页
       ·DNA提取第28页
       ·质粒的提取第28页
     ·鉴定DNA第28-29页
       ·限制性内切酶酶切第28-29页
       ·DNA电泳--琼脂糖凝胶电泳第29页
     ·连接和转化第29-30页
       ·连接第29页
       ·电脉冲转化第29-30页
     ·感受态细胞的制备第30页
     ·PCR反应第30-32页
     ·细菌生长曲线的测定第32-33页
     ·细菌的三亲本接合第33页
     ·植株试验第33-34页
     ·表型检测第34-35页
     ·从叶片中回收被接种的被测菌第35-37页
第三章 结果与分析第37-49页
   ·pgi基因突变体的构建第37-38页
     ·带有pgi基因的部分序列的pK18mob重组质粒的构建第37页
     ·pgi基因整合突变体的获得第37-38页
   ·pgi突变体互补株的构建第38-41页
     ·完整的pgi基因的PCR克隆第38-39页
     ·将重组质粒导入pgi突变体2379pK第39-41页
   ·pgi基因突变体的表型检测第41-49页
     ·碳源利用利用检测第41-45页
     ·胞外多糖检测第45-46页
     ·致病性检测第46-47页
     ·2379pK和C2379pKR3互补菌的寄主叶内生长繁殖情况检测第47-48页
     ·8004和2379pK整合突变体存NYGB中的生长(图3.12)第48-49页
第四章 讨论第49-54页
   ·pgi基因编码的六磷酸葡萄糖异构酶是Xcc糖异生途径的一个关键酶第49页
   ·pgi基因突变体中糖酵解功能不受影响第49-50页
   ·关于突变体在葡萄糖、蔗糖上与其他碳源上EPS合成的差异第50页
   ·pgi基因与旁侧基因转录关系分析第50页
   ·小结第50-54页
参考文献第54-58页
致谢第58页

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