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美洲大蠊(Periplaneta americana L.)抗菌肽的研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
第一章 绪论第13-37页
 引言第13页
 1 昆虫的免疫第13-16页
   ·昆虫的免疫系统与功能第13-14页
   ·昆虫免疫的主要组成第14-16页
     ·昆虫免疫系统对外源异物的识别第14页
     ·昆虫的细胞免疫第14-15页
     ·昆虫的非细胞免疫第15-16页
       ·融菌酶第15页
       ·抗菌蛋白第15-16页
       ·抗菌肽第16页
 2 昆虫抗菌肽的研究第16-37页
   ·抗菌肽的诱导与分离纯化第16-18页
     ·诱导源第16页
     ·种属特异性第16-17页
     ·抗菌肽的分离纯化第17页
     ·抗菌肽的诱导机理第17-18页
     ·抗菌肽产生的部位与动力学第18页
   ·抗菌肽的种类、结构与功能第18-26页
     ·天蚕素第19-23页
       ·天蚕素的结构与功能第20-22页
       ·麻蝇素的结构与功能第22页
       ·果蝇的天蚕素第22-23页
     ·环状抗菌肽第23-25页
       ·防卫素第23页
       ·麻蝇防卫素第23-24页
       ·绿蝇防卫素第24页
       ·蜜蜂防卫素第24-25页
     ·富脯氨酸抗菌肽第25页
     ·富甘氨酸抗菌肽第25-26页
   ·抗菌肽的生物活性第26-28页
     ·对细菌的杀伤作用第27页
     ·对真菌的杀伤作用第27页
     ·对原虫的杀伤作用第27-28页
     ·对病毒的杀伤作用第28页
     ·对癌细胞的杀伤作用第28页
   ·抗菌肽生物活性的检测第28-29页
   ·抗菌肽的抑菌机制第29-31页
     ·孔洞学说第29-31页
       ·天蚕素作用机制第30页
       ·麻蝇素作用机制第30页
       ·防卫素作用机制第30-31页
     ·膜崩溃学说第31页
   ·抗菌肽的分子生物学第31-35页
     ·抗菌肽基因的分子生物学第31-33页
     ·抗菌肽基因的合成第33页
     ·抗菌肽基因的表达调控第33-34页
     ·抗菌肽的基因调控第34-35页
   ·应用及展望第35-37页
第二章 美洲大蠊抗菌肽的诱导第37-50页
 前言第37页
 1 材料与方法第37-39页
   ·材料第37-38页
   ·方法第38-39页
     ·诱导源的制备第38页
     ·生物活性的测定方法第38页
     ·不同龄期诱导差异第38页
     ·不同性别成虫诱导差异第38页
     ·不同诱导源的诱导活性第38-39页
     ·血淋巴的提取第39页
     ·诱导强度的选择第39页
     ·体液防卫的有效期第39页
     ·倍比稀释效应第39页
 2 结果与分析第39-48页
   ·不同龄期美洲大蠊的诱导差异第39-41页
   ·不同性别成虫诱导差异第41-43页
   ·不同诱导源的诱导活性第43-44页
     ·紫外线诱导的时间选择第43页
     ·超声波诱导的时间选择第43-44页
     ·不同诱导源的诱导活性及活性产生的时间第44页
   ·血淋巴的提取量第44-45页
   ·诱导强度与活力的关系第45-46页
   ·抑菌活力与时间关系的测定第46-47页
   ·抗性血淋巴倍比稀释结果第47-48页
 3 讨论第48-50页
第三章 美洲大蠊抗菌肽的分离与纯化第50-60页
 前言第50页
 1 材料与方法第50-53页
   ·材料第50页
   ·方法第50-53页
     ·菌悬液的配制第50-51页
     ·血淋巴的收集第51页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第51页
     ·SDS-PAGE测定分子量第51-52页
     ·等电聚焦电泳第52页
     ·层析柱的准备第52-53页
       ·葡聚糖凝胶G-25层析柱第52页
       ·葡聚糖凝胶G-100层析柱第52页
       ·DEAE-纤维素层析柱第52-53页
     ·层析柱的再生第53页
     ·层析产物的浓缩及活性检测第53页
     ·免疫印迹第53页
 2 结论第53-59页
   ·诱导结果的检测第53页
   ·抗菌肽的分离第53-59页
   ·免疫印迹及序列测定第59页
 3 讨论第59-60页
第四章 美洲大蠊抗菌肽的抑菌效应第60-68页
 前言第60页
 1 材料与方法第60-61页
   ·材料第60页
   ·方法第60-61页
     ·抑菌活力的测定第60-61页
     ·倍比稀释效应第61页
     ·温度对抑菌活性的影响第61页
     ·加热时间对抑菌活性的影响第61页
     ·乙酸铵处理对抑菌活性的影响第61页
     ·不同pH溶液处理第61页
     ·室温放置不同时间第61页
     ·冻融次数第61页
 2 结果与分析第61-66页
   ·抑菌活力测定第61-62页
   ·倍比稀释效应第62-63页
   ·温度对抑菌活性的影响第63-64页
   ·加热时间对抑菌活性的影响第64页
   ·乙酸铵处理对抑菌活性的影第64-65页
   ·不同pH溶液处理对抑菌活性的影响第65页
   ·室温放置不同时间对抑菌活性的影响第65-66页
   ·冻融次数对抑菌活性的影响第66页
 3 讨论第66-68页
第五章 美洲大蠊诱导后生化反应第68-82页
 前言第68页
 1 材料与方法第68-70页
   ·材料第68-69页
   ·方法第69-70页
     ·不同发育阶段诱导后蛋白质的比较第69页
     ·成虫诱导后血淋巴蛋白质的比较第69页
     ·成虫诱导后不同部位蛋白质的比较第69-70页
     ·成虫诱导后总氨基酸含量的变化第70页
     ·成虫诱导后酯酶同功酶的变化第70页
     ·成虫诱导后脂肪体含量的变化及抑菌效应第70页
 2 结论第70-79页
   ·不同发育阶段诱导前后蛋白质的比较第70-72页
   ·成虫诱导后血淋巴蛋白质的比较第72-74页
     ·蛋白质含量的变化第72-73页
     ·蛋白质扫描图谱比较第73-74页
   ·成虫诱导后不同部位蛋白质的比较第74页
   ·成虫诱导后总氨基酸含量的变化第74-77页
   ·成虫诱导后酯酶同功酶的变化第77-78页
   ·成虫诱导后脂肪体含量的变化及抑菌效应第78-79页
 3 讨论第79-82页
第六章 美洲大蠊抗菌肽的杀菌机理第82-86页
 前言第82页
 1 材料与方法第82-83页
   ·材料第82页
   ·方法第82-83页
     ·抗菌肽的抑菌效应第82页
     ·电镜样品的制备第82-83页
 2 结论第83-84页
   ·抗菌肽的抑菌效应第83页
   ·电镜观察抗菌肽对大肠杆菌的作用机制第83-84页
 3 讨论第84-86页
第七章 总论第86-89页
 1 美洲大蠊抗菌活性的诱导及抗性血淋巴的提取第86页
 2 美洲大蠊抗菌肽的性质及抑菌效应第86-87页
 3 美洲大蠊诱导后生化的反应第87-88页
 4 美洲大蠊抗菌肽抑菌机理第88-89页
参考文献第89-101页
致谢第101页

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