| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 英文缩写 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-25页 |
| 1 阿维菌素概述 | 第13-15页 |
| 2 阿维菌素的生物活性和安全性 | 第15页 |
| 3 阿维菌素的生物合成 | 第15-17页 |
| ·同位素标记 | 第16页 |
| ·阿维菌素生物合成的阻断变株 | 第16-17页 |
| 4 阿维菌素生物合成基因 | 第17-19页 |
| 5 阿维菌素化学结构与生物活性关系 | 第19-20页 |
| ·游离羟基对活性影响 | 第19页 |
| ·竹桃糖C_3~′-O-甲基及C_3~″-O-甲基对活性的影响 | 第19-20页 |
| ·取代糖数目对活性的影响 | 第20页 |
| 6 国外在阿维菌素菌种选育中取得的进展 | 第20-23页 |
| ·阿维菌素B_(1a)及B_(2a)选择性生产 | 第20-21页 |
| ·C_5-酮阿维菌素B_(1a)及B_(2a)选择性生产 | 第21页 |
| ·阿维菌素B_(2a)的选择性生产 | 第21-22页 |
| ·去甲基阿维菌素的积累 | 第22页 |
| ·C25位上的修饰 | 第22页 |
| ·阿维菌素6，8a-交联-6，8a脱氧衍生物的产生 | 第22-23页 |
| ·有毒化合物oligomycin的去除 | 第23页 |
| 7 国内研究现状 | 第23-24页 |
| 8 本实验立题依据及研究目的 | 第24-25页 |
| 实验材料与方法 | 第25-39页 |
| 1 实验材料 | 第25-30页 |
| ·菌种与质粒 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·试剂 | 第27-28页 |
| ·溶液 | 第28-29页 |
| ·仪器 | 第29-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-39页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA小量提取 | 第30-31页 |
| ·链霉菌总DNA提取 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌DH-5α感受态细胞的制备和DNA转化 | 第32页 |
| ·DNA酶切和连接 | 第32-33页 |
| ·DNA电泳和凝胶片段回收 | 第33-34页 |
| ·阿维菌素基因置换菌株的发酵、产物提取及检测 | 第34-36页 |
| ·重组质粒的接合转移及基因置换菌株的获得 | 第36-37页 |
| ·Southern hybridization(萨瑟恩杂交) | 第37-38页 |
| ·溴化乙锭溶液的处理 | 第38-39页 |
| 实验结果 | 第39-63页 |
| 第一部分 质粒pID03和质粒pC05的构建 | 第39-52页 |
| 1 质粒pID03的构建 | 第39-47页 |
| ·aveD基因片段的获取 | 第39-43页 |
| ·质粒pID03的构建骤 | 第43-47页 |
| 2 质粒pC05的构建 | 第47-52页 |
| ·aveC基因片段的获取 | 第47页 |
| ·质粒pC05的构建步骤 | 第47-52页 |
| 第二部分 基因阻断菌株的获得 | 第52-54页 |
| 1 ET12567／pID03，ET12567／pC05通过接合转移导入阿维链霉菌 | 第53-54页 |
| 2 双交换菌株的挑选 | 第54页 |
| 第三部分 发酵产物的检测与结果分析 | 第54-61页 |
| 1 基因阻断菌株的发酵 | 第54页 |
| 2 基因阻断菌株发酵液的提取及检测 | 第54-55页 |
| 3 基因阻断菌株发酵产物的检测结果 | 第55-61页 |
| ·基因阻断菌株(S. avermitilis aveD::apr)发酵产物HPLC检测结果 | 第55-58页 |
| ·基因阻断菌株(S. avermitilis aveD::apr)特殊发酵产物ESI-MS结果 | 第58-60页 |
| ·基因阻断菌株(S. avermitilis aveC::apr)发酵产物HPLC检测结果 | 第60-61页 |
| 第四部分 基因阻断菌株的鉴定 | 第61-63页 |
| 1 基因阻断菌株(S. avermitilis aveD::apr)的鉴定 | 第61-62页 |
| 2 基因阻断菌株(S. avermitilis aveC::apr)的鉴定 | 第62-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 讨论 | 第64-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74页 |
