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类黄酮3,5羟化酶基因的克隆及转化矮牵牛的研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-6页
第一章 前言第6-16页
 1 花卉作物的遗传转化与再生体系研究第6-7页
 2 类黄酮与花色第7-10页
  2.1 花色素的种类及功能第8页
  2.2 类黄酮生物合成途径第8-10页
 3 类黄酮生物合成途径相关酶基因的克隆与分离第10-11页
  3.1 结构基因的分离与克隆第10-11页
  3.2 调节基因的分离与克隆第11页
 4 修饰花色的策略第11-12页
  4.1 引入新基因或通过基因修饰以改变花色第11-12页
  4.2 通过抑制基因活性改变花色第12页
  4.3 导入调节基因而改变花色第12页
  4.4 有义RNA技术(也称共抑制法)改变花色第12页
 5 蓝色花卉的分子育种第12-13页
 6 问题与展望第13-14页
 7 本研究的目的与意义第14-15页
 8 技术路线第15-16页
第二章 基因的克隆与测序第16-45页
 1 材料和方法第16-25页
  1.1 材料与试剂第16页
   1.1.1 材料第16页
   1.1.2 菌种及质粒第16页
   1.1.3 生化试剂第16页
  1.2 方法第16-25页
   1.2.1 矮牵牛(紫蓝色品系)总DNA的提取第16-18页
   1.2.2 PCR引物的设计与合成第18页
   1.2.3 PCR扩增第18-19页
   1.2.4 目的片段的回收第19-20页
   1.2.5 目的片段的克隆第20-25页
   1.2.6 DNA序列分析第25页
 2 结果与分析第25-45页
  2.1 矮牵牛总DNA的提取第25页
  2.2 Hf1、Hf2基因的PCR扩增第25-26页
  2.3 目的DNA片段的回收与克隆第26-28页
  2.4 序列分析第28-45页
第三章 植物表达载体的构建第45-52页
 1 材料和方法第45-48页
  1.1 材料与试剂第45页
   1.1.1 菌种和质粒第45页
   1.1.2 试剂第45页
  1.2 方法第45-48页
   1.2.1 中间载体pC3301-PGN的构建第45-47页
   1.2.2 pC3301-Hf2植物表达载体的构建第47-48页
 2 结果与分析第48-52页
第四章 农杆菌EHA105介导的矮牵牛遗传转化第52-67页
 1 材料和方法第52-58页
  1.1 材料与试剂第52页
   1.1.1 植物材料第52页
   1.1.2 菌种及质粒第52页
   1.1.3 生化试剂第52页
   1.1.4 培养基第52页
  1.2 方法第52-58页
   1.2.1 矮牵牛转化受体系统的建立第52-53页
   1.2.2 PPT梯度预实验第53页
   1.2.3 三亲交配法将pC3301-Hf2植物表达载体导入农杆菌第53-56页
   1.2.4 农杆菌叶盘法转化第56-57页
   1.2.5 转化植株的PCR检测第57页
   1.2.6 转基因植株盆栽鉴定第57-58页
 2 结果与分析第58-67页
  2.1 矮牵牛转化受体系统的建立第58-60页
  2.2 外植体对PPT的敏感性第60-62页
   2.2.1 矮牵牛叶盘分化出芽PPT梯度试验第60-61页
   2.2.2 矮牵牛植株生根PPT梯度试验第61-62页
  2.3 三亲交配法将重组质粒pC3301-Hf2导入农杆菌EHAI05第62-63页
  2.4 农杆菌叶盘法转化第63-66页
  2.5 转基因矮牵牛植株的盆栽观察第66-67页
第五章 结论第67-68页
第六章 讨论第68-70页
 1 F3′,5′H基因的全序列分析第68页
 2 植物表达载体的构建与转化矮牵牛的研究第68-69页
 3 关于转化植株的检测第69页
 4 关于假转化体第69-70页
参考文献第70-74页
缩写词第74-75页
致谢第75页

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