| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-33页 |
| 1 柑橘绿霉病 | 第14-18页 |
| ·柑橘贮运期主要病害 | 第14-16页 |
| ·化学防治在柑橘贮藏期防腐中的应用 | 第16-18页 |
| 2 嘧菌酯 | 第18-25页 |
| ·Strobilurin杀菌剂简介 | 第18-19页 |
| ·QoI的作用位点及strobilurin类杀菌剂作用机理 | 第19-22页 |
| ·bc_1复合物的晶体结构 | 第19页 |
| ·Qo位点抑制剂的作用位点 | 第19-20页 |
| ·Strobilurin类杀菌剂的结构特征及作用方式 | 第20-22页 |
| ·植物病原真菌对strobilurin类杀菌剂的抗药性 | 第22-24页 |
| ·植物病原菌cytb基因序列及结构对QoIs类杀菌剂抗性产生的影响 | 第24-25页 |
| ·嘧菌酯在我国的应用 | 第25页 |
| 3 植物病原菌抗药性的检测方法及特点 | 第25-31页 |
| ·植物病原菌的抗药性 | 第25-27页 |
| ·传统鉴定植物病原菌抗药性的方法 | 第27-28页 |
| ·分子检测技术在植物病原菌抗药性检测中的应用 | 第28-31页 |
| ·PCR方法 | 第28页 |
| ·限制性内切酶片段长度多态性PCR(PCR-RFLP) | 第28-29页 |
| ·单链构象多态性(Single-Strand Conformation Polymorphism,SSCP) | 第29页 |
| ·等位基因专化PCR(Allele-specific PCR,AS-PCR) | 第29-30页 |
| ·实时定量PCR(QRT-PCR) | 第30-31页 |
| 4 本研究的背景 | 第31-33页 |
| 第二章 柑橘绿霉菌对嘧菌酯的敏感性研究 | 第33-42页 |
| 一、前言 | 第33-34页 |
| 二、材料与方法 | 第34-36页 |
| 1 供试材料 | 第34页 |
| 2 实验方法 | 第34-35页 |
| ·孢子萌发最佳观察时间的确定 | 第34页 |
| ·柑橘绿霉病菌孢子对嘧菌酯的敏感性测定 | 第34-35页 |
| ·柑橘绿霉病菌菌丝对嘧菌酯的敏感性测定 | 第35页 |
| 3 数据处理 | 第35-36页 |
| 三、结果与分析 | 第36-40页 |
| 1 柑橘绿霉病菌孢子萌发时间曲线 | 第36页 |
| 2 柑橘绿霉病菌孢子萌发对嘧菌酯的敏感性 | 第36-40页 |
| 3 柑橘绿霉病菌菌丝生长对嘧菌酯敏感性 | 第40页 |
| 四、结论和讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 柑橘绿霉病菌对嘧菌酯的抗性分子机制 | 第42-58页 |
| 一、前言 | 第42页 |
| 二、材料与方法 | 第42-46页 |
| 1 供试材料 | 第42-43页 |
| 2 实验方法 | 第43-46页 |
| ·柑橘绿霉病菌cytb基因氨基酸120-160区域内含子的检测 | 第43-44页 |
| ·抗嘧菌酯的柑橘绿霉菌突变体的获得 | 第44页 |
| ·柑橘绿霉病菌抗性突变体的鉴定 | 第44-45页 |
| ·柑橘绿霉病菌抗性突变体对嘧菌酯的敏感性 | 第45页 |
| ·柑橘绿霉病菌抗嘧菌酯突变体适应性研究 | 第45-46页 |
| ·柑橘绿霉病菌对嘧菌酯的抗性机制 | 第46页 |
| ·柑橘绿霉病菌cytb基因部分序列特异引物的设计: | 第46页 |
| ·柑橘绿霉病菌对嘧菌酯的抗性机制: | 第46页 |
| 三、结果与分析 | 第46-56页 |
| 1 柑橘绿霉病菌cytb基因(Pdctyb)氨基酸120-160区域内含子的检测 | 第46-47页 |
| 2 抗嘧菌酯的柑橘绿霉病菌菌突变体的获得 | 第47-48页 |
| 3 柑橘绿霉病菌抗性突变体的鉴定 | 第48页 |
| 4 柑橘绿霉病菌抗性突变体对嘧菌酯的敏感性 | 第48-50页 |
| 5 柑橘绿霉病菌嘧菌酯抗性突变体的适应性测定 | 第50-51页 |
| ·菌丝生长速率比较 | 第50页 |
| ·产孢能力比较 | 第50-51页 |
| 6 柑橘绿霉病菌对嘧菌酯的抗性分子机制 | 第51-56页 |
| 四、结论 | 第56-57页 |
| 五、讨论 | 第57-58页 |
| 第四章 抗嘧菌酯柑橘绿霉病菌突变体的分子检测方法的建立 | 第58-76页 |
| 一、前言 | 第58-59页 |
| 二、材料与方法 | 第59-61页 |
| 1 供试材料 | 第59页 |
| 2 实验方法 | 第59-61页 |
| ·检测突变体的AS-PCR的特异引物设计 | 第59-60页 |
| ·检测突变体的最佳特异性引物的筛选 | 第60-61页 |
| ·引物的筛选和PCR反应条件和体系的优化: | 第60页 |
| ·引物特异性和稳定性的测试: | 第60-61页 |
| ·柑橘绿霉病菌突变体cytb基因特异引物灵敏性的测定 | 第61页 |
| 三、结果与分析 | 第61-74页 |
| 1 柑橘绿霉病菌突变体cytb基因特异引物的设计 | 第61-62页 |
| 2 柑橘绿霉病菌突变体cytb基因特异引物的筛选 | 第62-74页 |
| ·退火温度、Taq酶浓度和MgCl_2浓度三因子对引物特异性影响及引物的筛选: | 第62-69页 |
| ·cytbMF1/cytbR1引物对 | 第62-65页 |
| ·cytbMF2/cytbR1引物对 | 第65-67页 |
| ·cytbMF3/cytbR1引物对 | 第67-69页 |
| ·退火温度、Taq酶浓度和MgCl_2浓度三因子对引物特异性影响及引物筛选小结 | 第69页 |
| ·初筛引物及其反应条件特异性和稳定性验证: | 第69-72页 |
| ·引物组及其反应条件灵敏性检验 | 第72-74页 |
| 四、结论与讨论 | 第74-76页 |
| 第四章 全文总结和有待开展的工作 | 第76-79页 |
| 1 全文总结 | 第76-77页 |
| 2 有待开展的工作 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-89页 |
| 发表论文情况 | 第89页 |
