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寡雄腐霉的拮抗作用及寡雄蛋白的诱导抗性研究

致谢第1-5页
摘要第5-6页
Abstract第6-8页
目录第8-11页
第一章 文献综述第11-20页
 1 寡雄腐霉的分离方法第11-14页
 2 寡雄腐霉作为生防因子的研究进展第14-17页
   ·寡雄腐霉的拮抗作用第14-16页
     ·真菌寄生作用第15页
     ·抗生作用第15页
     ·诱导植物产生抗性第15-16页
   ·寡雄腐霉对作物的促生作用第16页
   ·寡雄蛋白的研究进展第16-17页
 3 蛋白的分离纯化方法第17-19页
   ·蛋白分离纯化的一般原则第17-18页
   ·蛋白分离纯化的一般方法第18-19页
     ·分子排阻层析法第18页
     ·离子交换层析法第18页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第18-19页
 4 本论文研究背景、目的与内容第19-20页
第二章 寡雄腐霉的分离和鉴定第20-31页
 1 材料与方法第20-25页
   ·材料第20-21页
     ·根围土样采集第20页
     ·土壤悬浮液制备第20页
     ·供试菌株第20-21页
     ·供试培养基第21页
   ·寡雄腐霉的分离与纯化第21-22页
     ·SSDP法第22页
     ·诱集法第22页
   ·菌株的保存第22页
   ·菌株的形态鉴定第22页
   ·菌株的ITS序列测定第22-25页
     ·菌丝体的培养和收集第23页
     ·基因组DNA的提取与纯化第23-24页
     ·基因组DNA浓度测定及片段大小测定第24页
     ·PCR反应第24-25页
 2 结果与分析第25-29页
   ·寡雄腐霉的培养性状及形态特征第25-26页
   ·三种方法分离检测寡雄腐霉的效果比较第26页
   ·不同来源的土壤中寡雄腐霉种群数量的比较第26-27页
   ·不同的寄主菌诱集寡雄腐霉效果的比较第27页
   ·菌株QC05的基因组DNA第27-28页
   ·PCR产物的分子量大小第28页
   ·菌株QC05的rDNA ITS序列比对分析第28-29页
 3 结论与讨论第29-31页
   ·分离检测寡雄腐霉方法的探讨第29页
   ·土壤处理与寡雄腐霉之间的关系第29-31页
第三章 寡雄腐霉对多种病原真菌的拮抗作用第31-40页
 1 材料与方法第31-33页
   ·菌株第31页
   ·培养基第31-32页
     ·沙氏琼脂培养基第31-32页
     ·寡雄腐霉液体培养基第32页
   ·寡雄腐霉与病原真菌的平板对峙培养第32页
     ·与8种植物病原真菌的平板对峙培养第32页
     ·与毛癣菌的平板对峙培养第32页
   ·寡雄腐霉对病原菌拮抗作用的环境扫描电镜观察第32-33页
     ·对尖孢镰刀菌黄瓜专化型拮抗作用的环境扫描电镜观察第32-33页
     ·对毛癣菌拮抗作用的环境扫描电镜观察第33页
   ·寡雄腐霉滤液对毛癣菌生长的影响第33页
 2 结果与分析第33-38页
   ·寡雄腐霉与病原真菌的平板对峙培养第33-35页
     ·与8种植物病原真菌的平板对峙培养第33-35页
     ·与毛癣菌的平板对峙培养第35页
   ·环境扫描电镜观察结果第35-38页
     ·寡雄腐霉对尖孢镰刀菌黄瓜专化型的拮抗作用第35-36页
     ·寡雄腐霉对红色毛癣菌的拮抗作用第36-37页
     ·寡雄腐霉对石膏样毛癣菌的拮抗作用第37-38页
   ·寡雄腐霉滤液对毛癣菌生长的影响第38页
 3 结论与讨论第38-40页
第四章 寡雄蛋白的分离纯化及多克隆抗体制备第40-52页
 1 材料与方法第40-43页
   ·材料第40页
   ·寡雄蛋白粗提液的分离第40-41页
     ·预试验第40-41页
     ·二级硫酸铵沉淀法提取寡雄蛋白粗提液第41页
     ·寡雄腐霉培养液配方的优化第41页
   ·寡雄蛋白的纯化和鉴定第41-42页
   ·寡雄蛋白抗原的准备第42页
   ·寡雄蛋白多克隆抗体的制备第42页
   ·双向免疫扩散试验测定多克隆抗体效价第42-43页
   ·间接ELISA法检测多克隆抗体效价第43页
   ·多抗血清的分离第43页
   ·多克隆抗体的纯化第43页
 2 结果与分析第43-49页
   ·提取寡雄蛋白的预试验第43-44页
   ·二级硫酸铵沉淀法所提取的寡雄蛋白粗提液第44页
   ·寡雄腐霉培养液配方的优化第44-46页
     ·三种配方的培养液中菌丝生长量的比较第44-45页
     ·蛋白质浓度的比较第45页
     ·粗提液中蛋白质成分的比较第45-46页
   ·寡雄蛋白的纯化和鉴定第46-47页
   ·双向免疫扩散试验测定多抗效价第47页
   ·间接ELISA法检测多抗效价第47-49页
 3 结论与讨论第49-52页
   ·二级硫酸铵沉淀法分离寡雄蛋白第49-50页
   ·寡雄腐霉培养液配方的优化第50页
   ·寡雄蛋白的纯化第50页
   ·两种偶联方法的比较第50页
   ·寡雄蛋白溶液和蛋白凝胶的免疫原性比较第50-52页
第五章 寡雄蛋白诱导黄瓜对灰霉病的抗性及体内防御酶活性的变化第52-61页
 1 材料与方法第52-55页
   ·材料第52-53页
     ·供试黄瓜植株第52-53页
     ·供试病原菌第53页
     ·山崎营养液的配置第53页
   ·方法第53-55页
     ·黄瓜植株的培养第53页
     ·灰葡萄孢分生孢子悬浮液的制备第53页
     ·黄瓜植株处理方法第53-54页
     ·黄瓜植株的病情指数统计第54页
     ·酶粗提取液的制备第54页
     ·酶活性的测定第54页
     ·同工酶电泳第54-55页
 2 结果与分析第55-60页
   ·黄瓜植株的发病情况第55页
   ·POD酶活性及其同工酶变化第55-58页
   ·PPO酶活性及其同工酶变化第58-60页
 3 结论与讨论第60-61页
参考文献【REFERENCES】第61-67页

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