| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第1章 前言 | 第8-18页 |
| ·概述 | 第8页 |
| ·肽脯氨酰顺反异构酶 | 第8-9页 |
| ·亲环蛋白 | 第9-15页 |
| ·CyP的发现及研究 | 第9页 |
| ·CyPA的特征 | 第9-10页 |
| ·CyP的定位 | 第10-11页 |
| ·CyP的生物学功能 | 第11-15页 |
| ·解脂耶氏酵母 | 第15-16页 |
| ·本论文的研究目的与意义 | 第16-18页 |
| 第2章 实验材料 | 第18-41页 |
| ·材料 | 第18-23页 |
| ·真菌材料 | 第18页 |
| ·主要的仪器和设备 | 第18-19页 |
| ·主要的酶和试剂 | 第19-20页 |
| ·主要的缓冲液和试剂的成分及配制 | 第20-22页 |
| ·PCR引物 | 第22页 |
| ·使用的数据库及分析软件 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-41页 |
| ·解脂耶氏酵母CyP目的基因表达鉴定 | 第23-28页 |
| ·解脂耶氏酵母CyP目的基因的克隆 | 第28-33页 |
| ·解脂耶氏酵母CyP目的基因打靶载体的构建 | 第33-41页 |
| 第3章 结果与分析 | 第41-51页 |
| ·解脂耶氏酵母CyP蛋白质结构的生物信息学分析 | 第41-44页 |
| ·解脂耶氏酵母CyP蛋白质理化性质的分析 | 第41页 |
| ·解脂耶氏酵母CyP蛋白质模体的分析 | 第41-42页 |
| ·解脂耶氏酵母CyP蛋白质序列比对的分析 | 第42-44页 |
| ·解脂耶氏酵母CyP蛋白三级结构的分析 | 第44页 |
| ·核酸的提取和纯化 | 第44-45页 |
| ·基因组DNA提取结果 | 第44-45页 |
| ·RNA的提取结果 | 第45页 |
| ·解脂耶氏酵母CyP目的基因的表达鉴定 | 第45-46页 |
| ·RT-PCR | 第45-46页 |
| ·解脂耶氏酵母CyP目的基因的克隆 | 第46-49页 |
| ·解脂耶氏酵母CyP目的基因PCR扩增 | 第46-47页 |
| ·重组质粒的筛选及酶切鉴定 | 第47-49页 |
| ·解脂耶氏酵母CyP目的基因打靶载体的构建 | 第49-51页 |
| ·CyP目的基因5′端和3′的侧翼序列A和B片段的PCR扩增 | 第49页 |
| ·pTZ18-A-Kan重组质粒的Sac Ⅰ,Kpn双酶切鉴定 | 第49-50页 |
| ·pTZ18-A-Kan-B重组质粒的Sal Ⅰ,Sph Ⅰ双酶切鉴定 | 第50-51页 |
| 第4章 讨论 | 第51-54页 |
| ·解脂耶氏酵母CyP蛋白信息学的分析 | 第51-52页 |
| ·解脂耶氏酵母G418抗性基因打靶载体的构建 | 第52-53页 |
| ·解脂耶氏酵母CyP目的基因的功能研究 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第59页 |
