| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-34页 |
| 1 生防芽孢杆菌研究概况 | 第11-21页 |
| ·芽孢杆菌在植物病害生防中的应用 | 第11-13页 |
| ·芽孢杆菌特点 | 第11页 |
| ·芽孢杆菌的分类 | 第11-12页 |
| ·芽孢杆菌在植物病害生防中的应用 | 第12-13页 |
| ·芽孢杆菌生物防治的作用机制 | 第13-21页 |
| ·竞争作用 | 第13-14页 |
| ·诱导植物抗病性 | 第14-15页 |
| ·拮抗作用 | 第15-21页 |
| 2 生防微生物胞外蛋白酶的研究进展 | 第21-26页 |
| ·微生物蛋白酶的研究现状 | 第21-25页 |
| ·蛋白酶概述 | 第21页 |
| ·微生物蛋白酶的分类体系和作用特点 | 第21-25页 |
| ·微生物蛋白酶在生物防治中应用 | 第25-26页 |
| ·蛋白酶与其它防卫蛋白的协同表达 | 第25页 |
| ·微生物蛋白酶生防作用研究进展 | 第25-26页 |
| 3 棉花枯萎病研究现状 | 第26-31页 |
| ·棉花枯萎病的分布和危害 | 第26页 |
| ·棉花枯萎病菌的生物学特性 | 第26-28页 |
| ·形态特征 | 第26-27页 |
| ·生理特性 | 第27页 |
| ·棉花枯萎病菌的生理分化 | 第27-28页 |
| ·棉花枯萎病的传播途径 | 第28页 |
| ·棉花枯萎病菌的致病机理 | 第28-29页 |
| ·棉花枯萎病的防治 | 第29-31页 |
| ·传统防治方法 | 第29-30页 |
| ·生物防治 | 第30-31页 |
| 4 本研究的立题依据、研究内容及技术路线 | 第31-34页 |
| ·立题依据 | 第31-32页 |
| ·研究内容 | 第32-33页 |
| ·技术路线 | 第33-34页 |
| 第二章 产蛋白酶生防细菌的分离、筛选及鉴定 | 第34-46页 |
| 1 材料与方法 | 第34-39页 |
| ·实验材料 | 第34-36页 |
| ·土样 | 第34页 |
| ·病原真菌 | 第34-35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-39页 |
| ·土壤细菌的分离 | 第36页 |
| ·产蛋白酶细菌的筛选 | 第36页 |
| ·拮抗性检测 | 第36-37页 |
| ·菌种形态和生理生化鉴定 | 第37页 |
| ·菌种分子生物学鉴定 | 第37-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-45页 |
| ·产蛋白酶菌株的筛选 | 第39页 |
| ·拮抗细菌的分离筛选 | 第39-40页 |
| ·菌株T2 菌落形态和生理生化鉴定 | 第40-41页 |
| ·菌落形态 | 第40页 |
| ·个体形态 | 第40-41页 |
| ·生理生化特征 | 第41页 |
| ·菌株T2 的分子鉴定 | 第41-45页 |
| ·菌株T2 总DNA 的提取 | 第41-42页 |
| ·菌株T2 165 rDNA 序列的克隆 | 第42页 |
| ·pT-165 rDNA 重组质粒的构建和序列测定 | 第42-45页 |
| 3 讨论 | 第45-46页 |
| ·高产蛋白酶生防细菌的筛选 | 第45页 |
| ·细菌鉴定 | 第45-46页 |
| 第三章 生防芽孢杆菌T2 胞外蛋白酶的纯化及其生化特性研究 | 第46-64页 |
| 1 材料与方法 | 第46-53页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·供试菌株 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-53页 |
| ·液体发酵培养 | 第47页 |
| ·不同培养温度对蛋白酶产生的影响 | 第47-48页 |
| ·最佳盐析条件的确定 | 第48页 |
| ·蛋白酶活力测定 | 第48-49页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第49页 |
| ·菌株T2 胞外蛋白酶的分离纯化 | 第49-50页 |
| ·蛋白酶的纯度鉴定及相对分子量的测定 | 第50-52页 |
| ·蛋白酶明胶原位电泳 | 第52页 |
| ·酶学性质研究 | 第52-53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-62页 |
| ·不同培养温度对菌株T2 产蛋白酶的影响 | 第53-54页 |
| ·最佳盐析条件的确定 | 第54-55页 |
| ·酶的分离纯化 | 第55-59页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast Flow 离子交换层析 | 第55-56页 |
| ·SP-Sepharose Fast Flow 离子交换层析 | 第56页 |
| ·Sephadex G-75 分子筛层析 | 第56-57页 |
| ·菌株T2 胞外蛋白酶的纯化结果 | 第57-59页 |
| ·酶学性质研究 | 第59-62页 |
| ·酶反应最适温度和热稳定性 | 第59-60页 |
| ·酶反应最适pH 和pH 稳定性 | 第60-61页 |
| ·酶的底物特异性 | 第61页 |
| ·不同金属离子和修饰剂对酶活力的影响 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| ·关于研究方法 | 第62-63页 |
| ·关于研究结果 | 第63-64页 |
| 第四章 生防芽孢杆菌T2 胞外蛋白酶对病原真菌的拮抗作用 | 第64-72页 |
| 1 材料与方法 | 第64-66页 |
| ·实验材料 | 第64-65页 |
| ·供试菌株 | 第64页 |
| ·培养基 | 第64-65页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第65页 |
| ·实验方法 | 第65-66页 |
| ·蛋白粗提液的制备 | 第65页 |
| ·纯蛋白酶液的制备 | 第65-66页 |
| ·平板抑菌试验 | 第66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-69页 |
| ·对棉花枯萎病菌菌落延伸的抑制作用 | 第66-67页 |
| ·对棉花枯萎病菌孢子萌发的抑制作用 | 第67-68页 |
| ·纯蛋白酶液对棉花枯萎病菌菌丝的溶解作用 | 第68-69页 |
| 3 讨论 | 第69-72页 |
| ·酶液对病原真菌菌落延伸的抑制作用研究 | 第69页 |
| ·芽孢杆菌T2 产生的胞外蛋白酶在拮抗病原真菌过程中作用 | 第69-70页 |
| ·今后还应开展的工作 | 第70-72页 |
| 第五章 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-85页 |
| 附录：实验所用标准曲线 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 攻读学位期间发表论文及获奖情况 | 第87页 |
