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2006年山东省猪“高热病”病理学观察及病原分离鉴定

英文所略表第1-10页
中文摘要第10-12页
英文摘要第12-14页
文献综述第14-35页
 1 PRRSV 的结构与生物学特性第14-20页
   ·病毒的分类第14-15页
   ·病毒的形态结构第15页
   ·病毒的理化性质第15-16页
   ·PRRSV 的生物学结构第16-18页
   ·PRRSV 的变异第18-20页
   ·PRRSV 培养特性第20页
 2. PRRSV 的免疫学与致病机理第20-26页
   ·免疫学特点第20-23页
   ·PRRSV 致病机理第23-24页
   ·PRRSV 的持续感染与免疫抑制第24-26页
 3. PRRSV 的流行病学第26-29页
   ·发病特点第26-27页
   ·临床症状与病变第27-28页
   ·防治措施第28-29页
 4. PRRS 方法诊断第29-32页
   ·病毒分离与鉴定第29-30页
   ·抗原检测第30页
   ·分子生物学诊断第30-31页
   ·血清学诊断第31-32页
   ·诊断注意事项第32页
 5. PRRSV 与猪“高热病”第32-34页
 6. 本研究目的和意义第34-35页
实验一 2006 年山东省猪“高热病”病原学诊断第35-48页
 摘要第35页
 1 材料第35-36页
   ·试剂和仪器第35-36页
   ·引物设计第36页
 2 方法第36-40页
   ·流行病学调查及临床症状观察第36-37页
   ·临床病例的病理学诊断与病料采集第37页
   ·淋巴结和脾脏中病毒 DNA 的提取第37页
   ·肺脏中病毒 RNA 的提取第37页
   ·PRRSV 与 CSFV 的 RT-PCR 检测第37-39页
   ·PCV-2、TOX 以及 PRV 的 PCR 检测第39页
   ·PRRSV 免疫组化检测第39-40页
   ·细菌培养第40页
   ·血清学诊断第40页
 3 结果第40-46页
   ·猪“高热病”发病情况调查第40-41页
   ·猪“高热病”病例临床症状第41页
   ·猪“高热病”自然病例的剖检病变第41-42页
   ·猪“高热病”自然病例的镜检病变第42-43页
   ·免疫组化染色结果第43-44页
   ·PCV-2、TOX 以及PRV 的PCR 检测第44页
   ·PRRSV 与 CSFV 的 RT-PCR 检测第44-45页
   ·细菌培养第45页
   ·相关病原检测结果第45页
   ·血清学检测第45-46页
 4 分析与讨论第46-48页
实验二 猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定第48-57页
 摘要第48-49页
 1 材料第49-50页
   ·病料第49页
   ·RT-PCR 相关试剂及溶液的配制第49页
   ·病毒分离用细胞、实验动物及培养基第49页
   ·鉴定用荧光抗体及试剂第49页
   ·主要仪器设备第49-50页
 2. 方法第50-52页
   ·引物的设计与合成第50页
   ·病毒 RNA 的提取第50页
   ·RT-PCR第50页
   ·细胞培养物中 DNA 的提取第50页
   ·细胞培养物中 PCV-2、TOX 以及 PRV 的 PCR 检测第50页
   ·病毒分离第50-51页
   ·病毒鉴定第51-52页
     ·RT-PCR 鉴定第51页
     ·间接免疫荧光(IFA)试验第51页
     ·电镜观察第51页
     ·TCID50 的测定第51-52页
     ·分离毒的血凝性试验第52页
 3. 试验结果第52-54页
   ·“高热病”病猪肺脏中 PRRSV 的分离与 RT-PCR 鉴定第52-53页
   ·间接免疫荧光抗体鉴定第53页
   ·TCID_(50)的测定第53-54页
   ·透射电镜观察第54页
   ·病毒血凝性实验第54页
 4. 讨论第54-57页
   ·关于 PRRSV 的细胞培养第54-55页
   ·关于 PRRSV 的间接免疫荧光试验和电镜观察第55-57页
实验三 PRRSV SD-14 株 Nsp2 及 ORF5 基因核酸扩增及其序列分析第57-65页
  摘要第57-58页
 1. 材料与方法第58-59页
   ·毒株第58页
   ·PRRSV 毒株参考序列第58页
   ·实验耗材第58页
   ·实验仪器设备第58页
   ·扩增引物的设计第58-59页
 2. 方法第59-60页
   ·PRRSV 的增殖第59页
   ·PRRSV 感染的 Marc-145 细胞中总 RNA 的提取第59页
   ·RT-PCR 反应第59页
   ·凝胶回收 DNA第59-60页
   ·Nsp2 及 ORF5 基因序列测定及基因同源性分析第60页
 3 结果第60-63页
   ·Nsp2 及 ORF5 各片段的 RT-PCR 扩增结果第60页
   ·Nsp2 及 ORF5 片段的测序结果第60页
   ·Nsp2,ORF5 基因组同源性分析第60-63页
 4 分析与讨论第63-65页
结论第65-66页
参考文献第66-79页
附录1第79-84页
附录2第84-86页
附录3第86-88页
攻读学位期间的论文第88-89页
致谢第89页

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