英文所略表 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
文献综述 | 第14-35页 |
1 PRRSV 的结构与生物学特性 | 第14-20页 |
·病毒的分类 | 第14-15页 |
·病毒的形态结构 | 第15页 |
·病毒的理化性质 | 第15-16页 |
·PRRSV 的生物学结构 | 第16-18页 |
·PRRSV 的变异 | 第18-20页 |
·PRRSV 培养特性 | 第20页 |
2. PRRSV 的免疫学与致病机理 | 第20-26页 |
·免疫学特点 | 第20-23页 |
·PRRSV 致病机理 | 第23-24页 |
·PRRSV 的持续感染与免疫抑制 | 第24-26页 |
3. PRRSV 的流行病学 | 第26-29页 |
·发病特点 | 第26-27页 |
·临床症状与病变 | 第27-28页 |
·防治措施 | 第28-29页 |
4. PRRS 方法诊断 | 第29-32页 |
·病毒分离与鉴定 | 第29-30页 |
·抗原检测 | 第30页 |
·分子生物学诊断 | 第30-31页 |
·血清学诊断 | 第31-32页 |
·诊断注意事项 | 第32页 |
5. PRRSV 与猪“高热病” | 第32-34页 |
6. 本研究目的和意义 | 第34-35页 |
实验一 2006 年山东省猪“高热病”病原学诊断 | 第35-48页 |
摘要 | 第35页 |
1 材料 | 第35-36页 |
·试剂和仪器 | 第35-36页 |
·引物设计 | 第36页 |
2 方法 | 第36-40页 |
·流行病学调查及临床症状观察 | 第36-37页 |
·临床病例的病理学诊断与病料采集 | 第37页 |
·淋巴结和脾脏中病毒 DNA 的提取 | 第37页 |
·肺脏中病毒 RNA 的提取 | 第37页 |
·PRRSV 与 CSFV 的 RT-PCR 检测 | 第37-39页 |
·PCV-2、TOX 以及 PRV 的 PCR 检测 | 第39页 |
·PRRSV 免疫组化检测 | 第39-40页 |
·细菌培养 | 第40页 |
·血清学诊断 | 第40页 |
3 结果 | 第40-46页 |
·猪“高热病”发病情况调查 | 第40-41页 |
·猪“高热病”病例临床症状 | 第41页 |
·猪“高热病”自然病例的剖检病变 | 第41-42页 |
·猪“高热病”自然病例的镜检病变 | 第42-43页 |
·免疫组化染色结果 | 第43-44页 |
·PCV-2、TOX 以及PRV 的PCR 检测 | 第44页 |
·PRRSV 与 CSFV 的 RT-PCR 检测 | 第44-45页 |
·细菌培养 | 第45页 |
·相关病原检测结果 | 第45页 |
·血清学检测 | 第45-46页 |
4 分析与讨论 | 第46-48页 |
实验二 猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定 | 第48-57页 |
摘要 | 第48-49页 |
1 材料 | 第49-50页 |
·病料 | 第49页 |
·RT-PCR 相关试剂及溶液的配制 | 第49页 |
·病毒分离用细胞、实验动物及培养基 | 第49页 |
·鉴定用荧光抗体及试剂 | 第49页 |
·主要仪器设备 | 第49-50页 |
2. 方法 | 第50-52页 |
·引物的设计与合成 | 第50页 |
·病毒 RNA 的提取 | 第50页 |
·RT-PCR | 第50页 |
·细胞培养物中 DNA 的提取 | 第50页 |
·细胞培养物中 PCV-2、TOX 以及 PRV 的 PCR 检测 | 第50页 |
·病毒分离 | 第50-51页 |
·病毒鉴定 | 第51-52页 |
·RT-PCR 鉴定 | 第51页 |
·间接免疫荧光(IFA)试验 | 第51页 |
·电镜观察 | 第51页 |
·TCID50 的测定 | 第51-52页 |
·分离毒的血凝性试验 | 第52页 |
3. 试验结果 | 第52-54页 |
·“高热病”病猪肺脏中 PRRSV 的分离与 RT-PCR 鉴定 | 第52-53页 |
·间接免疫荧光抗体鉴定 | 第53页 |
·TCID_(50)的测定 | 第53-54页 |
·透射电镜观察 | 第54页 |
·病毒血凝性实验 | 第54页 |
4. 讨论 | 第54-57页 |
·关于 PRRSV 的细胞培养 | 第54-55页 |
·关于 PRRSV 的间接免疫荧光试验和电镜观察 | 第55-57页 |
实验三 PRRSV SD-14 株 Nsp2 及 ORF5 基因核酸扩增及其序列分析 | 第57-65页 |
摘要 | 第57-58页 |
1. 材料与方法 | 第58-59页 |
·毒株 | 第58页 |
·PRRSV 毒株参考序列 | 第58页 |
·实验耗材 | 第58页 |
·实验仪器设备 | 第58页 |
·扩增引物的设计 | 第58-59页 |
2. 方法 | 第59-60页 |
·PRRSV 的增殖 | 第59页 |
·PRRSV 感染的 Marc-145 细胞中总 RNA 的提取 | 第59页 |
·RT-PCR 反应 | 第59页 |
·凝胶回收 DNA | 第59-60页 |
·Nsp2 及 ORF5 基因序列测定及基因同源性分析 | 第60页 |
3 结果 | 第60-63页 |
·Nsp2 及 ORF5 各片段的 RT-PCR 扩增结果 | 第60页 |
·Nsp2 及 ORF5 片段的测序结果 | 第60页 |
·Nsp2,ORF5 基因组同源性分析 | 第60-63页 |
4 分析与讨论 | 第63-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-79页 |
附录1 | 第79-84页 |
附录2 | 第84-86页 |
附录3 | 第86-88页 |
攻读学位期间的论文 | 第88-89页 |
致谢 | 第89页 |