| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-22页 |
| ·双生病毒简介 | 第9页 |
| ·双生病毒的分类、基因组特征及寄主范围 | 第9-13页 |
| ·玉米线条病毒属(Mastrevirus) | 第10页 |
| ·甜菜曲顶病毒属（Curtovirus） | 第10页 |
| ·番茄伪曲顶病毒属（Topocuvirus） | 第10-11页 |
| ·菜豆金色花叶病毒属（Begomovirus） | 第11-13页 |
| ·伴随双生病毒的亚病毒因子 | 第13页 |
| ·双生病毒的进化 | 第13-15页 |
| ·双生病毒的侵染过程 | 第15-19页 |
| ·双生病毒的复制 | 第15-17页 |
| ·双生病毒的复制机理 | 第15-16页 |
| ·双生病毒的复制结构域 | 第16-17页 |
| ·双生病毒的转录 | 第17-18页 |
| ·双生病毒在寄主植物体内的移动 | 第18-19页 |
| ·双组分双生病毒的移动 | 第18-19页 |
| ·单组分双生病毒的移动 | 第19页 |
| ·双生病毒的传播途径 | 第19-20页 |
| ·自然传播 | 第19-20页 |
| ·人工传播 | 第20页 |
| ·双生病毒侵染性克隆构建及其应用 | 第20页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第20-22页 |
| 第二章 试验材料与方法 | 第22-35页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·病毒 | 第22页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌种、质粒和试剂 | 第22-23页 |
| ·菌种、载体质粒 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22-23页 |
| ·供试昆虫 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-35页 |
| ·引物设计与合成 | 第23-24页 |
| ·用于扩增 DNA-A 的引物 | 第23页 |
| ·用于扩增 DNA-B 和 DNAβ的引物 | 第23-24页 |
| ·植物总DNA 提取（CTAB 法） | 第24页 |
| ·聚合酶链式反应（PCR） | 第24-25页 |
| ·反应体系 | 第24-25页 |
| ·反应参数设置 | 第25页 |
| ·PCR 产物检验 | 第25页 |
| ·目的片段的T-A 克隆 | 第25-27页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第25-26页 |
| ·T-A 连接 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2 法) | 第26-27页 |
| ·转化 | 第27页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组克隆的初步筛选和菌液PCR 鉴定 | 第27页 |
| ·重组质粒 DNA 的少量提取（碱裂解法） | 第27-28页 |
| ·酶切鉴定重组质粒 | 第28页 |
| ·Southern blot 分析 | 第28-30页 |
| ·电泳和胶处理 | 第28页 |
| ·转膜（中型毛细管转膜） | 第28-29页 |
| ·探针标记（地高辛标记法） | 第29页 |
| ·预杂交、杂交以及显色 | 第29-30页 |
| ·序列与分析 | 第30-31页 |
| ·AlYVV-[F30] DNA-A 侵染性克隆的构建 | 第31-33页 |
| ·生物学传毒实验 | 第33-35页 |
| ·供试昆虫及植物 | 第33-34页 |
| ·接种指示植物 | 第34页 |
| ·植物总 DNA 的抽提及纯化 | 第34页 |
| ·PCR 扩增、克隆和序列测定、分析 | 第34页 |
| ·Southern blot 检测 | 第34-35页 |
| 第三章 结果与分析 | 第35-48页 |
| ·醴肠杂草上双生病毒的 PCR 快速检测 | 第35页 |
| ·病毒基因组 DNA-A 结构及序列分析 | 第35-39页 |
| ·全长基因组DNA-A 结构 | 第35-37页 |
| ·DNA-A 序列分析 | 第37-39页 |
| ·样品 DNAβ和 DNA-B 的检测 | 第39-43页 |
| ·DNAβ分子检测 | 第39-41页 |
| ·DNAβ分子序列分析 | 第41-43页 |
| ·检测 DNA-B 组分 | 第43页 |
| ·侵染性克隆的构建 | 第43-45页 |
| ·指示植物检测 | 第45-48页 |
| ·接种植物表现症状 | 第45-46页 |
| ·Southern blotting 检测 | 第46-48页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第48-52页 |
| ·结论 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| ·植物总 DNA 提取 | 第48-50页 |
| ·实验过程中遇到的问题及对策 | 第50页 |
| ·进一步研究的一点设想 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-62页 |
| 附录1 | 第62-66页 |
| 附录2 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
| 硕士期间发表论文 | 第68页 |