| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-40页 |
| ·研究的目的及意义 | 第15-16页 |
| ·国内外研究进展 | 第16-39页 |
| ·小RNA 病毒空衣壳组装研究进展 | 第16-23页 |
| ·昆虫杆状病毒表达系统研究进展 | 第23-28页 |
| ·口蹄疫疫苗研究进展 | 第28-39页 |
| ·研究内容和方法 | 第39-40页 |
| 第二章 Asia 1/JS/2005 FMDV 衣壳蛋白 P12A 与蛋白酶 3C 的基因克隆与序列分析 | 第40-49页 |
| ·材料与方法 | 第40-45页 |
| ·病毒样品 | 第40-41页 |
| ·载体与宿主菌 | 第41页 |
| ·RNA 提取 | 第41页 |
| ·反转录 | 第41-42页 |
| ·多聚酶链反应（polymerase chain reaction, PCR） | 第42页 |
| ·PCR 产物的纯化回收 | 第42-43页 |
| ·目的基因与pGEM-T Easy 载体的连接 | 第43页 |
| ·感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第43页 |
| ·转化 | 第43页 |
| ·质粒的提取 | 第43-44页 |
| ·pGEM-P12A 和pGEM-3C 阳性质粒的鉴定 | 第44-45页 |
| ·结果 | 第45-48页 |
| ·RT-PCR | 第45页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第45-47页 |
| ·P12A 和3C 基因序列分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第三章 Asia 1 型 FMDV 衣壳蛋白 P12A 和蛋白酶3C 的分泌表达 | 第49-60页 |
| ·材料与方法 | 第50-53页 |
| ·载体和质粒 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50-51页 |
| ·引物 | 第51页 |
| ·重组转移载体的构建 | 第51页 |
| ·重组转移载体与杆状病毒共转染昆虫细胞 | 第51页 |
| ·重组杆状病毒的噬斑筛选和PCR 鉴定 | 第51-52页 |
| ·重组蛋白的表达与检测 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-58页 |
| ·重组转移载体的鉴定 | 第53页 |
| ·重组杆状病毒的筛选与鉴定 | 第53-56页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 和Western blotting 检测 | 第56-57页 |
| ·表达产物间接免疫荧光检测 | 第57页 |
| ·双抗体夹心ELISA 检测 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 第四章 Asia 1 型 FMDV 空衣壳在昆虫细胞中的表达、加工和组装研究 | 第60-75页 |
| ·材料与方法 | 第61-66页 |
| ·载体和细胞 | 第61页 |
| ·重组转移载体的构建 | 第61-63页 |
| ·重组杆粒的获得 | 第63-64页 |
| ·重组杆状病毒的获得 | 第64页 |
| ·重组蛋白的表达与检测 | 第64-66页 |
| ·表达产物抗原性分析 | 第66页 |
| ·空衣壳蔗糖梯度分析和电镜观察 | 第66页 |
| ·空衣壳结构免疫电镜观察 | 第66页 |
| ·结果与分析 | 第66-73页 |
| ·重组转移载体的构建 | 第66-68页 |
| ·重组杆粒的鉴定 | 第68页 |
| ·重组杆状病毒的获得 | 第68-69页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 和Western blot 检测 | 第69-70页 |
| ·表达产物间接免疫荧光检测 | 第70页 |
| ·用双抗体夹心ELISA 确定最佳表达条件 | 第70-71页 |
| ·表达产物抗原性分析 | 第71页 |
| ·空衣壳蔗糖梯度分析和电镜观察结果 | 第71页 |
| ·免疫电镜结果 | 第71-73页 |
| ·讨论 | 第73-75页 |
| 第五章 通过耐酸性改造在昆虫细胞中组装 Asia 1 型 FMDV 空衣壳的研究 | 第75-87页 |
| ·材料与方法 | 第76-79页 |
| ·材料 | 第76-77页 |
| ·P12A 基因的突变 | 第77页 |
| ·基因的克隆与鉴定 | 第77-78页 |
| ·重组转移载体的构建 | 第78页 |
| ·重组杆粒的获得 | 第78页 |
| ·重组杆状病毒的获得 | 第78页 |
| ·重组蛋白的表达与检测 | 第78-79页 |
| ·空衣壳结构电镜观察 | 第79页 |
| ·空衣壳耐酸性分析 | 第79页 |
| ·结果与分析 | 第79-85页 |
| ·PCR 结果 | 第79页 |
| ·序列测定与分析 | 第79-81页 |
| ·重组转移载体的构建 | 第81页 |
| ·重组杆状病毒的获得 | 第81-82页 |
| ·表达产物的Western blotting 检测 | 第82-83页 |
| ·表达产物间接免疫荧光检测 | 第83页 |
| ·用双抗体夹心ELISA 确定最佳表达条件 | 第83-84页 |
| ·空衣壳结构电镜观察 | 第84页 |
| ·空衣壳耐酸性分析 | 第84-85页 |
| ·讨论 | 第85-87页 |
| 第六章 杆状病毒表达的 Asia 1 型 FMDV 空衣壳或中间体免疫原性分析 | 第87-93页 |
| ·材料与方法 | 第87-90页 |
| ·试验动物分组及免疫策略 | 第87-88页 |
| ·特异性血清抗体测定 | 第88页 |
| ·中和抗体测定 | 第88-90页 |
| ·结果与分析 | 第90页 |
| ·血清间接ELISA 抗体测定结果 | 第90页 |
| ·中和抗体检测结果 | 第90页 |
| ·讨论 | 第90-93页 |
| 第七章 全文结论 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-111页 |
| 附录 | 第111-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 作者简历 | 第116-117页 |
