| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-28页 |
| ·口蹄疫的概况 | 第14-19页 |
| ·FMDV 病原特征 | 第14-16页 |
| ·口蹄疫的流行情况 | 第16-17页 |
| ·口蹄疫的危害 | 第17-18页 |
| ·口蹄疫的防治 | 第18-19页 |
| ·口蹄疫的免疫机制 | 第19-20页 |
| ·体液免疫 | 第19页 |
| ·细胞免疫 | 第19-20页 |
| ·黏膜免疫 | 第20页 |
| ·口蹄疫新型疫苗的研究进展 | 第20-25页 |
| ·重组亚单位疫苗 | 第20-22页 |
| ·多肽疫苗 | 第22-23页 |
| ·核酸疫苗 | 第23页 |
| ·活病毒载体重组疫苗 | 第23-25页 |
| ·细胞因子的免疫佐剂效应 | 第25-26页 |
| ·IL-2 疫苗佐剂的研究进展 | 第25-26页 |
| ·IFN-γ疫苗佐剂的研究进展 | 第26页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-38页 |
| ·实验材料 | 第28-31页 |
| ·实验动物 | 第28页 |
| ·载体、质粒、病毒和细胞 | 第28页 |
| ·引物 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28-30页 |
| ·实验耗材 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-38页 |
| ·重组质粒pMD18-T-vp1 和pMD18-T-gh 的构建 | 第31-32页 |
| ·原核表达质粒pET30a-vp1 和pGEX-6p1-gh 的构建 | 第32-33页 |
| ·pET30a-vp1 和pGEX-6p1-gh 在大杆菌中的诱导表达及纯化 | 第33页 |
| ·VP1 蛋白和G-H 的Western-blotting 检测 | 第33页 |
| ·真核表达载体pcDNA3.1-pBoIL-2和pcDNA3.1-pBoIFN-γ的构建 | 第33页 |
| ·真核质粒的大量制备与纯化 | 第33-34页 |
| ·间接免疫荧光检测重组质粒在 BHK21 细胞中的表达 | 第34页 |
| ·pr-mBoIFN-γ的诱导表达及纯化 | 第34页 |
| ·动物免疫 | 第34-35页 |
| ·间接 ELISA 检测抗 FMDV 抗体效价 | 第35页 |
| ·病毒中和试验 | 第35-36页 |
| ·淋巴细胞增殖试验 | 第36页 |
| ·实时定量 PCR | 第36-37页 |
| ·统计学分析 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-48页 |
| ·免疫原的制备 | 第38-42页 |
| ·目的基因vp1 和gh 的扩增 | 第38页 |
| ·重组质粒pMD18-T-vp1 和pMD18-T-gh 的鉴定 | 第38-39页 |
| ·原核表达质粒pET30a-vp1 和pGEX-6p1-gh 的构建及鉴定 | 第39-40页 |
| ·VP1 蛋白和G-H 的诱导表达及纯化 | 第40-41页 |
| ·VP1 蛋白和G-H 的Western-blotting 检测 | 第41-42页 |
| ·佐剂的制备 | 第42-44页 |
| ·真核表达质粒pcDNA3.1-pBoIL-2和pcDNA3.1-pBoIFN-γ的构建 | 第42-43页 |
| ·间接免疫荧光检测 | 第43页 |
| ·BoIFN-γ成熟蛋白的诱导表达及纯化 | 第43-44页 |
| ·动物免疫及对免疫效力的评价 | 第44-48页 |
| ·Asia1 型FMDV 抗体检测 | 第44-45页 |
| ·病毒中和试验 | 第45-46页 |
| ·淋巴细胞增殖试验 | 第46-47页 |
| ·细胞因子检测 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| ·表位多肽的选择 | 第48页 |
| ·IL-2 和 IFN-γ在免疫佐剂方面的应用 | 第48-49页 |
| ·分子佐剂的制备 | 第49页 |
| ·血清抗体效价与体液免疫 | 第49-50页 |
| ·淋巴细胞增殖反应 | 第50页 |
| ·细胞因子相对表达水平和免疫效应 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61页 |
