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抗鹅细小病毒NS1蛋白单克隆抗体的制备及其对应抗原表位区分析

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 引言第12-25页
   ·鹅细小病毒概述第12-15页
     ·GPV 的分类地位第12-14页
     ·GPV 的形态特征和理化特性第14页
     ·GPV 的培养特性第14-15页
   ·GPV 分子生物学研究进展第15-19页
     ·GPV 基因组的结构特点第15页
     ·GPV 基因组的转录和复制第15-17页
     ·GPV 病毒基因编码蛋白第17-19页
   ·鹅细小病毒病第19-20页
     ·GPV 的流行病学第19页
     ·临床症状第19-20页
     ·鹅细小病毒病的病理变化第20页
   ·鹅细小病毒病的诊断方法第20-21页
     ·病原学检查第20-21页
     ·血清学诊断方法第21页
   ·鹅细小病毒病的防治第21-22页
   ·细小病毒非结构蛋白的研究进展第22-23页
   ·单克隆抗体技术在鹅细小病毒病方面的研究进展第23页
   ·研究目的与意义第23-25页
2 材料与方法第25-38页
   ·实验材料第25-28页
     ·毒株、细胞及菌株第25页
     ·实验动物第25页
     ·试剂第25页
     ·主要溶液配制第25-26页
     ·细胞培养溶液第26页
     ·主要仪器第26-28页
   ·实验方法第28-38页
     ·GPV 非结构蛋白 NS1 基因的克隆、表达及抗原性鉴定第28-34页
     ·单克隆抗体的制备第34-37页
     ·单克隆抗体的鉴定第37-38页
3 实验结果第38-50页
   ·GPV 非结构蛋白NS1 基因的克隆、表达及抗原性鉴定第38-41页
     ·GPV 非结构蛋白 NS1 基因片段的 PCR 扩增结果第38页
     ·克隆载体pMD18-T- GPV-NS1 的构建第38-39页
     ·真核表达载体pcDNA3.1-GPV-NS1 的构建第39页
     ·原核表达载体pET-30a(+)-GPV-NS1 的构建第39-40页
     ·GPV-NS1 基因在大肠杆菌中的诱导表达及蛋白纯化第40页
     ·Western blot 分析 NS1 蛋白的抗原性第40-41页
   ·间接 ELISA 筛选方法的建立第41-42页
   ·杂交瘤细胞株的建立第42页
   ·杂交瘤细胞鉴定第42-44页
     ·杂交瘤细胞染色体数分析第42-43页
     ·杂交瘤细胞株的稳定性分析第43-44页
   ·单克隆抗体的鉴定第44-50页
     ·单克隆抗体Ig 亚类鉴定第44-45页
     ·真核质粒pcDNA3.1-GPV-NS1 瞬时转染分析第45-46页
     ·间接免疫荧光分析第46-47页
     ·对应的抗原表位区的初步鉴定第47-50页
4 讨论第50-53页
   ·单克隆抗体制备第50页
   ·单克隆抗体所针对的 B 细胞抗原表位的分析第50-51页
   ·抗 GPV-NS1 单克隆抗体的应用价值第51-53页
5 结论第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-62页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第62页

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