摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
1 引言 | 第14-29页 |
·枯草芽孢杆菌在病害生物防治中的应用现状 | 第14-16页 |
·国外应用现状 | 第14-15页 |
·国内应用现状 | 第15-16页 |
·枯草芽孢杆菌在植物病害防治中的作用机制 | 第16-22页 |
·竞争作用 | 第16-17页 |
·拮抗作用 | 第17-21页 |
·诱导抗性 | 第21页 |
·促生作用 | 第21-22页 |
·生防枯草芽孢杆菌研发与应用途径 | 第22-27页 |
·生防枯草芽孢杆菌的育种研究 | 第22-26页 |
·发酵培养研究 | 第26-27页 |
·剂型和配方研究 | 第27页 |
·枯草芽孢杆菌在病害防治应用中存在的问题及措施 | 第27-28页 |
·与化学农药或抗生素复配防病 | 第27-28页 |
·与其它拮抗微生物协同防病 | 第28页 |
·本研究的目的及意义 | 第28-29页 |
2 材料与方法 | 第29-47页 |
·材料 | 第29-31页 |
·供试菌株 | 第29页 |
·供试培养基 | 第29页 |
·主要仪器与试剂 | 第29-31页 |
·抑菌活性测定方法 | 第31页 |
·平板对峙法(方中达,2005) | 第31页 |
·生长速率法(方中达,2005) | 第31页 |
·琼脂孔扩散对峙法(Hultmark D,1980) | 第31页 |
·拮抗菌株的活化与保藏 | 第31页 |
·无菌发酵液的制备方法 | 第31-32页 |
·菌株诱变试验 | 第32页 |
·G8 菌株对数生长期的测定 | 第32页 |
·G8 菌悬液的制备 | 第32页 |
·诱变处理 | 第32页 |
·拮抗活性的检测 | 第32页 |
·G8 发酵条件优化 | 第32-34页 |
·液体种子的制备 | 第32页 |
·发酵培养 | 第32页 |
·培养基组分筛选单因素试验 | 第32-33页 |
·培养基组分的正交试验 | 第33页 |
·培养条件的优化 | 第33页 |
·活性测定 | 第33-34页 |
·抗菌蛋白的提取及含量测定 | 第34-35页 |
·抗菌蛋白的提取及最佳硫酸铵饱和度的确定 | 第34页 |
·蛋白含量测定方法 | 第34-35页 |
·抗菌蛋白部分特性分析 | 第35-36页 |
·蛋白的热稳定性 | 第35页 |
·金属离子和表面活性剂对蛋白活性的影响 | 第35页 |
·蛋白酶对活性的影响 | 第35页 |
·pH 值对活性的影响 | 第35页 |
·细胞壁降解酶活性检测 | 第35-36页 |
·抗菌蛋白的柱层析纯化 | 第36-44页 |
·Sephadex G-100 凝胶层析 | 第36-38页 |
·DE-52 阴离子交换层析 | 第38页 |
·CM Sepharose CL-6B 阳离子交换层析 | 第38-39页 |
·Pheny-Sepharose 6 FF 疏水层析 | 第39页 |
·纯度检测及分子量的测定 | 第39-44页 |
·抗菌蛋白的薄层层析纯化 | 第44-45页 |
·蛋白的提取 | 第44页 |
·薄层层析(TLC) | 第44-45页 |
·RP-HPLC | 第45页 |
·红外光谱(IR)分析 | 第45页 |
·抗菌蛋白对黄瓜菌核病菌菌丝的毒力测定 | 第45-46页 |
·抗菌蛋白对黄瓜菌核病菌菌丝体细胞膜透性的影响 | 第46-47页 |
3 结果与分析 | 第47-70页 |
·菌株诱变试验 | 第47页 |
·G8 菌株对数生长期的测定 | 第47页 |
·G8 菌株紫外复合LiCl 诱变结果 | 第47页 |
·G8 发酵条件的优化 | 第47-56页 |
·培养基的优化 | 第47-52页 |
·发酵条件的优化 | 第52-56页 |
·蛋白提取和含量测定 | 第56-57页 |
·最佳硫酸铵饱和度的确定 | 第56页 |
·蛋白质含量标准曲线绘制 | 第56-57页 |
·抗菌蛋白部分特性分析 | 第57-58页 |
·蛋白的热稳定性 | 第57页 |
·金属离子和表面活性剂对蛋白活性的影响 | 第57页 |
·蛋白酶对活性的影响 | 第57页 |
·pH 值对活性的影响 | 第57页 |
·细胞壁降解酶活性检测 | 第57-58页 |
·抗菌蛋白的柱层析纯化 | 第58-63页 |
·Sephadex G-100 凝胶层析 | 第58-59页 |
·DE-52 阴离子交换层析 | 第59-60页 |
·CM Sepharose CL-6B 阳离子交换层析 | 第60页 |
·Pheny-Sepharose 6 FF 疏水层析 | 第60-61页 |
·纯度检测及分子量的测定 | 第61-63页 |
·抗菌蛋白的薄层层析纯化 | 第63-67页 |
·甲醇抽提沉淀样品的TLC | 第63-64页 |
·两种蛋白沉淀方法的比较 | 第64-65页 |
·条带活性的测定 | 第65页 |
·表面张力的测定 | 第65页 |
·排油活性试验 | 第65页 |
·RP-HPLC 法鉴定纯度 | 第65-67页 |
·红外光谱(IR)分析 | 第67-68页 |
·抗菌蛋白对黄瓜菌核病菌菌丝的毒力 | 第68页 |
·抗菌蛋白对黄瓜菌核病菌菌丝体细胞膜透性的影响 | 第68-70页 |
4 讨论 | 第70-73页 |
·G8 发酵条件优化的目的意义 | 第70-71页 |
·抗菌蛋白的理化性质 | 第71页 |
·G8 抗菌蛋白的纯化 | 第71-72页 |
·抗菌蛋白对黄瓜菌核病菌细胞膜透性的影响 | 第72-73页 |
5 结论 | 第73-74页 |
·枯草芽孢杆菌G8 的发酵条件优化 | 第73页 |
·抗菌蛋白的理化特性 | 第73页 |
·抗菌蛋白的分离纯化 | 第73页 |
·抗菌蛋白的毒力和其对病菌细胞膜透性的影响 | 第73-74页 |
6 参考文献 | 第74-85页 |
7 致谢 | 第85-86页 |
8 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第86页 |