| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-32页 |
| ·牛结核病的病原学 | 第11-15页 |
| ·病原 | 第11-13页 |
| ·牛结核菌和结核分枝杆菌的基因组特点 | 第13-15页 |
| ·结核杆菌的基因. | 第13页 |
| ·牛分枝杆菌基因组 | 第13-15页 |
| ·牛结核病的流行与控制 | 第15-17页 |
| ·牛结核病国际贸易检疫意义 | 第17-19页 |
| ·牛结核病的诊断技术研究进展 | 第19-26页 |
| ·细菌学方法 | 第19-20页 |
| ·涂片、染色、镜检 | 第19页 |
| ·细菌的分离培养检测法 | 第19页 |
| ·生化试验 | 第19-20页 |
| ·动物接种试验 | 第20页 |
| ·免疫学诊断方法研究进展 | 第20-25页 |
| ·提纯结核菌素皮内变态反应实验 | 第20-21页 |
| ·血清学诊断方法研究进展 | 第21-24页 |
| ·牛结核特异性诊断蛋白抗原研究进展 | 第24-25页 |
| ·分子生物学检测 | 第25-26页 |
| ·聚合酶链反应(PCR 技术) | 第25-26页 |
| ·核酸探针技术 | 第26页 |
| ·基因分型技术与牛结核病的分子流行病学 | 第26-28页 |
| ·牛结核菌疫苗免疫研究进展 | 第28-30页 |
| ·综合防制措施 | 第30-31页 |
| ·展望 | 第31-32页 |
| 第二章 陕西关中地区奶牛结核病调查 | 第32-38页 |
| ·材料方法 | 第32-33页 |
| ·待检牛只 | 第32页 |
| ·诊断液 | 第32页 |
| ·检测方法 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-34页 |
| ·2006~2008 年陕西关中地区奶牛结核病监测结果 | 第33页 |
| ·不同规模养殖场奶牛阳性率比较 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| ·小结 | 第36-38页 |
| 第三章 牛结核病PCR 检测方法的建立 | 第38-50页 |
| ·材料和方法 | 第38-43页 |
| ·参考菌株DNA | 第38页 |
| ·主要实验仪器和试剂 | 第38-39页 |
| ·培养基的配制 | 第39-40页 |
| ·引物设计 | 第40页 |
| ·PCR 条件优化 | 第40页 |
| ·敏感性试验 | 第40页 |
| ·特异性试验 | 第40页 |
| ·目的序列的测定 | 第40-43页 |
| ·PCR 产物的纯化回收cDNA 片段 | 第40-41页 |
| ·纯化产物与pMD-18T Vector 连接 | 第41页 |
| ·感受态细胞的制备（CaC12 法） | 第41页 |
| ·连接产物的转化 | 第41-42页 |
| ·重组质粒的提取 | 第42页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定 | 第42页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的测序分析 | 第43页 |
| ·对已知培养样品的检测及对比研究 | 第43页 |
| ·结果 | 第43-48页 |
| ·PCR 条件优化分析 | 第43-45页 |
| ·敏感性试验结果 | 第45页 |
| ·引物特异性分析 | 第45-46页 |
| ·目的片段的序列分析 | 第46-47页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定结果 | 第46页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第46页 |
| ·目的基因的序列分析 | 第46-47页 |
| ·已建PCR 法对已知培养样品的检验及比较 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第四章 牛结核病三种检测方法的比较 | 第50-54页 |
| ·研究方法 | 第50-52页 |
| ·实验动物 | 第50页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第50页 |
| ·牛结核病结核菌素检测方法 | 第50-51页 |
| ·特异性PCR 检测法 | 第51页 |
| ·干扰素检测法 | 第51-52页 |
| ·样品的采集 | 第51页 |
| ·孵育 | 第51页 |
| ·IFN-γ水平的测定和结果判定 | 第51-52页 |
| ·结果 | 第52页 |
| ·牛型结核分支杆菌PPD 皮内变态反应试验 | 第52页 |
| ·PCR 检测法 | 第52页 |
| ·干扰素检测法 | 第52页 |
| ·三种方法检测结果的比较 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 英文缩略词及中英文对照 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |