| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-44页 |
| 第一章 家蚕变态发育的主要研究进展 | 第14-22页 |
| 1 引言 | 第14页 |
| 2 控制家蚕变态发育的主要激素 | 第14-17页 |
| ·促前胸腺激素 | 第15页 |
| ·保幼激素 | 第15-16页 |
| ·蜕皮激素 | 第16-17页 |
| 3 家蚕变态发育的激素调节 | 第17-19页 |
| ·家蚕变态发育的内分泌调节 | 第17-19页 |
| ·家蚕保幼激素和蜕皮激素滴度的变化 | 第19页 |
| 4 家蚕变态发育研究的应用 | 第19-20页 |
| 参考文献 | 第20-22页 |
| 第二章 转基因家蚕研究进展 | 第22-38页 |
| 1 引言 | 第22-23页 |
| 2 家蚕转基因方法 | 第23-26页 |
| ·显微注射方法 | 第23-24页 |
| ·精子介导的外源DNA 导入法 | 第24页 |
| ·基因枪法 | 第24-25页 |
| ·电穿孔法 | 第25页 |
| ·病毒介导法 | 第25页 |
| ·脉冲场电泳法 | 第25-26页 |
| ·其他方法 | 第26页 |
| 3 家蚕转基因的应用 | 第26-28页 |
| ·研究基因的结构和功能 | 第26页 |
| ·家蚕丝腺反应器 | 第26-27页 |
| ·增强家蚕的抗病性 | 第27-28页 |
| 4 转基因蚕研究中所采用的报告基因 | 第28-29页 |
| ·绿色荧光蛋白 | 第28页 |
| ·红色荧光蛋白 | 第28-29页 |
| ·新霉素抗性基因 | 第29页 |
| 5 转基因载体 | 第29-33页 |
| ·启动子 | 第30页 |
| ·转座子序列 | 第30页 |
| ·常用的家蚕转基因载体 | 第30-33页 |
| 参考文献 | 第33-38页 |
| 第三章 杆状病毒egt 基因以及热休克蛋白研究进展 | 第38-44页 |
| 1 引言 | 第38页 |
| 2 杆状病毒egt 基因研究进展 | 第38-40页 |
| ·egt 基因的结构 | 第38-39页 |
| ·EGT 的生物学功能 | 第39-40页 |
| 3 热休克蛋白研究进展 | 第40-42页 |
| ·热休克蛋白的分类及其生物学特性 | 第40页 |
| ·热休克蛋白的产生机制 | 第40-41页 |
| ·研究热休克蛋白基因意义 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-44页 |
| 第二部分 研究正文 | 第44-102页 |
| 第四章 实验设计方案 | 第44-48页 |
| 1 研究的目的及意义 | 第44-46页 |
| 2 研究内容 | 第46页 |
| 3 技术路线 | 第46-48页 |
| 第五章 实验材料与实验方法 | 第48-60页 |
| 1 实验材料 | 第48-52页 |
| ·菌种与载体 | 第48页 |
| ·细胞和家蚕 | 第48页 |
| ·工具酶与试剂盒 | 第48页 |
| ·TC-100 昆虫细胞培养基 | 第48页 |
| ·培养基 | 第48页 |
| ·缓冲液和常用溶液、贮存液 | 第48-50页 |
| ·SDS-PAGE 试剂 | 第50-51页 |
| ·Western blot | 第51页 |
| ·测蜕皮激素试剂 | 第51-52页 |
| 2 实验方法 | 第52-58页 |
| ·PCR 扩增目的片段 | 第52-53页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第53页 |
| ·目的片段的分离和回收 | 第53页 |
| ·DNA 的连接反应体系 | 第53页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第53页 |
| ·连接产物的转化 | 第53-54页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第54页 |
| ·质粒DNA 的制备 | 第54页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第54页 |
| ·细胞的传代 | 第54页 |
| ·细胞的冻存 | 第54-55页 |
| ·细胞的复苏 | 第55页 |
| ·蚕蛾（蚕血）基因组的抽提 | 第55页 |
| ·SDS-PAGE 与凝胶的染色和脱色 | 第55-56页 |
| ·Western blot | 第56-57页 |
| ·斑点杂交 | 第57页 |
| ·蜕皮激素水平测定实验 | 第57-58页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第58页 |
| 3 常用仪器 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-60页 |
| 第六章 家蚕hsp23.7 启动子瞬时表达载体的构建及活性检测 | 第60-73页 |
| 1 引言 | 第60-62页 |
| 2 材料与方法 | 第62-64页 |
| ·材料 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-64页 |
| 3 结果与分析 | 第64-69页 |
| ·PCR 扩增及克隆 | 第64页 |
| ·基因序列分析 | 第64-66页 |
| ·瞬时表达载体的构建 | 第66-67页 |
| ·hsp23.7 启动子活性检测 | 第67-69页 |
| 4 讨论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 第七章 带有egt 表达盒的转基因载体的构建 | 第73-80页 |
| 1 前言 | 第73-74页 |
| 2 材料与方法 | 第74-76页 |
| ·材料 | 第74页 |
| ·方法 | 第74-76页 |
| 3 结果与分析 | 第76-77页 |
| ·载体pSK-hsp23.7-egt-polyA 酶切鉴定 | 第76-77页 |
| ·载体pigA3GFP-IE-NEO-hsp23.7-egt-polyA 酶切鉴定 | 第77页 |
| 4 讨论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-80页 |
| 第八章 稳定转化细胞表达的EGT 对家蚕发育的影响 | 第80-88页 |
| 1 引言 | 第80-81页 |
| 2 材料与方法 | 第81-82页 |
| ·试验材料 | 第81页 |
| ·方法 | 第81-82页 |
| 3 结果与分析 | 第82-86页 |
| ·转化细胞的筛选与鉴定 | 第82-83页 |
| ·重组质粒pET-28α(+)-egt 的酶切图谱 | 第83-84页 |
| ·E.coli 表达的EGT 的SDS-PAGE 和Western blotting | 第84页 |
| ·egt 基因在转化Bm N 细胞中的表达 | 第84-85页 |
| ·注射转基因细胞表达的EGT 对家蚕发育的影响 | 第85-86页 |
| 4 讨论 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-88页 |
| 第九章 转egt 基因对家蚕生长发育的影响 | 第88-102页 |
| 1 引言 | 第88-89页 |
| 2 材料与方法 | 第89-91页 |
| ·材料 | 第89页 |
| ·方法 | 第89-91页 |
| 3 结果与分析 | 第91-98页 |
| ·转基因家蚕的筛选与鉴定 | 第91-93页 |
| ·转egt 基因对产卵数和蚕卵孵化率的影响 | 第93-94页 |
| ·转egt 基因对家蚕幼虫发育的影响 | 第94-95页 |
| ·转egt 基因对蛹发育影响 | 第95-96页 |
| ·转egt 基因家蚕体内MH 的动态变化 | 第96-98页 |
| ·转egt 基因家蚕的经济形状影响 | 第98页 |
| 4 讨论 | 第98-100页 |
| ·精子介导法获得转基因家蚕 | 第98-99页 |
| ·转座子载体的改造 | 第99页 |
| ·转EGT 基因对蚕生长发育的影响 | 第99-100页 |
| ·转EGT 基因对病虫害防治的意义 | 第100页 |
| 参考文献 | 第100-102页 |
| 结论 | 第102-103页 |
| 1 已取得的成果 | 第102页 |
| 2 有待进一步研究问题 | 第102-103页 |
| 在读期间发表论文 | 第103-104页 |
| 附录 | 第104-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
