中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-10页 |
缩略词 | 第10-14页 |
前言 | 第14-18页 |
第一部分 慢病毒介导的RIP3表达载体和shRIP3载体构建及对U251细胞的转导 | 第18-58页 |
1 引言 | 第18-19页 |
2 材料及方法 | 第19-43页 |
·试剂和仪器 | 第19-23页 |
·细胞株 | 第23页 |
·各种溶液的配制 | 第23-27页 |
·方法步骤 | 第27-43页 |
·统计学分析 | 第43页 |
3 结果 | 第43-54页 |
·构建pDown-hRIP3 入门克隆 | 第43-44页 |
·构建pLV.Ex3d.P/neo-EF1A>hRIP3>IRES/eGFP慢病毒表达载体 | 第44页 |
·pDown-hRIP3测序结果 | 第44-45页 |
·构建pLLU2G-shRIP3慢病毒shRNA干扰载体 | 第45-46页 |
·pLLU2G-shRIP3-1、2、3测序结果 | 第46页 |
·pLLU2G-shRIP3慢病毒包装结果 | 第46-48页 |
·pLV.Ex3d.P/neo-EF1A>hRIP3>IRES/eGFP慢病毒包装结果 | 第48页 |
·病毒滴度测定结果 | 第48-49页 |
·pLLU2G-shRIP3慢病毒转导U251细胞结果 | 第49-50页 |
·pLV.Ex3d.P/neo-EF1A>hRIP3>IRES/eGFP慢病毒转导U251细胞结果 | 第50-52页 |
·qPCR检测人RIP3干扰效率 | 第52页 |
·Western blot检测RIP3表达情况 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
第二部分 慢病毒介导的RIP3表达对U251生物学行为的影响及其机制研究 | 第58-78页 |
1 引言 | 第58-59页 |
2 材料和方法 | 第59-64页 |
·试剂和仪器 | 第59-60页 |
·细胞株 | 第60页 |
·各种溶液的配制 | 第60-61页 |
·方法步骤 | 第61-64页 |
3 结果 | 第64-74页 |
·过表达人RIP3基因对GBM细胞U251的影响 | 第64-70页 |
·低表达人RIP3基因对人GBM细胞的影响 | 第70-74页 |
4 讨论 | 第74-77页 |
5 结论 | 第77-78页 |
第三部分 RIP3通过抑制PARP-1从而增强U251对替莫唑胺的敏感性 | 第78-88页 |
1 引言 | 第78-79页 |
2 材料和方法 | 第79-80页 |
·试剂和仪器 | 第79页 |
·细胞株 同第二部分 | 第79页 |
·方法步骤 | 第79-80页 |
·统计学分析 | 第80页 |
3 结果 | 第80-84页 |
·过表达RIP3基因对化疗药物TMZ的影响 | 第80-82页 |
·低表达RIP3的U251细胞对TMZ敏感性的影响 | 第82-84页 |
4 讨论 | 第84-87页 |
5 结论 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-96页 |
综述 | 第96-116页 |
参考文献 | 第107-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
攻读博士学位期间的主要研究成果 | 第117页 |