| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-20页 |
| ·关于Fc受体的分类和命名 | 第10-11页 |
| ·IgG Fc受体的生物学特性 | 第11-14页 |
| ·FcγRⅠ(CD64) | 第11-13页 |
| ·FcγRⅡ(CD32) | 第13页 |
| ·FcγRⅢ (CD16) | 第13-14页 |
| ·boFcγ2R | 第14页 |
| ·moFcγRⅣ | 第14页 |
| ·FcγR的免疫学功能 | 第14-16页 |
| ·介导ADCC作用 | 第14-15页 |
| ·介导DC细胞抗原提呈 | 第15页 |
| ·调节抗体介导的免疫细胞活化 | 第15页 |
| ·介导细胞吞噬作用 | 第15-16页 |
| ·FcγR与抗体的相互作用 | 第16-19页 |
| ·FcγR药物靶标研究 | 第19-20页 |
| 第2章 人FcγRⅠ基因的原核表达 | 第20-27页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·菌株、质粒、酶 | 第20页 |
| ·试剂配制 | 第20-21页 |
| ·主要试剂盒 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-24页 |
| ·人外周血白细胞分离及其cDNA合成 | 第21页 |
| ·大肠杆菌JM109感受态的制备 | 第21页 |
| ·huFcγRⅠ基因的克隆 | 第21-22页 |
| ·原核表达质粒peThuRⅠ的构建 | 第22-23页 |
| ·蛋白表达 | 第23页 |
| ·人FcγRⅠ胞外区诱导表达 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE和Western blot | 第23页 |
| ·包涵体纯化 | 第23-24页 |
| ·包涵体纯化 | 第23-24页 |
| ·结果 | 第24-26页 |
| ·huFcγRⅠ基因的扩增 | 第24页 |
| ·huFcγR Ⅰ原核表达质粒的构建 | 第24页 |
| ·重组huFcγR Ⅰ蛋白的诱导表达及Western blot鉴定 | 第24-26页 |
| ·重组huFcγR Ⅰ蛋白可溶性分析及纯化 | 第26页 |
| ·讨论 | 第26-27页 |
| ·huFcγR Ⅰ重组蛋白的表达 | 第26-27页 |
| 第3章 huFcγR Ⅰ基因的真核表达 | 第27-37页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·菌株、质粒、酶 | 第27页 |
| ·细胞 | 第27页 |
| ·试剂配制 | 第27-28页 |
| ·硫酸铵饱和溶液的配制 | 第27页 |
| ·0.2 mol/L NaH_2PO4液的配制 | 第27页 |
| ·0.2 mol/L Na_2HPO_4液的配制 | 第27页 |
| ·0.01 mol/L,PH7.0 PBS的配制 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-34页 |
| ·真核表达质粒pcDNA3-huFcγR Ⅰ的构建 | 第28-29页 |
| ·真核表达质粒pc3huγ的构建 | 第29-30页 |
| ·细胞转染 | 第30-31页 |
| ·人IgG的纯化与标记 | 第31页 |
| ·抗鸡红细胞(RBC)IgG的制备 | 第31-32页 |
| ·玫瑰花环试验 | 第32-33页 |
| ·huFcγRⅠ与γ链共转染稳定表达细胞系的建立 | 第33页 |
| ·共转染稳定表达细胞系的鉴定 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-36页 |
| ·真核表达质粒pcDNA3-huFcγR Ⅰ的构建 | 第34-35页 |
| ·真核表达质粒pc3huγ的构建 | 第35页 |
| ·抗鸡RBC小鼠IgG的制备 | 第35页 |
| ·共转染稳定表达细胞系的鉴定 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第4章 人FcγRⅠ线性结合表位的初步筛选与鉴定 | 第37-48页 |
| ·材料和方法 | 第37-44页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| ·huFcγRⅠ多肽设计 | 第38页 |
| ·Fmoc固相多肽合成 | 第38-42页 |
| ·固相多肽的合成树脂 | 第38页 |
| ·Fmoc固相多肽合成的相关试剂 | 第38-39页 |
| ·多肽合成过程中所用术语 | 第39页 |
| ·合成程序 | 第39-41页 |
| ·树脂标准的溶涨程序 | 第39-40页 |
| ·标准多肽的合成程序 | 第40页 |
| ·标准多肽的重复合成程序 | 第40-41页 |
| ·标准N末端氨基酸的合成及脱保护程序 | 第41页 |
| ·裂解程序 | 第41-42页 |
| ·多肽酰化反应的完成情况检测 | 第42页 |
| ·合成多肽的沉淀和脱盐纯化 | 第42-43页 |
| ·合成多肽的纯度和结构特性鉴定 | 第43页 |
| ·合成多肽的溶解和保存 | 第43-44页 |
| ·huFcγRⅠ受体线性结合表位的初步鉴定 | 第44页 |
| ·Dot-blot | 第44页 |
| ·结果 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-48页 |
| 全文结论 | 第48-49页 |
| 1. huFcγRⅠ胞外区原核表达 | 第48页 |
| 2. 稳定表达表达huFcγRⅠ的细胞系 | 第48页 |
| 3. 利用合成多肽初步定位了huFcγRⅠ的线性结合表位 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| Abstract | 第54-55页 |
| 科研成果 | 第55页 |
