| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 目录 | 第11-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-47页 |
| 1 苏云金芽胞杆菌研究历史 | 第14-17页 |
| 2 苏云金芽胞杆菌的生物学特性及分布 | 第17页 |
| 3 苏云金芽胞杆菌的分类鉴定 | 第17-26页 |
| ·生理生化鉴定 | 第18页 |
| ·血清型鉴定 | 第18-19页 |
| ·酯酶型鉴定法 | 第19页 |
| ·热解气相色谱法鉴定 | 第19页 |
| ·基于编码H抗原的hag基因分析 | 第19-26页 |
| 4 Bt杀虫晶体蛋白基因 | 第26-35页 |
| ·杀虫晶体蛋白cry基因的分类及克隆 | 第27-28页 |
| ·杀虫晶体蛋白cyt基因的分类及克隆 | 第28页 |
| ·杀虫晶体蛋白基因的表达调控 | 第28-32页 |
| ·cry基因的启动子及转录水平的调控 | 第28-30页 |
| ·转录后水平的调控 | 第30页 |
| ·翻译后水平的调控 | 第30-32页 |
| ·杀虫晶体蛋白基因的鉴定 | 第32-35页 |
| ·PCR鉴定方法 | 第32-34页 |
| ·其它鉴定方法 | 第34-35页 |
| 5 杀虫晶体蛋白结构与功能之间的关系 | 第35-42页 |
| ·杀虫晶体蛋白结构分析 | 第36-39页 |
| ·杀虫晶体蛋白的作用机制 | 第39-42页 |
| ·Cyt蛋白作用的机理 | 第39-40页 |
| ·Cry蛋白作用的机理 | 第40-42页 |
| 6 苏云金芽胞杆菌及其杀虫晶体蛋白的应用 | 第42-45页 |
| 7 本研究的立题依据和目的意义 | 第45-47页 |
| 第二章 四川盆地Bt的分离和杀虫晶体蛋白基因的鉴定 | 第47-67页 |
| 1 材料与方法 | 第47-58页 |
| ·材料 | 第47-54页 |
| ·土样来源 | 第47页 |
| ·仪器设备 | 第47-48页 |
| ·培养基与抗生素 | 第48-49页 |
| ·酶与生化试剂 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49-51页 |
| ·PCR-RFLP鉴定 | 第51-54页 |
| ·方法 | 第54-58页 |
| ·土样的采集、分离及菌株保存 | 第54页 |
| ·扫描电镜观察 | 第54-55页 |
| ·Bt总DNA及质粒DNA的提取 | 第55页 |
| ·PCR反应及酶切分析 | 第55-56页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及回收 | 第56页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第56-57页 |
| ·大肠杆菌DH5 a热激感受态细胞制备及热激转化 | 第57页 |
| ·新基因部分片段的克隆 | 第57页 |
| ·生物测定 | 第57-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-64页 |
| ·菌株的分离 | 第58页 |
| ·伴胞晶体形态的多样性 | 第58-59页 |
| ·苏云金芽胞杆菌cry和cyt基因的鉴定 | 第59-60页 |
| ·新型模式cry基因的发现 | 第60-64页 |
| ·生物测定 | 第64页 |
| ·杀虫晶体蛋白的测定 | 第64页 |
| 3 讨论 | 第64-67页 |
| 第三章 四川盆地cry2、cyt2基因鉴定及新型cry2A、cyt2A基因的克隆表达研究 | 第67-86页 |
| 1 材料与方法 | 第68-73页 |
| ·材料与仪器 | 第68-69页 |
| ·菌株与质粒 | 第68页 |
| ·培养基 | 第68-69页 |
| ·主要试剂 | 第69页 |
| ·仪器设备 | 第69页 |
| ·研究方法 | 第69-73页 |
| ·分子生物学操作 | 第69页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第69-70页 |
| ·E.coli质粒DNA提取 | 第70页 |
| ·cry2及cyt2基因型鉴定 | 第70-71页 |
| ·序列分析 | 第71页 |
| ·全长基因的克隆 | 第71-72页 |
| ·基因原核表达载体的构建 | 第72页 |
| ·基因在大肠杆菌中的表达及SDS-PAGE检测 | 第72-73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-84页 |
| ·含cry2类基因Bt菌株的鉴定 | 第73页 |
| ·cry2型基因的酶切鉴定分析 | 第73-74页 |
| ·cyt2型基因的酶切鉴定分析 | 第74-75页 |
| ·新型模式基因部分序列的克隆测序 | 第75-76页 |
| ·新型基因全长序列的克隆与序列分析 | 第76-78页 |
| ·Cry2Ag1及Cyt2Aa3蛋白氨基酸组成与序列分析 | 第78-81页 |
| ·Cry2Ag1蛋白氨基酸组成 | 第78-80页 |
| ·Cyt2Aa3蛋白氨基酸组成 | 第80-81页 |
| ·cry2Ag1和cyt2Aa3基因表达载体的构建 | 第81-83页 |
| ·cry2Ag1和cyt2Aa3基因在大肠杆菌中的表达 | 第83-84页 |
| ·cry2Agl和cyt2Aa3基因表达产物的生物活性 | 第84页 |
| 3 讨论 | 第84-86页 |
| 第四章 几株特异Bt菌的生物学鉴定及新型模式基因克隆与表达 | 第86-119页 |
| 1 材料与方法 | 第86-94页 |
| ·材料与仪器 | 第86-88页 |
| ·菌株与质粒 | 第86页 |
| ·培养基 | 第86页 |
| ·主要试剂 | 第86页 |
| ·仪器设备 | 第86页 |
| ·标准菌株 | 第86页 |
| ·其它材料器材 | 第86-88页 |
| ·研究方法 | 第88-94页 |
| ·Bt质粒提取 | 第88页 |
| ·菌株的质粒图谱分析 | 第88-89页 |
| ·Bt菌鞭毛观察 | 第89页 |
| ·Bt菌碳源利用分析 | 第89页 |
| ·Bt菌生理生化测定 | 第89-91页 |
| ·编码H抗原蛋白的hag基因序列分析 | 第91页 |
| ·H-血清型鉴定 | 第91-92页 |
| ·DNA相关操作 | 第92页 |
| ·序列分析 | 第92-93页 |
| ·全长基因的克隆 | 第93-94页 |
| ·基因原核表达载体的构建 | 第94页 |
| ·基因在大肠杆菌中的表达及SDS-PAGE检测 | 第94页 |
| 2 结果与分析 | 第94-116页 |
| ·菌株杀虫晶体蛋白特性鉴定 | 第94-96页 |
| ·菌株质粒分析 | 第96页 |
| ·菌株鞭毛生长情况 | 第96页 |
| ·生理生化特性鉴定 | 第96页 |
| ·碳源利用测定 | 第96-97页 |
| ·编码H抗原蛋白的hag基因序列分析 | 第97-101页 |
| ·H-抗血清的鉴定 | 第101-102页 |
| ·新型模式cry基因克隆及其序列分析 | 第102-103页 |
| ·蛋白氨基酸组成与序列分析 | 第103-110页 |
| ·新型模式cry基因表达载体的构建 | 第110-113页 |
| ·基因在大肠杆菌中的表达及SDS-PAGE检测 | 第113-115页 |
| ·基因表达产物的生物活性 | 第115-116页 |
| 3 讨论 | 第116-119页 |
| 后续工作设想 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
| 在读期间发表科研论文情况 | 第140-141页 |
| 申请专利情况 | 第141-142页 |
| 正式命名的新型模式基因 | 第142页 |
