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乳腺癌中NDRG1基因异常甲基化分析及BRCA1基因CpG岛甲基化特异位点对转录活性的影响

摘要第2-5页
Abstract第5-7页
第一部分 乳腺癌中NDRG1基因启动子区异常甲基化分析第11-51页
    引言第11-13页
    第1章 材料与方法第13-29页
        1.1 仪器、试剂及耗材第13-15页
        1.2 乳腺癌细胞系第15页
        1.3 乳腺癌组织标本第15-16页
        1.4 NDRG1基因的mRNA检测第16-19页
        1.5 NDRG1基因的蛋白检测第19-22页
        1.6 DNA样本的亚硫酸盐处理第22-26页
        1.7 BSP克隆测序第26-27页
        1.8 去甲基化药物AZA处理T47D细胞第27页
        1.9 甲基化特异性PCR第27-28页
        1.10 统计学分析第28-29页
    第2章 实验结果第29-39页
        2.1 乳腺癌细胞系NDRG1基因的mRNA及蛋白表达第29-30页
        2.2 乳腺癌细胞系NDRG1基因启动子区的甲基化状态第30-32页
        2.3 AZA对T47D细胞NDRG1基因mRNA及蛋白表达的影响第32页
        2.4 乳腺癌组织中NDRG1基因的mRNA表达第32-34页
        2.5 乳腺癌组织中NDRG1基因启动子区的甲基化状态第34-35页
        2.6 乳腺癌组织中NDRG1基因表达与其启动子区甲基化的关系第35-36页
        2.7 乳腺癌组织中NDRG1基因启动子区甲基化与临床病理特征的关系第36-39页
    第3章 讨论第39-43页
    结论第43-44页
    参考文献第44-51页
第二部分 BRCA1基因CpG岛甲基化特异位点对转录活性的影响第51-77页
    引言第51-54页
    第1章 材料与方法第54-64页
        1.1 仪器、试剂及耗材第54-56页
        1.2 乳腺癌细胞系第56页
        1.3 启动子区5个片段与报告基因载体的连接第56-59页
        1.4 感受态大肠杆菌的制备第59-60页
        1.5 重组质粒的转化第60页
        1.6 质粒的抽提第60-61页
        1.7 质粒采用CpG甲基转移酶M.SssI的处理第61-62页
        1.8 启动子报告基因载体的转染第62页
        1.9 启动子荧光素酶活性的检测第62-63页
        1.10 统计学分析第63-64页
    第2章 实验结果第64-70页
        2.1 BRCA1基因启动子区5个片段长度的检测结果第64页
        2.2 BRCA1基因启动子区5个片段的测序验证第64-67页
        2.3 BRCA1基因启动子区5个片段连接报告基因载体后的荧光素酶活性第67-68页
        2.4 CpG甲基转移酶M.SssI修饰BRCA1基因启动子区5个片段后的荧光素酶活性第68-70页
    第3章 讨论第70-73页
    结论第73-74页
    参考文献第74-77页
综述第77-103页
    综述参考文献第93-103页
攻读学位期间的研究成果第103-104页
致谢第104-105页

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