| 摘要 | 第2-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一部分 乳腺癌中NDRG1基因启动子区异常甲基化分析 | 第11-51页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 第1章 材料与方法 | 第13-29页 |
| 1.1 仪器、试剂及耗材 | 第13-15页 |
| 1.2 乳腺癌细胞系 | 第15页 |
| 1.3 乳腺癌组织标本 | 第15-16页 |
| 1.4 NDRG1基因的mRNA检测 | 第16-19页 |
| 1.5 NDRG1基因的蛋白检测 | 第19-22页 |
| 1.6 DNA样本的亚硫酸盐处理 | 第22-26页 |
| 1.7 BSP克隆测序 | 第26-27页 |
| 1.8 去甲基化药物AZA处理T47D细胞 | 第27页 |
| 1.9 甲基化特异性PCR | 第27-28页 |
| 1.10 统计学分析 | 第28-29页 |
| 第2章 实验结果 | 第29-39页 |
| 2.1 乳腺癌细胞系NDRG1基因的mRNA及蛋白表达 | 第29-30页 |
| 2.2 乳腺癌细胞系NDRG1基因启动子区的甲基化状态 | 第30-32页 |
| 2.3 AZA对T47D细胞NDRG1基因mRNA及蛋白表达的影响 | 第32页 |
| 2.4 乳腺癌组织中NDRG1基因的mRNA表达 | 第32-34页 |
| 2.5 乳腺癌组织中NDRG1基因启动子区的甲基化状态 | 第34-35页 |
| 2.6 乳腺癌组织中NDRG1基因表达与其启动子区甲基化的关系 | 第35-36页 |
| 2.7 乳腺癌组织中NDRG1基因启动子区甲基化与临床病理特征的关系 | 第36-39页 |
| 第3章 讨论 | 第39-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 第二部分 BRCA1基因CpG岛甲基化特异位点对转录活性的影响 | 第51-77页 |
| 引言 | 第51-54页 |
| 第1章 材料与方法 | 第54-64页 |
| 1.1 仪器、试剂及耗材 | 第54-56页 |
| 1.2 乳腺癌细胞系 | 第56页 |
| 1.3 启动子区5个片段与报告基因载体的连接 | 第56-59页 |
| 1.4 感受态大肠杆菌的制备 | 第59-60页 |
| 1.5 重组质粒的转化 | 第60页 |
| 1.6 质粒的抽提 | 第60-61页 |
| 1.7 质粒采用CpG甲基转移酶M.SssI的处理 | 第61-62页 |
| 1.8 启动子报告基因载体的转染 | 第62页 |
| 1.9 启动子荧光素酶活性的检测 | 第62-63页 |
| 1.10 统计学分析 | 第63-64页 |
| 第2章 实验结果 | 第64-70页 |
| 2.1 BRCA1基因启动子区5个片段长度的检测结果 | 第64页 |
| 2.2 BRCA1基因启动子区5个片段的测序验证 | 第64-67页 |
| 2.3 BRCA1基因启动子区5个片段连接报告基因载体后的荧光素酶活性 | 第67-68页 |
| 2.4 CpG甲基转移酶M.SssI修饰BRCA1基因启动子区5个片段后的荧光素酶活性 | 第68-70页 |
| 第3章 讨论 | 第70-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-77页 |
| 综述 | 第77-103页 |
| 综述参考文献 | 第93-103页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
