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利用黄瓜幼苗内生真菌种子处理防治南方根结线虫的研究

致谢第1-11页
摘要第11-13页
Abstract第13-16页
第一章 文献综述与研究背景第16-32页
 1 黄瓜上根结线虫种类、生物学特性、危害及防治第16-22页
   ·黄瓜上发生的根结线虫种类第16-17页
   ·根结线虫的生物学特性第17页
   ·根结线虫对黄瓜的危害第17-19页
   ·根结线虫的防治第19-22页
 2 内生真菌的概念、多样性及在植物保护中的作用第22-26页
   ·内生真菌的概念第22-23页
   ·内生真菌的多样性第23-24页
   ·内生真菌在植物保护中的应用第24-26页
 3 内生真菌防治线虫病害的研究进展第26-29页
   ·内生真菌成功防治植物线虫的例子第26页
   ·内生真菌防治植物线虫的作用机制第26-28页
   ·内生真菌用于植物线虫病害防治的优势第28-29页
 4 内生真菌用于种子处理防治根结线虫的潜力第29-30页
   ·种子处理防治线虫病害第29页
   ·内生真菌种子处理第29-30页
 5 本研究的目的和内容第30-32页
   ·研究目的第30页
   ·研究内容第30-32页
第二章 论文中常使用的材料和方法第32-36页
 1 常用材料第32-33页
     ·供试黄瓜品种第32页
   ·抗生素母液第32页
   ·常用培养基第32页
   ·表面消毒液第32-33页
   ·植物肥料第33页
   ·植物根部线虫染色液第33页
 2 常用实验方法第33-36页
   ·供试线虫准备第33-34页
   ·土壤基质准备第34页
   ·真菌菌株培养及孢子悬浮液配制第34页
   ·真菌孢子的计数第34页
   ·真菌菌株的保存第34-35页
   ·植物根中线虫染色并计数第35页
   ·统计分析及图表第35-36页
第三章 黄瓜幼苗内生真菌的分离及其作为种子处理对南方根结线虫控制作用的筛选第36-46页
 1 材料与方法第36-38页
   ·内生真菌分离第36-37页
   ·菌株的纯化、保存及初步鉴定第37页
   ·内生菌株防治根结线虫的筛选第37-38页
   ·初筛选菌株对根结线虫防治效果的重复测定第38页
   ·初筛选菌株对黄瓜幼苗生长的影响第38页
   ·初筛选菌株在黄瓜幼苗上的定植第38页
 2 结果第38-44页
   ·黄瓜幼苗内生真菌的多样性第38-40页
   ·黄瓜幼苗内生真菌作为种子防治南方根结线虫的筛选第40页
   ·初筛选菌株的对南方根结线虫防治的重复测定第40-41页
   ·初筛选菌株对黄瓜幼苗生长的影响第41-42页
   ·初筛选菌株在黄瓜幼苗上的定植能力第42-44页
 3 讨论第44-46页
第四章 10株黄瓜幼苗内生真菌对南方根结线虫的离体作用第46-55页
 1 材料与方法第46-48页
   ·供试菌株第46页
   ·0.67%曙红Y溶液第46页
   ·菌株培养滤液的准备第46页
   ·菌株培养滤液对J2的致死作用测定第46-47页
   ·菌株培养滤液对J2活动的趋避作用测定第47页
   ·菌株培养滤液对卵孵化及卵活力的影响第47-48页
   ·10株内生菌菌丝对J2体壁穿透及虫体消化的观察第48页
   ·菌丝对卵寄生的观察第48页
 2 结果第48-52页
   ·10菌株培养滤液对J2的致死或麻痹作用第48-49页
   ·10菌株培养滤液对二龄幼虫活动的趋避性第49-50页
   ·10菌株培养滤液对卵孵化和卵活力的影响第50页
   ·10株内生菌菌丝对J2的作用第50-51页
   ·菌丝对卵寄生的观察第51-52页
 3 讨论第52-55页
第五章 10株黄瓜幼苗内生真菌诱导植株产生根结线虫抗性的研究第55-62页
 1 材料与方法第55-57页
   ·供试菌株第55页
   ·黄瓜幼苗根系分成"挑战"根系和"应答"根系第55-56页
   ·供试菌株接种第56页
   ·线虫接种第56页
   ·计数应答根系中线虫的入侵总数第56页
   ·应答根系中线虫的发育和繁殖第56-57页
 2 结果第57-59页
   ·"应答"根系中线虫的入侵第57-58页
   ·"应答"根系中的线虫发育和繁殖第58-59页
 3 讨论第59-62页
第六章 黄瓜幼苗内生毛壳菌CH1001菌株鉴定第62-68页
 1 材料与方法第62-64页
   ·形态学鉴定第62页
   ·rDNA-ITS鉴定第62-64页
     ·试剂第62页
     ·DNA提取第62-63页
     ·PCR扩增第63页
     ·琼脂糖凝胶电泳第63页
     ·PCR产物纯化第63-64页
     ·DNA序列测定与分析第64页
 2 结果第64-66页
   ·Ch1001形态特征第64-65页
   ·Ch1001菌株rDNA-TIS第65-66页
 3 讨论第66-68页
第七章 黄瓜内生球毛壳菌CH1001菌株产生的杀线虫活性物质分析第68-77页
 1 材料与方法第68-71页
   ·毛壳菌素提取与生物活性测定第68-69页
     ·毛壳菌素提取第68-69页
     ·提取物HPLC检测第69页
     ·提取物对南方根结线虫J2和卵的活性测定第69页
   ·Ch1001产生几丁质酶检测及对卵孵化的抑制第69-70页
     ·胶体几丁质的配制第69页
     ·Ch1001的培养第69-70页
     ·葡萄糖标准曲线绘制第70页
     ·Ch1001培养滤液几丁质酶活性及对卵孵化抑制活性测定第70页
   ·杀线虫活性物质的挥发性的测定第70-71页
   ·培养滤液pH值杀线虫活性的相关性研究第71页
 2 结果第71-75页
   ·毛壳菌素的产生和其对根结线虫的作用第71-72页
   ·Ch1001菌株的几丁质酶活性及对卵孵化的抑制第72-73页
     ·葡萄糖标准曲线第72-73页
     ·Ch1001产生几丁质酶的检测及其对卵孵化的抑制第73页
   ·Ch1001致死二龄幼虫物质的挥发性第73-74页
   ·培养滤液pH值杀线虫活性与的相关性第74-75页
 3 讨论第75-77页
第八章 黄瓜内生球毛壳菌CH1001菌株种子处理剂量与幼苗根系活力、防御酶活性及根结线虫控制效果的关系第77-83页
 1 材料和方法第77-80页
   ·梯度浓度Ch1001孢子悬浮液的制备及种子处理第77页
   ·根系活力测定第77-78页
     ·TTC还原标准曲线第77页
     ·黄瓜幼苗的根系活力测定第77-78页
   ·防御酶活性测定第78-79页
     ·酶提取液配制第78页
     ·PAL(苯丙氨酸解氨酶)活性测定第78-79页
     ·POD(过氧化物酶)活性测定第79页
     ·CAT(过氧化氢酶)活性测定第79页
     ·Ch1001接种剂量与几丁质酶变化的关系第79页
   ·Ch1001接种剂量与根结线虫防治效果的关系第79-80页
 2 结果第80-82页
   ·Ch1001接种剂量与根系活力的关系第80页
   ·Ch1001接种剂量与防御酶活性的关系第80-81页
   ·Ch1001菌株种子处理剂量与根结线虫控制效果关系第81-82页
 3 讨论第82-83页
第九章 黄瓜内生球毛壳菌CH1001菌株对根系分泌物及根尖边缘细胞与根结线虫活动关系的影响第83-90页
 1 材料与方法第84-86页
   ·根系分泌物收集第84页
   ·根边缘细胞收集第84页
   ·根系分泌物及根边缘细胞对卵孵化的影响第84-85页
   ·根系分泌物和根边缘细胞对二龄幼虫的吸引指数测定第85-86页
   ·Ch1001对根系分泌物和根边缘细胞刺激J2口针分泌的影响第86页
 2 结果第86-89页
   ·Ch1001对根系分泌物和根边缘细胞中根结线虫卵孵化的影响第86页
   ·Ch1001对根系分泌物和根边缘细胞对J2吸引力的影响第86-87页
   ·Ch1001对根系分泌物和根边缘细胞刺激二龄幼虫口针分泌的影响第87-89页
 3 讨论第89-90页
全文小结第90-93页
 1 本研究主要结果第90-91页
 2 本研究的主要创新点第91页
 3 主要不足与有待进一步认识的问题第91-93页
参考文献第93-111页
附录A:球毛壳CH1001菌株RDNA-ITS序列第111-112页
附录B:本论文使用仪器第112页

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