| 摘要 | 第1-17页 |
| ABSTRACT | 第17-22页 |
| 缩略词表 | 第22-25页 |
| 第一章 绪论 | 第25-58页 |
| ·聚羟基脂肪酸酯(PHA)的概述 | 第25-31页 |
| ·聚羟基脂肪酸酯的组成与分类 | 第26-27页 |
| ·聚羟基脂肪酸酯的材料学性质及改性研究 | 第27-29页 |
| ·PHA的应用及前景 | 第29-31页 |
| ·PHA的生物合成 | 第31-38页 |
| ·PHA的微生物合成途径 | 第31-34页 |
| ·PHA生物合成相关基因的组织形式 | 第34-36页 |
| ·PHA生物合成中提供单体的酶 | 第36-38页 |
| ·PHA的提取与检测 | 第38-45页 |
| ·从微生物细胞中分离提取PHA的方法 | 第38-40页 |
| ·微生物胞内PHA的鉴定与检测 | 第40-45页 |
| ·短链PHA的生产 | 第45-56页 |
| ·PHB的发酵生产 | 第45-49页 |
| ·PHBV共聚物的生产 | 第49-55页 |
| ·通过细菌发酵生产短链PHA的经济学思考 | 第55-56页 |
| ·本论文的研究工作及意义 | 第56-58页 |
| 第二章 重组大肠杆菌利用廉价碳源高效生产PHB | 第58-81页 |
| ·实验材料 | 第59-65页 |
| ·菌株和质粒 | 第59-60页 |
| ·用于基因敲除的引物序列 | 第60页 |
| ·分子生物学常用工具酶 | 第60-61页 |
| ·常用试剂盒 | 第61页 |
| ·常用生化试剂 | 第61页 |
| ·分子量标准物 | 第61页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR)用试剂 | 第61-62页 |
| ·仪器和设备 | 第62-63页 |
| ·常用试剂配方 | 第63-65页 |
| ·实验方法 | 第65-70页 |
| ·菌种保存方法 | 第65页 |
| ·分子生物学常规操作 | 第65-66页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第65-66页 |
| ·大肠杆菌的常规转化 | 第66页 |
| ·大肠杆菌DH5α中ptsG基因的敲除 | 第66-67页 |
| ·两种廉价底物的制备 | 第67-68页 |
| ·重组大肠杆菌生产PHB的发酵培养 | 第68页 |
| ·检测方法 | 第68-69页 |
| ·产PHB重组菌的尼罗红染色及显微镜观察 | 第69页 |
| ·PHB的提取实验 | 第69-70页 |
| ·结果与讨论 | 第70-80页 |
| ·大肠杆菌DH5α中ptsG基因的敲除 | 第70-71页 |
| ·GC检测3HB标准曲线的建立 | 第71页 |
| ·大肠杆菌生产菌株的选择 | 第71-72页 |
| ·大肠杆菌利用各种碳源合成PHB的比较 | 第72-73页 |
| ·多种碳源同时利用的工程化大肠杆菌的构建 | 第73-74页 |
| ·工程化大肠杆菌发酵条件的初步优化 | 第74-75页 |
| ·实验室中利用廉价碳源分批发酵试验 | 第75-78页 |
| ·显微镜观察产PHB大肠杆菌的形态 | 第78页 |
| ·大肠杆菌胞内PHB提取方法的优化 | 第78-80页 |
| ·本章小结 | 第80-81页 |
| 第三章 大肠杆菌丙酸代谢与PHBV合成的关系 | 第81-98页 |
| ·材料与方法 | 第84-88页 |
| ·菌株和质粒 | 第84页 |
| ·用于基因操作的引物序列 | 第84-85页 |
| ·大肠杆菌的基因敲除方法 | 第85-87页 |
| ·丙酰辅酶A合成酶基因表达载体的构建 | 第87页 |
| ·检测方法 | 第87-88页 |
| ·实验结果 | 第88-95页 |
| ·大肠杆菌中的基因敲除 | 第88-89页 |
| ·重组质粒pBBR-prpE和pBBR-acs的构建 | 第89-90页 |
| ·GC检测3HV标准曲线的建立 | 第90页 |
| ·PTS系统对大肠杆菌代谢丙酸及合成PHBV的影响 | 第90-92页 |
| ·丙酰辅酶A合成酶在丙酸代谢和PHBV合成中的作用 | 第92-94页 |
| ·大肠杆菌3HV合成中代谢支路的阻断 | 第94-95页 |
| ·讨论 | 第95-96页 |
| ·本章小结 | 第96-98页 |
| 第四章 重组大肠杆菌利用非相关碳源生产PHBV | 第98-119页 |
| ·材料和方法 | 第100-104页 |
| ·菌株和质粒 | 第100-102页 |
| ·不同来源的ilvA基因表达载体的构建 | 第101-102页 |
| ·苏氨酸合成表达载体的构建 | 第102页 |
| ·PHBV合成酶和苏氨酸脱氨酶双表达载体的构建 | 第102页 |
| ·培养基及发酵方法 | 第102-103页 |
| ·检测方法 | 第103-104页 |
| ·实验结果 | 第104-117页 |
| ·大肠杆菌利用葡萄糖合成PHBV现象的发现 | 第104-105页 |
| ·检测大肠杆菌中丙酰CoA的来源 | 第105-107页 |
| ·苏氨酸转化为丙酰CoA过程中关键酶的确定 | 第107-112页 |
| ·利用非相关碳源合成PHBV的大肠杆菌工程菌的构建 | 第112-117页 |
| ·讨论 | 第117页 |
| ·本章小结 | 第117-119页 |
| 全文总结 | 第119-122页 |
| 参考文献 | 第122-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第135-136页 |
| 外文写作 | 第136-137页 |
| 附录 | 第137-179页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第179页 |
