| 摘要 | 第7-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-46页 |
| 1 棉铃虫的为害、发生和防治 | 第16-17页 |
| 2 穿孔毒素及其研究现状 | 第17-29页 |
| 2.1 穿孔毒素的分类及其穿孔机制 | 第17-24页 |
| 2.2 穿孔毒素相关的信号通路 | 第24-29页 |
| 3 3D-Cry毒素的作用机理及抗性相关研究 | 第29-40页 |
| 3.1 3D-Cry毒素的作用机理研究 | 第29-30页 |
| 3.2 Bt毒素的抗性现状 | 第30-32页 |
| 3.3 Bt毒素的抗性机理研究 | 第32-37页 |
| 3.4 Bt毒素的抗性治理策略 | 第37-40页 |
| 4 circRNA及其主要研究进展 | 第40-44页 |
| 4.1 circRNA的生物学特征 | 第40页 |
| 4.2 circRNA的产生及调控机制 | 第40-42页 |
| 4.3 circRNA的生物学功能 | 第42-43页 |
| 4.4 circRNA研究中的挑战 | 第43-44页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第44-46页 |
| 第二章 LF256品系与钙粘蛋白突变品系对Cry1Ac抗性存在SSNC效应 | 第46-60页 |
| 1 材料与方法 | 第48-52页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第48页 |
| 1.2 LF256抗性品系的起源:F_1筛选 | 第48页 |
| 1.3 毒素的来源与生物测定方法 | 第48-49页 |
| 1.4 LF256抗性基因的遗传方式分析 | 第49页 |
| 1.5 LF256抗性基因与钙粘蛋白r_1突变的等位性遗传互补测验 | 第49页 |
| 1.6 钙粘蛋白cDNA序列的克隆 | 第49-50页 |
| 1.7 qRT-PCR分析 | 第50页 |
| 1.8 中肠BBMV的制备 | 第50-51页 |
| 1.9 Western blot和配基结合实验 | 第51页 |
| 1.10 LF256品系钙粘蛋白位点与Cry1Ac抗性的连锁性分析 | 第51-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-57页 |
| 2.1 LF256抗性品系的建立 | 第52-53页 |
| 2.2 LF256品系的交互抗性谱 | 第53-54页 |
| 2.3 LF256品系的抗性遗传方式 | 第54页 |
| 2.4 与钙粘蛋白r_1突变的等位基因遗传互补性检测 | 第54-55页 |
| 2.5 LF256品系和SCD品系钙粘蛋白基因的全长克隆 | 第55页 |
| 2.6 钙粘蛋白基因与LF256品系的Cry1Ac抗性不连锁 | 第55-56页 |
| 2.7 LF256钙粘蛋白转录水平、蛋白表达水平及与Cry1Ac结合的测定 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-60页 |
| 3.1 SSNC效应影响棉铃虫对Bt毒素的抗性 | 第57页 |
| 3.2 ABCC2基因可能与LF256品系的Cry1Ac抗性无关 | 第57-58页 |
| 3.3 SSNC效应的存在对F_1筛选工作的启示 | 第58-60页 |
| 第三章 LF256品系Cry1Ac抗性的遗传定位及机理研究 | 第60-82页 |
| 1 材料与方法 | 第62-66页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第62页 |
| 1.2 毒素的来源与生物测定方法 | 第62页 |
| 1.3 抗性基因的遗传方式分析及与钙粘蛋白r_1突变的遗传互补性测验 | 第62-63页 |
| 1.4 QTL定位群体的构建和BSA分析 | 第63页 |
| 1.5 cDNA序列的克隆 | 第63页 |
| 1.6 实时荧光定量PCR分析 | 第63-65页 |
| 1.7 转录组样品的制备和分析流程 | 第65-66页 |
| 1.8 添加抑制剂的生物测定方法 | 第66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-79页 |
| 2.1 LF256-P品系的交互抗性谱 | 第66页 |
| 2.2 LF256-P品系的抗性遗传方式及与钙粘蛋白r_1突变的互补性检测 | 第66-68页 |
| 2.3 LF256-P品系的抗性基因定位 | 第68-71页 |
| 2.4 LF256-P品系的两个抗性基因的分离 | 第71-72页 |
| 2.5 分离群体的交互抗性谱及抗性遗传方式和与钙粘蛋白r_1突变的互补性检测 | 第72-73页 |
| 2.6 候选基因的全长克隆及表达量分析 | 第73-76页 |
| 2.7 RNA-seq分析LF256品系抗性产生的可能机制 | 第76-79页 |
| 3 讨论 | 第79-82页 |
| 3.1 Cry1Ac筛选棉铃虫抗性品系可以导致对Cry2Ab产生交互抗性 | 第79页 |
| 3.2 15号染色体上一个新的抗性基因导致了LF256的Cry1Ac抗性 | 第79-80页 |
| 3.3 信号通路在LF256品系抗性产生中的作用 | 第80-82页 |
| 第四章 环状RNA介导的棉铃虫APN基因的新型可变剪接 | 第82-106页 |
| 1 材料与方法 | 第84-86页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第84页 |
| 1.2 cDNA序列的克隆和测序 | 第84页 |
| 1.3 gDNA序列的克隆和测序 | 第84-85页 |
| 1.4 实时荧光定量PCR分析 | 第85页 |
| 1.5 APN基因circRNAs的检测 | 第85-86页 |
| 2 结果与分析 | 第86-101页 |
| 2.1 棉铃虫种群的APN1基因存在多种转录本 | 第86-89页 |
| 2.2 APN1突变型转录本的表达水平 | 第89-90页 |
| 2.3 棉铃虫中其他APN基因的转录本分析 | 第90-93页 |
| 2.4 棉铃虫APN1和APN3中Circular RNAs的鉴定 | 第93-96页 |
| 2.5 环形剪接体与缺失突变型的线性剪接体的剪接位点分析 | 第96-101页 |
| 3 讨论 | 第101-106页 |
| 3.1 棉铃虫APN基因新型转录本的鉴定及其可能的形成机制 | 第101-103页 |
| 3.2 棉铃虫APN基因环状RNA的鉴定及其特征分析 | 第103页 |
| 3.3 棉铃虫APN基因两种类型剪接体的关联及其可能的功能分析 | 第103-106页 |
| 第五章 棉铃虫APN家族基因的命名、进化、表达及序列分析 | 第106-122页 |
| 1 材料与方法 | 第108-109页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第108页 |
| 1.2 APN基因序列的分析 | 第108页 |
| 1.3 APNcDNA序列的克隆和测序 | 第108页 |
| 1.4 APN基因在棉铃虫体内的时空表达分析 | 第108-109页 |
| 2 结果与分析 | 第109-117页 |
| 2.1 棉铃虫与其他几个鳞翅目昆虫APN家族基因的命名 | 第109-110页 |
| 2.2 棉铃虫与其他几个鳞翅目昆虫APN家族基因的进化关系分析 | 第110-111页 |
| 2.3 棉铃虫APN家族基因的结构和特征分析 | 第111-113页 |
| 2.4 棉铃虫APN家族基因的时空表达 | 第113-116页 |
| 2.5 棉铃虫中APN家族基因的转录本分析 | 第116-117页 |
| 3 讨论 | 第117-122页 |
| 3.1 鳞翅目昆虫APN基因的命名及进化 | 第117-118页 |
| 3.2 通过棉铃虫APN基因结构与表达水平分析预测可能的Bt受体 | 第118-119页 |
| 3.3 环状RNA介导的可变剪接与棉铃虫APN基因进化的关联性 | 第119-122页 |
| 全文总结 | 第122-124页 |
| 参考文献 | 第124-146页 |
| 附录 | 第146-148页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第148-150页 |
| 致谢 | 第150页 |
