摘要 | 第4-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
第一章 引言 | 第15-26页 |
1.1 斑节对虾及其养殖现状 | 第15-16页 |
1.1.1 斑节对虾简介 | 第15页 |
1.1.2 国内外养殖现状 | 第15-16页 |
1.2 对虾的免疫防御 | 第16-17页 |
1.3 抗氧化酶的产生 | 第17-18页 |
1.4 Prx家族及其功能机制 | 第18-23页 |
1.4.1 Prxs的种类和作用机制 | 第18-19页 |
1.4.2 Prxs的定位及功能研究进展 | 第19-21页 |
1.4.3 典型的2-CysPrxs的特性 | 第21-22页 |
1.4.4 非典型的2-CysPrxs的特性 | 第22-23页 |
1.5 本研究的目的,意义和技术路线 | 第23-26页 |
1.5.1 本研究的目的以及意义 | 第23-25页 |
1.5.2 本研究的技术路线 | 第25-26页 |
第二章 三个Prx基因的克隆与组织表达 | 第26-56页 |
2.1 实验材料 | 第26-29页 |
2.1.1 实验用虾及菌种 | 第26页 |
2.1.2 实验器材 | 第26-28页 |
2.1.3 试剂及其配制 | 第28-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-38页 |
2.2.1 实验动物处理取样 | 第29页 |
2.2.2 实验用品准备 | 第29-30页 |
2.2.3 RNA提取和cDNA合成 | 第30页 |
2.2.4 基因cDNA全长的克隆 | 第30-36页 |
2.2.5 生物信息学分析 | 第36-37页 |
2.2.6 组织表达分析 | 第37-38页 |
2.3 实验结果 | 第38-53页 |
2.3.1 PmPrx1序列生物信息学分析 | 第38-43页 |
2.3.2 PmPrx5序列生物信息学分析 | 第43-46页 |
2.3.3 PmPrxn序列生物信息学分析 | 第46-50页 |
2.3.4 PmPrx1基因的的组织分布 | 第50-51页 |
2.3.5 PmPrx5基因的的组织分布 | 第51-52页 |
2.3.6 PmPrxn基因的的组织分布 | 第52-53页 |
2.4 讨论 | 第53-56页 |
第三章 基因在不同环境应激下的表达分析 | 第56-71页 |
3.1 实验材料 | 第56-57页 |
3.1.1 实验动物 | 第56页 |
3.1.2 实验试剂与配制 | 第56-57页 |
3.2 实验方法 | 第57页 |
3.3 实验结果 | 第57-67页 |
3.3.1 三个基因细菌刺激后的差异表达 | 第57-60页 |
3.3.2 三个基因不同环境应激下的差异表达 | 第60-67页 |
3.4 讨论 | 第67-71页 |
第四章 基因的重组表达、蛋白纯化 | 第71-83页 |
4.1 实验材料 | 第71-72页 |
4.1.1 实验动物 | 第71页 |
4.1.2 实验仪器 | 第71页 |
4.1.3 实验试剂与配制 | 第71-72页 |
4.2 实验方法 | 第72-77页 |
4.2.1 构建重组载体 | 第72-73页 |
4.2.2 重组质粒诱导表达及鉴定 | 第73-76页 |
4.2.3 融合蛋白活性研究 | 第76-77页 |
4.3 实验结果 | 第77-82页 |
4.3.1 三种重组蛋白的表达和纯化 | 第77-80页 |
4.3.2 三种蛋白浓度测定和酶活 | 第80-82页 |
4.4 讨论 | 第82-83页 |
第五章 重组蛋白的抗菌能力分析 | 第83-93页 |
5.1 实验材料 | 第83-84页 |
5.1.1 实验仪器 | 第83页 |
5.1.2 实验试剂与配制 | 第83页 |
5.1.3 实验动物 | 第83-84页 |
5.2 实验方法 | 第84-85页 |
5.2.1 琼脂扩散法检测重组蛋白的体外抗菌能力 | 第84页 |
5.2.2 液体培养基法检测重组蛋白的体外抗菌能力 | 第84-85页 |
5.3 实验结果 | 第85-91页 |
5.3.1 重组PmPrx1蛋白的抗菌性能测定 | 第85-87页 |
5.3.2 重组PmPrx5蛋白的抗菌性能测定 | 第87-89页 |
5.3.3 重组PmPrxn蛋白的抗菌性能测定 | 第89-91页 |
5.4 讨论 | 第91-93页 |
第六章 重金属和H_2O_2胁迫下重组蛋白对宿主的保护作用 | 第93-101页 |
6.1 实验材料 | 第93页 |
6.1.1 实验仪器 | 第93页 |
6.1.2 实验试剂与配制 | 第93页 |
6.2 实验方法 | 第93-94页 |
6.2.1 在重金属胁迫下重组蛋白对宿主的保护作用 | 第93页 |
6.2.2 在H_2O_2胁迫下重组蛋白对宿主的保护作用 | 第93-94页 |
6.3 实验结果 | 第94-100页 |
6.3.1 在重金属和H_2O_2胁迫下PmPrx1对宿主的保护作用 | 第94-97页 |
6.3.2 在重金属胁迫下PmPrx5对宿主的保护作用 | 第97-99页 |
6.3.3 在重金属胁迫下PmPrxn对宿主的保护作用 | 第99-100页 |
6.4 讨论 | 第100-101页 |
结论 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-115页 |
附录 | 第115-116页 |
致谢 | 第116页 |