| 中文摘要 | 第10-13页 |
| 英文摘要 | 第13-16页 |
| 本论文主要创新点 | 第17-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-41页 |
| §1.1 细胞表面聚糖 | 第18-20页 |
| 1.1.1 聚糖的结构和分类 | 第18-19页 |
| 1.1.2 糖基化与疾病 | 第19-20页 |
| §1.2 细胞表面聚糖的检测 | 第20-27页 |
| 1.2.1 聚糖的识别和标记 | 第20-24页 |
| 1.2.1.1 凝集素识别 | 第20-21页 |
| 1.2.1.2 化学共价识别 | 第21-23页 |
| 1.2.1.3 新陈代谢标记 | 第23-24页 |
| 1.2.2 聚糖的检测方法 | 第24-27页 |
| 1.2.2.1 质谱法 | 第24-25页 |
| 1.2.2.2 电化学法 | 第25-26页 |
| 1.2.2.3 光学法 | 第26-27页 |
| 1.2.2.4 纳米技术法 | 第27页 |
| §1.3 细胞表面聚糖的形态和功能分析 | 第27-32页 |
| 1.3.1 聚糖的多价相互作用模式 | 第27-28页 |
| 1.3.2 聚糖的形态和功能分析方法 | 第28-32页 |
| 1.3.2.1 纳米粒子法 | 第28-30页 |
| 1.3.2.2 人工界面法 | 第30-31页 |
| 1.3.2.3 细胞工程法 | 第31-32页 |
| §1.4 特定蛋白质上的聚糖分析 | 第32-34页 |
| 1.4.1 糖蛋白与糖基化 | 第32页 |
| 1.4.2 特定蛋白质上的聚糖分析方法 | 第32-34页 |
| §1.5 本论文的主要研究工作 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-41页 |
| 第二章 密度可调的树枝状高分子阵列通过化学选择性卸载金纳米簇探针原位追踪细胞表面唾液酸密度 | 第41-54页 |
| §2.1 引言 | 第41-43页 |
| §2.2 实验部分 | 第43-46页 |
| 2.2.1 材料和试剂 | 第43页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第43-44页 |
| 2.2.3 细胞培养和处理 | 第44页 |
| 2.2.4 AuNC的制备 | 第44-45页 |
| 2.2.5 APBA-AuNC探针的制备 | 第45页 |
| 2.2.6 密度可调的树枝状高分子阵列的构建 | 第45页 |
| 2.2.7 探针卸载分析 | 第45页 |
| 2.2.8 唾液酸密度变化监测 | 第45页 |
| 2.2.9 APBA-AuNCs与细胞表面的特异性结合 | 第45-46页 |
| 2.2.10 检测过程中的细胞活性分析 | 第46页 |
| §2.3 结果与讨论 | 第46-52页 |
| 2.3.1 金纳米簇以及氨基苯硼酸修饰的AuNC的表征 | 第46页 |
| 2.3.2 树枝状高分子阵列构建的表征 | 第46-47页 |
| 2.3.3 APBA与SA识别特异性的验证 | 第47页 |
| 2.3.4 探针卸载分析条件优化 | 第47-49页 |
| 2.3.5 BGC细胞表面唾液密度的检测 | 第49-51页 |
| 2.3.6 BGC细胞表面SA密度变化的动态监测 | 第51-52页 |
| §2.4 结论 | 第52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 第三章 阵列法检测细胞表面多种聚糖 | 第54-69页 |
| §3.1 引言 | 第54-55页 |
| §3.2 实验部分 | 第55-59页 |
| 3.2.1 材料和试剂 | 第55-57页 |
| 3.2.2 仪器设备 | 第57页 |
| 3.2.3 细胞培养和处理 | 第57-58页 |
| 3.2.4 捕获DNA微阵列的制备 | 第58页 |
| 3.2.5 制备编码凝集素探针 | 第58页 |
| 3.2.6 细胞表面聚糖分析 | 第58-59页 |
| 3.2.7 单糖抑制分析 | 第59页 |
| 3.2.8 流式细胞分析BGC细胞表面聚糖表达 | 第59页 |
| §3.3 结果与讨论 | 第59-67页 |
| 3.3.1 编码凝集素探针的表征 | 第59页 |
| 3.3.2 DNA微阵列性能测试 | 第59-61页 |
| 3.3.3 探针的识别和释放 | 第61-64页 |
| 3.3.4 识别的特异性 | 第64页 |
| 3.3.5 定量检测细胞表面多种聚糖 | 第64-67页 |
| §3.4 结论 | 第67页 |
| 参考文献 | 第67-69页 |
| 第四章 微竞争体系用于细胞表面多组分聚糖的拉曼定量 | 第69-85页 |
| §4.1 引言 | 第69-71页 |
| §4.2 实验部分 | 第71-74页 |
| 4.2.1 材料和试剂 | 第71-72页 |
| 4.2.2 仪器设备 | 第72页 |
| 4.2.3 纳米探针的制备 | 第72页 |
| 4.2.4 MGAuNS@B的制备 | 第72-73页 |
| 4.2.5 标准连接曲线和细胞竞争曲线 | 第73页 |
| 4.2.6 单糖抑制实验 | 第73-74页 |
| 4.2.7 流式细胞仪聚糖分析 | 第74页 |
| §4.3 结果与讨论 | 第74-82页 |
| 4.3.1 纳米探针和MGAuNS@B的表征 | 第74-76页 |
| 4.3.2 识别的特异性 | 第76-77页 |
| 4.3.3 定量检测细胞表面多种聚糖 | 第77-81页 |
| 4.3.4 监测细胞表面多种聚糖变化 | 第81-82页 |
| §4.4 结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-85页 |
| 第五章 区域可控的表面增强拉曼效应用于特定蛋白质上聚糖拉曼成像 | 第85-105页 |
| §5.1 引言 | 第85-87页 |
| §5.2 实验部分 | 第87-91页 |
| 5.2.1 材料和试剂 | 第87-88页 |
| 5.2.2 仪器设备 | 第88-89页 |
| 5.2.3 金探针的制备 | 第89页 |
| 5.2.4 细胞培养和处理 | 第89-90页 |
| 5.2.5 代谢标记细胞表面聚糖 | 第90页 |
| 5.2.6 流式细胞分析细胞表面EpCAM和聚糖 | 第90页 |
| 5.2.7 细胞表面EpCAM和聚糖荧光成像 | 第90-91页 |
| 5.2.8 特定蛋白质上的聚糖拉曼成像 | 第91页 |
| 5.2.9 RNA干扰实验 | 第91页 |
| §5.3 结果与讨论 | 第91-102页 |
| 5.3.1 金纳米探针的表征 | 第91-92页 |
| 5.3.2 ZCSERS可行性验证 | 第92-93页 |
| 5.3.3 特异性验证 | 第93-95页 |
| 5.3.4 检测条件优化 | 第95-96页 |
| 5.3.5 特定蛋白质上聚糖拉曼成像 | 第96-99页 |
| 5.3.6 特定蛋白质上聚糖调控 | 第99-102页 |
| §5.4 结论 | 第102页 |
| 参考文献 | 第102-105页 |
| 第六章 外切酶辅助的DNA循环杂交释放特定蛋白质上聚糖信号 | 第105-120页 |
| §6.1 引言 | 第105-106页 |
| §6.2 实验部分 | 第106-110页 |
| 6.2.1 材料和试剂 | 第106-108页 |
| 6.2.2 仪器设备 | 第108页 |
| 6.2.3 细胞培养和处理 | 第108页 |
| 6.2.4 代谢标记细胞表面聚糖 | 第108-109页 |
| 6.2.5 流式细胞分析细胞表面EpCAM和聚糖 | 第109页 |
| 6.2.6 定量检测细胞表面EpCAM上的Sia | 第109页 |
| 6.2.7 RNA干扰实验 | 第109页 |
| 6.2.8 ELISA定量MCF-7细胞上的EpCAM | 第109-110页 |
| §6.3 结果与讨论 | 第110-118页 |
| 6.3.1 Exo Ⅲ辅助的循环酶切释放荧光素验证 | 第110页 |
| 6.3.2 适配体的特异性验证 | 第110-111页 |
| 6.3.3 聚糖的蛋白特异性验证 | 第111-113页 |
| 6.3.4 检测条件优化 | 第113页 |
| 6.3.5 定量检测特定蛋白质上的聚糖 | 第113-115页 |
| 6.3.6 监测特定蛋白质的糖基化变化 | 第115-118页 |
| §6.4 结论 | 第118页 |
| 参考文献 | 第118-120页 |
| 附录 | 第120-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
