| 摘要 | 第6-9页 |
| abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-39页 |
| 1.1 小麦全蚀病研究概况 | 第16-17页 |
| 1.1.1 小麦全蚀病的发生和危害 | 第16页 |
| 1.1.2 全蚀病菌研究概况 | 第16-17页 |
| 1.1.3 小麦全蚀病的防治方法 | 第17页 |
| 1.2 植物源杀菌剂研究进展 | 第17-20页 |
| 1.2.1 抑菌植物的筛选 | 第18-20页 |
| 1.2.2 植物源抑菌活性成分的研究进展 | 第20页 |
| 1.3 倍半萜内酯类化合物研究进展 | 第20-24页 |
| 1.3.1 倍半萜内酯类化合物生物活性研究进展 | 第21页 |
| 1.3.2 倍半萜内酯类化合物作用机制研究进展 | 第21-22页 |
| 1.3.3 天名精内酯酮研究现状 | 第22-24页 |
| 1.4 线粒体呼吸链研究现状 | 第24-31页 |
| 1.4.1 线粒体呼吸链复合酶研究现状 | 第26-30页 |
| 1.4.2 线粒体活性氧的产生 | 第30-31页 |
| 1.5 呼吸链复合酶Ⅲ抑制剂研究进展 | 第31-37页 |
| 1.5.1 Q_i位点抑制剂研究进展 | 第32-34页 |
| 1.5.2 Q_o位点抑制剂研究进展 | 第34-37页 |
| 1.6 问题的提出及论文设计思路 | 第37-39页 |
| 第二章 天名精内酯酮对小麦全蚀病菌呼吸链复合酶的影响 | 第39-57页 |
| 2.1 材料方法 | 第39-46页 |
| 2.1.1 供试材料 | 第39-40页 |
| 2.1.2 主要仪器及设备 | 第40页 |
| 2.1.3 试验方法 | 第40-46页 |
| 2.1.4 结果统计与分析 | 第46页 |
| 2.2 结果与分析 | 第46-54页 |
| 2.2.1 天名精内酯酮与SHAM的增效作用 | 第46-47页 |
| 2.2.2 天名精内酯酮对呼吸链复合酶Ⅰ、Ⅱ活性的影响 | 第47-48页 |
| 2.2.3 天名精内酯酮对呼吸链复合酶Ⅳ、Ⅴ、CS活性的影响 | 第48-50页 |
| 2.2.4 天名精内酯酮对呼吸链复合酶Ⅲ、Ⅰ+Ⅲ、Ⅱ+Ⅲ活性的影响 | 第50-52页 |
| 2.2.5 呼吸链复合酶基因qRT-PCR分析 | 第52-54页 |
| 2.3 讨论 | 第54-56页 |
| 2.3.1 天名精内酯酮对呼吸链有显著的抑制作用 | 第54页 |
| 2.3.2 天名精内酯酮与呼吸链复合酶Ⅲ的互作有待深入研究 | 第54-56页 |
| 2.4 小结 | 第56-57页 |
| 第三章 小麦全蚀病菌原生质体遗传转化体系的建立 | 第57-76页 |
| 3.1 材料方法 | 第57-64页 |
| 3.1.1 供试材料 | 第57页 |
| 3.1.2 供试设备及试剂 | 第57-58页 |
| 3.1.3 试验方法 | 第58-64页 |
| 3.2 结果与分析 | 第64-72页 |
| 3.2.1 培养基对原生质体制备的影响 | 第64-65页 |
| 3.2.2 温度对原生质体制备的影响 | 第65页 |
| 3.2.3 酶对原生质体制备的影响 | 第65页 |
| 3.2.4 酶解时间对原生质体制备的影响 | 第65-66页 |
| 3.2.5 菌丝体重量对原生质体制备的影响 | 第66页 |
| 3.2.6 摇床转速对原生质体制备的影响 | 第66-67页 |
| 3.2.7 酶浓度对原生质体制备的影响 | 第67-68页 |
| 3.2.8 原生质体产生条件的优化 | 第68-71页 |
| 3.2.9 转化子筛选 | 第71-72页 |
| 3.2.10 Southern杂交和PCR验证 | 第72页 |
| 3.3 讨论 | 第72-74页 |
| 3.3.1 原生质体制备在PEG介导小麦全蚀病菌转化中至关重要 | 第72-74页 |
| 3.3.2 原生质体浓度对丝状真菌转化率有重要影响 | 第74页 |
| 3.4 小结 | 第74-76页 |
| 第四章 Ggcytc_1、Ggcytb、GgISP沉默和过表达载体的构建及突变体筛选 | 第76-96页 |
| 4.1 材料方法 | 第76-89页 |
| 4.1.1 供试材料 | 第76-78页 |
| 4.1.2 供试设备及试剂 | 第78页 |
| 4.1.3 试验方法 | 第78-89页 |
| 4.2 试验结果 | 第89-94页 |
| 4.2.1 GgCytc_1,GgCytb及GgIsp基因鉴定及序列分析 | 第89-91页 |
| 4.2.2 沉默和过表达载体PCR验证 | 第91-92页 |
| 4.2.3 沉默和过表达转化子PCR验证 | 第92页 |
| 4.2.4 沉默和过表达转化子RT-PCR验证 | 第92-93页 |
| 4.2.5 沉默和过表达转化子DNA水平验证 | 第93-94页 |
| 4.3 讨论 | 第94-95页 |
| 4.4 小结 | 第95-96页 |
| 第五章 突变菌株生理生化指标测定 | 第96-117页 |
| 5.1 材料方法 | 第96-100页 |
| 5.1.1 供试材料 | 第96-97页 |
| 5.1.2 主要仪器及设备 | 第97-98页 |
| 5.1.3 试验方法 | 第98-100页 |
| 5.2 结果与分析 | 第100-113页 |
| 5.2.1 菌丝生长速率测定 | 第100-101页 |
| 5.2.2 菌株对天名精内酯酮和H_2O_2敏感性测定 | 第101-102页 |
| 5.2.3 菌丝形态显微观察 | 第102-104页 |
| 5.2.4 黑色素含量测定 | 第104-105页 |
| 5.2.5 过氧化物酶和漆酶活性测定 | 第105-106页 |
| 5.2.6 突变菌株GgLac基因RT-PCR分析 | 第106-107页 |
| 5.2.7 线粒体呼吸链复合酶Ⅲ活性测定 | 第107-109页 |
| 5.2.8 菌株致病性及天名精内酯酮的活体抑菌活性测定 | 第109-111页 |
| 5.2.9 线粒体氧消耗速率测定 | 第111-113页 |
| 5.3 讨论 | 第113-115页 |
| 5.3.1 GgLac可能是供试菌株致病相关基因 | 第113页 |
| 5.3.2 GgCytc_1、GgCytb和GgIsp对菌丝生长、黑色素含量、致病性有重要影响 | 第113-114页 |
| 5.3.3 天名精内酯酮对呼吸链复合酶Ⅲ铁硫蛋白亚基有重要影响 | 第114-115页 |
| 5.4 小结 | 第115-117页 |
| 第六章 Cytc1、Cytb和ISP亚基的同源建模与分子对接 | 第117-132页 |
| 6.1 材料方法 | 第117-119页 |
| 6.1.1 供试材料 | 第117-118页 |
| 6.1.2 试验方法 | 第118-119页 |
| 6.2 结果与分析 | 第119-130页 |
| 6.2.1 模板蛋白序列的搜索 | 第119-120页 |
| 6.2.2 目的蛋白序列与模板蛋白序列的比对 | 第120-121页 |
| 6.2.3 三维模型的构建 | 第121-122页 |
| 6.2.4 模型评估 | 第122-126页 |
| 6.2.5 Cytc1、Cytb和ISP三维结构活性腔的确定 | 第126-127页 |
| 6.2.6 天名精内酯酮与Cytc1、Cytb和ISP亚基三维结构模型的分子对接 | 第127-130页 |
| 6.3 讨论 | 第130-131页 |
| 6.4 小结 | 第131-132页 |
| 第七章 讨论与结论 | 第132-137页 |
| 7.1 讨论 | 第132-135页 |
| 7.1.1 呼吸链复合酶Ⅲ是天名精内酯酮的潜在靶蛋白之一 | 第132页 |
| 7.1.2 天名精内酯酮与抗霉素A可能作用于复合酶Ⅲ的不同亚基 | 第132-133页 |
| 7.1.3 铁硫蛋白亚基是天名精内酯酮潜在靶标之一 | 第133页 |
| 7.1.4 天名精内酯酮抑菌机制推测 | 第133-135页 |
| 7.2 主要结论 | 第135-136页 |
| 7.3 本研究创新点 | 第136页 |
| 7.4 有待进一步解决的问题 | 第136-137页 |
| 参考文献 | 第137-155页 |
| 附录一 缓冲液的配置 | 第155-157页 |
| 附录二 小麦全蚀病菌总RNA提取 | 第157-158页 |
| 附录三 小麦全蚀病菌基因组DNA提取 | 第158-159页 |
| 附录四 Southern杂交所用试剂配制及步骤 | 第159-163页 |
| 附录五 普通琼脂糖凝胶DNA回收 | 第163-164页 |
| 附录六 大肠杆菌感受态的制备 | 第164-165页 |
| 附录七 大肠杆菌质粒提取 | 第165-167页 |
| 致谢 | 第167-168页 |
| 作者简介 | 第168页 |
