| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词（ABBREVIATION） | 第12-13页 |
| 1. 前言 | 第13-28页 |
| 1.1. 肠外致病性大肠杆菌的研究进展 | 第13-17页 |
| 1.1.1. 大肠杆菌概述 | 第13页 |
| 1.1.2. 大肠杆菌的分类 | 第13-14页 |
| 1.1.3. 肠外致病性大肠杆菌概述 | 第14页 |
| 1.1.4. 肠外致病性大肠杆菌的致病机理 | 第14-15页 |
| 1.1.5. 肠外致病性大肠杆菌的流行病学 | 第15-16页 |
| 1.1.6. 肠外致病性大肠杆菌的公共卫生意义 | 第16-17页 |
| 1.2. 细菌生物被膜研究进展 | 第17-22页 |
| 1.2.1. 细菌生物被膜概述及其危害 | 第17-18页 |
| 1.2.2. 生物被膜的形成过程及参与的因子 | 第18-20页 |
| 1.2.3. 大肠杆菌生物被膜形成的调节 | 第20-21页 |
| 1.2.4. 生物被膜的控制与清除 | 第21-22页 |
| 1.3. Tol C蛋白概述 | 第22-23页 |
| 1.3.1. TolC蛋白概述 | 第22页 |
| 1.3.2. TolC蛋白与生物被膜形成 | 第22-23页 |
| 1.4. 细菌双组份信号转导系统研究进展 | 第23-27页 |
| 1.4.1. Cpx双组份信号转导系统 | 第24-25页 |
| 1.4.2. Cpx系统的激活 | 第25页 |
| 1.4.3. Cpx系统的调控功能 | 第25-27页 |
| 1.5. 研究的目的与意义 | 第27-28页 |
| 2. 材料与方法 | 第28-44页 |
| 2.1. 材料 | 第28-32页 |
| 2.1.1. 菌株与载体 | 第28-30页 |
| 2.1.2. 主要试剂 | 第30页 |
| 2.1.3. 主要仪器设备 | 第30-31页 |
| 2.1.4. 主要培养基、抗生素及相关溶液的配置 | 第31-32页 |
| 2.2. 方法 | 第32-44页 |
| 2.2.1. 引物设计与合成 | 第32-33页 |
| 2.2.2. 猪源肠外致病性大肠杆菌的复苏增殖和基因组DNA提取 | 第33页 |
| 2.2.3. 质粒的小量制备 | 第33-34页 |
| 2.2.4. 琼脂糖凝胶电泳与DNA的纯化和回收 | 第34-35页 |
| 2.2.5. 大肠杆菌 X7213 感受态细胞的制备 | 第35页 |
| 2.2.6. 基因缺失株的构建 | 第35-38页 |
| 2.2.7. cpxR基因缺失株的构建 | 第38-39页 |
| 2.2.8. △tolC△cpxA和△tolC△cpxR双基因缺失株的构建 | 第39页 |
| 2.2.9. 回补菌株的构建 | 第39-40页 |
| 2.2.10. CpxA磷酸化位点定点突变菌株的构建 | 第40-41页 |
| 2.2.11. 试验菌株生长曲线的测定 | 第41-42页 |
| 2.2.12. 试验菌株对抗菌药物最小抑菌浓度的测定 | 第42页 |
| 2.2.13. 生物被膜形成能力实验 | 第42-43页 |
| 2.2.14. 扫描电子显微镜观察生物被膜细菌形态 | 第43页 |
| 2.2.15. 刚果红平板试验验证Curli合成能力 | 第43-44页 |
| 3. 结果与分析 | 第44-56页 |
| 3.1. 基因缺失株的构建 | 第44-46页 |
| 3.2. 回补菌株的构建 | 第46-48页 |
| 3.3. 定点突变菌株的构建 | 第48-49页 |
| 3.4. 生长曲线的测定 | 第49-50页 |
| 3.5. 最小抑菌浓度（MIC）测定 | 第50-51页 |
| 3.6. 生物被膜形成能力分析 | 第51-53页 |
| 3.6.1. CpxA缺失和点突变菌株的生物被膜形成能力分析 | 第51-52页 |
| 3.6.2. CpxR缺失菌株的生物被膜形成能力分析 | 第52-53页 |
| 3.7. 扫描电子显微镜观察生物被膜细菌形态 | 第53-54页 |
| 3.8. 刚果红平板试验验证试验菌株Curli菌毛合成能力 | 第54-56页 |
| 4. 讨论 | 第56-59页 |
| 4.1. ExPEC生物被膜的公共卫生意义 | 第56页 |
| 4.2. 基因缺失突变株的构建 | 第56页 |
| 4.3. 外膜蛋白TolC与细菌生物被膜的形成 | 第56-57页 |
| 4.4. Cpx双组份系统在生物被膜形成中的作用探讨 | 第57-58页 |
| 4.5. 后续研究的展望 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附录 | 第73页 |
