| 摘要 | 第3-10页 |
| ABSTRACT | 第10-17页 |
| 前言 | 第22-32页 |
| 第一部分 NG-纳米蛋白复合体的稳定构建及转染效能研究 | 第32-60页 |
| 材料和方法 | 第33-43页 |
| 1. 主要仪器 | 第33页 |
| 2. 主要试剂 | 第33-35页 |
| 3. 实验方法 | 第35-43页 |
| 结果 | 第43-56页 |
| 1. PEI-DNase I、NG_(5000)-DNase I和NG_(large)-DNase I的激光散射粒径测试 | 第43-47页 |
| 2. 透射电镜下观察复合物的外貌 | 第47-48页 |
| 3. 琼脂糖凝胶电泳保护实验 | 第48-49页 |
| 4. SDS-PAGE电泳保护实验 | 第49-50页 |
| 5. 人骨髓间充质干细胞的分离培养及形态学变化 | 第50-51页 |
| 6. 不同配比的NG_(5000)-GFP复合体转染hBMSCs | 第51-52页 |
| 7. pH值、血清浓度及PEG对Hand2转染效率的影响 | 第52-54页 |
| 8. NG携载不同种类蛋白进入不同细胞 | 第54-55页 |
| 9. NG的质粒转染功能 | 第55-56页 |
| 讨论 | 第56-60页 |
| 第二部分 NG纳米-蛋白复合体的胞内代谢及毒性作用 | 第60-77页 |
| 材料和方法 | 第60-64页 |
| 1. 主要仪器 | 第60-61页 |
| 2. 主要试剂 | 第61-62页 |
| 3. 实验方法 | 第62-64页 |
| 结果 | 第64-74页 |
| 1. NG运载GFP进入hBMSCs的内质网(Endoplasmic Reticulum,ER)追踪实验 | 第64-65页 |
| 2. NG_(5000)-Hand2复合体的入胞后的短时间效应及蛋白代谢的长时间效应 | 第65-66页 |
| 3. Liposome2000、Pro-Ject和NG_(5000)三种蛋白载体转染效率的比较 | 第66-69页 |
| 4. MTT法检测PEI、NG_(5000)和NG_(large)长短期毒性 | 第69-71页 |
| 5. AnnexinV-PI检测对hBMSCs的凋亡作用 | 第71-74页 |
| 讨论 | 第74-77页 |
| 第三部分 NG纳米-蛋白质复合体重编程诱导骨髓间充质干细胞生成心脏祖细胞的探索性研究 | 第77-92页 |
| 材料和方法 | 第78-85页 |
| 1. 主要仪器 | 第78页 |
| 2. 主要试剂 | 第78-80页 |
| 3. 主要实验方法 | 第80-85页 |
| 结果 | 第85-89页 |
| 1. GHMT四种蛋白耦合NG载体转染hBMSCs的效率 | 第85页 |
| 2. hBMSCs经蛋白重编程后形态学的变化 | 第85-86页 |
| 3. 心脏祖细胞的免疫荧光染色 | 第86-87页 |
| 4. CPCs的mRNA水平表达 | 第87-88页 |
| 5. Western Blot检测心脏祖细胞心肌相关蛋白的水平 | 第88-89页 |
| 讨论 | 第89-92页 |
| 全文总结 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-104页 |
| 中英文缩略词表 | 第104-106页 |
| 攻读硕士学位期间的成果 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
