摘要 | 第3-9页 |
ABSTRACT | 第9-15页 |
1 前言 | 第18-24页 |
1.1 脂质的从头合成途径(DNL)是脂肪组织脂质的重要来源之一 | 第18-19页 |
1.2 SREBPs是调控脂质新生途径的重要转录因子 | 第19-21页 |
1.3 PKD1的定位与生理功能 | 第21-24页 |
2. 材料与方法 | 第24-45页 |
2.1 材料 | 第24-26页 |
2.1.1 细胞系 | 第24页 |
2.1.2 质粒及siRNA | 第24页 |
2.1.3 试剂及耗材 | 第24-25页 |
2.1.4 主要仪器 | 第25-26页 |
2.2 方法 | 第26-45页 |
2.2.1 主要溶液配制 | 第26-28页 |
2.2.2 细胞与组织的蛋白提取 | 第28-30页 |
2.2.3 细胞及动物组织总RNA提取,反转录,实时定量PCR | 第30-33页 |
2.2.4 细胞的复苏,培养,传代,冻存 | 第33-34页 |
2.2.5 质粒及siRNA转染 | 第34-35页 |
2.2.6 免疫荧光(Immunofluorescence, IF)实验 | 第35-45页 |
3. 实验结果 | 第45-60页 |
3.1 脂肪组织特异性敲除PKD1小鼠的构建 | 第45-47页 |
3.2 PKD1敲除鼠对饮食诱导的肥胖有抵抗作用 | 第47-51页 |
3.3 RNA-sequencing显示PKD1脂肪组织特异性敲除下调脂肪从头合成途径以及脂质代谢相关基因的表达 | 第51-53页 |
3.5 脂肪细胞中PKD1的敲除可上调SREBP1-S372抑制性位点的磷酸化,并抑制成熟mSREBP1的剪切和入核 | 第53-54页 |
3.6 在体外细胞水平上PKD1对于脂质新生途径的影响 | 第54-58页 |
3.7 PKD1能够与SREBP1和SCAP直接相互作用 | 第58-60页 |
讨论 | 第60-63页 |
结论 | 第63-64页 |
中英文缩略词对照表 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
硕士阶段的研究成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |