| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 主要符号表 | 第19-20页 |
| 1 绪论 | 第20-32页 |
| 1.1 肾脏概述 | 第20-25页 |
| 1.1.1 肾脏结构和功能 | 第20-21页 |
| 1.1.2 肾损伤定义及分类 | 第21-23页 |
| 1.1.3 肾损伤的流行病学特点 | 第23-24页 |
| 1.1.4 肾损伤的研究意义 | 第24-25页 |
| 1.2 肾脏研究模型概述 | 第25-26页 |
| 1.2.1 肾脏体内研究方法 | 第25页 |
| 1.2.2 肾脏体外研究方法 | 第25-26页 |
| 1.2.3 肾脏体外研究模型新需求 | 第26页 |
| 1.3 微流控肾芯片研究概述 | 第26-30页 |
| 1.3.1 微流控芯片概述 | 第26-27页 |
| 1.3.2 微流控器官芯片研究概述 | 第27-29页 |
| 1.3.3 微流控肾芯片研究现状 | 第29页 |
| 1.3.4 微流控肾芯片研究面临的困难和挑战 | 第29-30页 |
| 1.4 本文研究思路 | 第30-32页 |
| 2 原代肾细胞培养 | 第32-49页 |
| 2.1 引言 | 第32-33页 |
| 2.2 实验材料和设备 | 第33-36页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第34-35页 |
| 2.2.3 实验设备 | 第35-36页 |
| 2.3 实验方法 | 第36-39页 |
| 2.3.1 肾小球和肾小管组织获取 | 第36-37页 |
| 2.3.2 三种原代细胞的培养及分离纯化 | 第37-38页 |
| 2.3.3 免疫荧光 | 第38-39页 |
| 2.3.4 细胞活力测定 | 第39页 |
| 2.3.5 统计学分析 | 第39页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第39-47页 |
| 2.4.1 获取组织的方法对组织活性的影响 | 第39页 |
| 2.4.2 胶原酶种类对组织获取结果的影响 | 第39-40页 |
| 2.4.3 胶原酶消化时间对组织获取结果的影响 | 第40-41页 |
| 2.4.4 三种原代细胞的表征结果 | 第41-42页 |
| 2.4.5 包被条件对肾小管上皮细胞增殖能力的影响 | 第42-43页 |
| 2.4.6 包被条件对肾小管管周血管内皮细胞增殖能力的影响 | 第43-44页 |
| 2.4.7 包被条件对肾足细胞黏附能力的影响 | 第44-45页 |
| 2.4.8 包被条件对肾足细胞裂孔膜蛋白nephrin表达的影响 | 第45-46页 |
| 2.4.9 肾足细胞培养液条件探索 | 第46页 |
| 2.4.10 肾小管上皮细胞培养液条件探索 | 第46-47页 |
| 2.5 本章小结 | 第47-49页 |
| 3 两种肾小管芯片构建及应用 | 第49-69页 |
| 3.1 引言 | 第49页 |
| 3.2 实验材料和设备 | 第49-52页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第50-52页 |
| 3.2.3 实验设备 | 第52页 |
| 3.3 实验方法 | 第52-58页 |
| 3.3.1 微流控芯片制作 | 第52-54页 |
| 3.3.2 细胞层培养 | 第54页 |
| 3.3.3 两种肾小管芯片的组装 | 第54-55页 |
| 3.3.4 单层细胞葡聚糖表观渗透率检测 | 第55-56页 |
| 3.3.5 单层肾小管上皮细胞的对氨基马尿酸分泌能力检测 | 第56页 |
| 3.3.6 免疫荧光 | 第56页 |
| 3.3.7 细胞极性对药物毒性结果影响评估 | 第56-57页 |
| 3.3.8 系统循环液中BSA的存在对药物毒性结果影响评估 | 第57页 |
| 3.3.9 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶检测 | 第57-58页 |
| 3.3.10 芯片多孔膜细胞形态及数量表征 | 第58页 |
| 3.3.11 两种肾小管芯片在顺铂致肾损伤中的应用 | 第58页 |
| 3.3.12 统计学分析 | 第58页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第58-67页 |
| 3.4.1 芯片的设计及构建 | 第58-60页 |
| 3.4.2 细胞层功能评估 | 第60-61页 |
| 3.4.3 流动在细胞功能体外重建中的作用 | 第61-62页 |
| 3.4.4 细胞极性的形成对药物毒性评估的影响 | 第62-64页 |
| 3.4.5 系统循环液中BSA的存在对药物毒性评估的影响 | 第64-65页 |
| 3.4.6 顺铂对两种芯片的肾小管上皮细胞的细胞活性的影响 | 第65-66页 |
| 3.4.7 顺铂对两种芯片的肾小管上皮细胞Na~+/K~+ ATPase表达的影响 | 第66页 |
| 3.4.8 顺铂对两种肾小管芯片上的细胞Mrp-2蛋白的表达的影响 | 第66-67页 |
| 3.5 本章小结 | 第67-69页 |
| 4 仿生肾单位芯片的构建及其评价 | 第69-87页 |
| 4.1 引言 | 第69页 |
| 4.2 实验材料和设备 | 第69-72页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第69-70页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第70-71页 |
| 4.2.3 实验设备 | 第71-72页 |
| 4.3 实验方法 | 第72-77页 |
| 4.3.1 微流控芯片制作 | 第72页 |
| 4.3.2 细胞层培养 | 第72-73页 |
| 4.3.3 芯片的组装 | 第73-74页 |
| 4.3.4 肾小球尺寸选择性和电荷选择性评估 | 第74-75页 |
| 4.3.5 葡萄糖转运能力检测 | 第75页 |
| 4.3.6 对氨基马尿酸分泌能力检测 | 第75页 |
| 4.3.7 系统循环液中BSA对肾单位芯片中的细胞功能的影响 | 第75-76页 |
| 4.3.8 利用模式药物顺铂对肾单位芯片仿真性的评价 | 第76页 |
| 4.3.9 细胞活力测试 | 第76-77页 |
| 4.3.10 免疫荧光 | 第77页 |
| 4.3.11 统计学分析 | 第77页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第77-86页 |
| 4.4.1 芯片的设计及构建 | 第77-80页 |
| 4.4.2 细胞层功能评估 | 第80-81页 |
| 4.4.3 肾单位芯片功能评估 | 第81-83页 |
| 4.4.4 BSA的存在对细胞连接的形成的影响 | 第83页 |
| 4.4.5 BSA的存在对体外上皮细胞功能重建的影响 | 第83-84页 |
| 4.4.6 利用模式药物顺铂对肾单位芯片仿真性的评价 | 第84-86页 |
| 4.5 本章小结 | 第86-87页 |
| 5 仿生肾单位芯片在药物致肾损伤研究中的应用 | 第87-102页 |
| 5.1 引言 | 第87页 |
| 5.2 实验材料和设备 | 第87-90页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第87-88页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第88-89页 |
| 5.2.3 实验设备 | 第89-90页 |
| 5.3 实验方法 | 第90-92页 |
| 5.3.1 利用肾单位芯片比较不同浓度的顺铂所致急性肾损伤情况 | 第90页 |
| 5.3.2 利用肾单位芯片比较不同药物所致肾损伤中细胞损伤顺序 | 第90页 |
| 5.3.3 细胞活力测试 | 第90-91页 |
| 5.3.4 利用肾单位芯片比较不同药物所致肾损伤机制 | 第91页 |
| 5.3.5 免疫荧光 | 第91页 |
| 5.3.6 统计学分析 | 第91-92页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第92-100页 |
| 5.4.1 不同浓度顺铂作用下肾单位芯片细胞的损伤情况 | 第92-93页 |
| 5.4.2 肾单位芯片在比较不同药物所致肾损伤中细胞损伤顺序中的应用 | 第93-96页 |
| 5.4.3 肾单位芯片在比较不同药物所致肾损伤机制中的应用 | 第96-98页 |
| 5.4.4 系统循环液中引入BSA对药物所致肾损伤评估结果的影响 | 第98-100页 |
| 5.5 本章小结 | 第100-102页 |
| 6 总结与展望 | 第102-104页 |
| 6.1 结论 | 第102页 |
| 6.2 创新点 | 第102-103页 |
| 6.3 展望 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-112页 |
| 附录 缩略词表 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 作者简介 | 第114页 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第114-115页 |
