| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-25页 |
| ·燃料酒精概述 | 第12-13页 |
| ·发展燃料酒精的意义 | 第12页 |
| ·燃料酒精的发展现状 | 第12-13页 |
| ·甘油途径代谢工程 | 第13-16页 |
| ·甘油途径概况 | 第13-14页 |
| ·甘油途径改造的研究进展 | 第14-16页 |
| ·酸性蛋白酶与酒精发酵概述 | 第16-17页 |
| ·酿酒酵母细胞表面工程 | 第17-20页 |
| ·酿酒酵母细胞表面工程概述 | 第17页 |
| ·酿酒酵母表面呈现技术的原理 | 第17-20页 |
| ·酿酒酵母表面呈现技术的应用 | 第20页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的研究概况 | 第20-21页 |
| ·β-葡萄糖苷酶简介 | 第20页 |
| ·β-葡萄糖苷酶国内外研究进展 | 第20-21页 |
| ·工业酒精酵母中外源基因的表达策略 | 第21-22页 |
| ·外源基因的稳定高效表达 | 第21-22页 |
| ·同源重组与筛选标记的重复利用 | 第22页 |
| ·本课题研究目的与意义 | 第22-23页 |
| ·本课题研究内容 | 第23-25页 |
| 第二章 工业酒精酵母单倍体的分离及特性研究 | 第25-32页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·菌种 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·子囊孢子染色用试剂 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-31页 |
| ·工业酒精酵母生孢实验 | 第28-29页 |
| ·a 型、α型单倍体分离 | 第29页 |
| ·单倍体基本性状的考察 | 第29-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 GPD1 和GPD2 基因的敲除及突变株发酵性能的研究 | 第32-46页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·材料 | 第32-34页 |
| ·菌株与质粒 | 第32页 |
| ·工具酶和试剂 | 第32页 |
| ·引物 | 第32-33页 |
| ·酵母染色体提取试剂 | 第33页 |
| ·质粒提取试剂 | 第33页 |
| ·培养基和培养条件 | 第33-34页 |
| ·主要仪器和设备 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-44页 |
| ·工业酒精酵母GPD1 基因的敲除 | 第37-40页 |
| ·工业酒精酵母GPD2 基因的敲除 | 第40-43页 |
| ·重组工业酒精酵母酒精发酵实验 | 第43-44页 |
| ·本章小结 | 第44-46页 |
| 第四章 gapN, TPS1, TPS2 在GPD 突变株中的表达 | 第46-67页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·材料 | 第46-48页 |
| ·菌株与质粒 | 第46页 |
| ·工具酶和试剂 | 第46-47页 |
| ·引物 | 第47页 |
| ·酵母染色体提取试剂 | 第47页 |
| ·质粒提取试剂 | 第47页 |
| ·培养基和培养条件 | 第47-48页 |
| ·主要仪器和设备 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-66页 |
| ·GAPN 在ANG1 (gpd1△::KanR)，ANG2 (gpd2△::HyBR)中的游离表达 | 第50-54页 |
| ·工业酒精酵母GPD1 基因的敲除与GAPN 的整合表达 | 第54-58页 |
| ·海藻糖合成酶（TPS）及海藻糖磷酸化酶（TPP）的表达 | 第58-66页 |
| ·本章小结 | 第66-67页 |
| 第五章 酸性蛋白酶在工业酒精酵母和重组菌AG1A1 中的表达 | 第67-85页 |
| ·引言 | 第67页 |
| ·材料 | 第67-70页 |
| ·菌株与质粒 | 第67页 |
| ·工具酶和试剂 | 第67-68页 |
| ·引物 | 第68页 |
| ·酵母染色体提取试剂 | 第68页 |
| ·质粒提取试剂 | 第68页 |
| ·丝状真菌染色体提取试剂 | 第68页 |
| ·测定酸性蛋白酶活试剂 | 第68-69页 |
| ·蛋白酶荧光染色试剂 | 第69页 |
| ·测定游离氨基氮（Free Amino Acid, FAN）的试剂 | 第69页 |
| ·测定发酵液中还原糖的试剂 | 第69页 |
| ·培养基和培养条件 | 第69-70页 |
| ·主要仪器和设备 | 第70页 |
| ·方法 | 第70-72页 |
| ·结果与分析 | 第72-83页 |
| ·粗糙脉孢霉（N. crassa）酸性蛋白酶基因Asp 在酵母中的表达 | 第72-76页 |
| ·工业酒精酵母酸性蛋白酶基因PEP4 的表达 | 第76-83页 |
| ·PEP4 在重组菌AG1A1 中呈现表达 | 第83页 |
| ·本章小结 | 第83-85页 |
| 第六章 β-葡萄糖苷酶在工业酒精酵母和重组菌AGS1 中的表达 | 第85-102页 |
| ·引言 | 第85页 |
| ·材料 | 第85-86页 |
| ·菌株与质粒 | 第85页 |
| ·工具酶和试剂 | 第85-86页 |
| ·引物 | 第86页 |
| ·酵母染色体提取试剂 | 第86页 |
| ·质粒提取试剂 | 第86页 |
| ·培养基和培养条件 | 第86页 |
| ·方法 | 第86-88页 |
| ·结果与分析 | 第88-101页 |
| ·扣囊复膜孢酵母?-葡萄糖苷酶在酵母中的表达 | 第88-92页 |
| ·枯草芽孢杆菌纤维二糖透过性酶（bglPp）在工业酒精酵母中的表达 | 第92-95页 |
| ·扣囊复膜孢酵母?-葡萄糖苷酶在重组菌SP1 中的表达 | 第95-98页 |
| ·bglP 和BGL1 在重组菌AGS1 中的表达 | 第98-101页 |
| ·本章小结 | 第101-102页 |
| 论文结论与展望 | 第102-105页 |
| 论文创新点 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-114页 |
| 附录：作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第114页 |
