符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
引言 | 第12-23页 |
1.1 生长激素及其受体简介 | 第12-16页 |
1.1.1 生长激素(GH)简介 | 第12-13页 |
1.1.2 生长激素受体(GHR)简介 | 第13-15页 |
1.1.3 GH 与 GHR 的相互作用 | 第15-16页 |
1.2 胰岛素样生长因子 I 及其受体简介 | 第16-19页 |
1.2.1 胰岛素家族的发现与命名 | 第16-17页 |
1.2.2 胰岛素样生长因子 I(IGF-I)的结构与功能 | 第17-18页 |
1.2.3 胰岛素样生长因子-I 受体(IGF-IR)简介 | 第18-19页 |
1.3 GHR 及 IGF-IR 在卵巢中的研究进展 | 第19-20页 |
1.3.1 作用途径 | 第19页 |
1.3.2 对卵巢的调控作用 | 第19-20页 |
1.4 实时荧光定量 PCR 技术及其优点 | 第20-21页 |
1.5 哺乳动物发情周期的划分 | 第21-22页 |
1.6 济宁青山羊简介 | 第22页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-35页 |
2.1 试验材料 | 第23-27页 |
2.1.1 试验动物 | 第23页 |
2.1.2 试验地点 | 第23页 |
2.1.3 主要试剂和实验用品 | 第23-27页 |
2.2 免疫组化法检测卵巢中 GHR 和 IGF-IR 的阳性分布 | 第27-29页 |
2.2.1 切片标本的制备 | 第27-28页 |
2.2.2 HE 染色 | 第28页 |
2.2.3 免疫组化法 | 第28页 |
2.2.4 结果统计 | 第28-29页 |
2.3 RT-PCR 法检测卵巢中 GHR MRNA 和 IGF-IR MRNA 表达量 | 第29-32页 |
2.3.1 总 RNA 的提取 | 第29页 |
2.3.2 RNA 鉴定 | 第29-30页 |
2.3.3 引物设计及 RT-PCR 扩增 | 第30-32页 |
2.4 蛋白质印记法鉴定卵巢中 GHR 和 IGF-IR 蛋白的大小 | 第32-35页 |
2.4.1 蛋白质样品获得 | 第32页 |
2.4.2 电泳 | 第32-34页 |
2.4.3 转移(半干式转移) | 第34页 |
2.4.4 免疫反应: | 第34页 |
2.4.5 注意事项: | 第34-35页 |
3 结果及分析 | 第35-41页 |
3.1 生后发育过程中卵巢的形态学变化 | 第35-36页 |
3.2 免疫组化试验结果 | 第36-37页 |
3.2.1 生后发育阶段 GHR 阳性物质在卵巢中的分布规律 | 第36-37页 |
3.2.2 生后发育阶段 IGF-IR 阳性物质在卵巢中的分布规律 | 第37页 |
3.3 RT-PCR 试验结果 | 第37-40页 |
3.3.1 总 RNA 及 PCR 产物的电泳检测 | 第37-39页 |
3.3.2 扩增曲线结果 | 第39-40页 |
3.3.3 熔解曲线分析结果 | 第40页 |
3.4 GAPDH、GHR 和 IGF-IR WESTERN BLOT 结果 | 第40-41页 |
4 讨论 | 第41-44页 |
4.1 研究 GHR 与 IGF-IR 的定位、表达及蛋白大小的优点 | 第41页 |
4.2 生后发育过程中 GHR 在卵巢中的分布特点及 MRNA 表达 | 第41-42页 |
4.3 生后发育过程中 IGF-IR 在卵巢中的分布特点及 MRNA 表达 | 第42-43页 |
4.4 GHR 与 IGF-IR 在卵巢中的分布规律 | 第43-44页 |
5 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
附图 | 第51-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
个人简介 | 第54页 |