| 致谢 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语 | 第9-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 RNA剪接 | 第13-14页 |
| 1.2 可变剪接 | 第14-19页 |
| 1.2.1 可变剪接 | 第14页 |
| 1.2.2 可变剪接外显子的起源 | 第14-15页 |
| 1.2.3 可变剪接的类型 | 第15-17页 |
| 1.2.4 可变剪接的调控 | 第17-19页 |
| 1.3 互斥可变剪接 | 第19-22页 |
| 1.3.1 互斥可变剪接 | 第19-20页 |
| 1.3.2 互斥可变剪接调控机制 | 第20-22页 |
| 1.4 CG30427基因的研究进展 | 第22-23页 |
| 第二章 实验方案 | 第23-27页 |
| 2.1 研究目的及意义 | 第23-24页 |
| 2.2 研究内容 | 第24-25页 |
| 2.2.1 黑腹果蝇CG30427基因表达情况分析 | 第24页 |
| 2.2.2 CG30427基因3'端多外显子簇互斥可变剪接机制研究 | 第24-25页 |
| 2.3 技术路线 | 第25-26页 |
| 2.4 载体结构图谱 | 第26-27页 |
| 第三章 果蝇CG30427基因外显子簇互斥可变剪接的初步研究 | 第27-42页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第27-29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-42页 |
| 3.2.1 黑腹果蝇及其他果蝇物种CG30427基因序列分析 | 第29页 |
| 3.2.2 黑腹果蝇成虫基因组提取 | 第29-30页 |
| 3.2.3 引物设计 | 第30-32页 |
| 3.2.4 PCR扩增目的片段 | 第32页 |
| 3.2.5 割胶回收PCR产物(所用试剂盒：Biospin Gel Extraction Kit) | 第32-33页 |
| 3.2.6 PCR产物连接T载体反应 | 第33页 |
| 3.2.7 连接产物转化感受态细胞 | 第33-34页 |
| 3.2.8 E.coli TG1感受态细胞的制备(CPG法) | 第34页 |
| 3.2.9 挑取单克隆菌落扩大培养 | 第34-35页 |
| 3.2.10 质粒DNA提取(所用试剂盒：AxyPrep质粒DNA小量试剂盒) | 第35页 |
| 3.2.11 酶切鉴定质粒 | 第35-36页 |
| 3.2.12 插入克隆载体的基因目的片段测序 | 第36页 |
| 3.2.13 酶切并回收目的片段 | 第36页 |
| 3.2.14 目的片段连接表达载体 | 第36页 |
| 3.2.15 构建表达载体并测序 | 第36-37页 |
| 3.2.16 重组表达载体质粒浓度测定 | 第37页 |
| 3.2.17 重组表达载体质粒转染果蝇S2细胞 | 第37页 |
| 3.2.18 转染细胞的总RNA提取 | 第37-38页 |
| 3.2.19 RNA反转录合成cDNA第一条链 | 第38-39页 |
| 3.2.20 PCR反应 | 第39页 |
| 3.2.21 检测基因表达情况 | 第39-40页 |
| 3.2.22 CG30427基因不同组织、不同发育阶段特异性表达情况检测 | 第40页 |
| 3.2.23 净光密度分析 | 第40页 |
| 3.2.24 冻存细胞 | 第40页 |
| 3.2.25 细胞复苏 | 第40-42页 |
| 第四章 实验结果及分析 | 第42-59页 |
| 4.1 CG30427基因序列分析 | 第42-45页 |
| 4.1.1 CG30427基因可变外显子进化动态分析 | 第42-44页 |
| 4.1.2 黑腹果蝇CG30427基因可变外显子序列分析 | 第44-45页 |
| 4.2 CG30427基因表达情况分析 | 第45-46页 |
| 4.3 构建CG30427基因的迷你基因及各突变体载体 | 第46-49页 |
| 4.3.1 PCR克隆基因目的片段 | 第47页 |
| 4.3.2 目的片段连接T载体 | 第47页 |
| 4.3.3 构建表达载体 | 第47-48页 |
| 4.3.4 载体表达情况分析 | 第48-49页 |
| 4.4 黑腹果蝇CG30427基因外显子成簇剪接研究 | 第49-54页 |
| 4.4.1 CG30427基因可变多外显子簇内部内含子偏小 | 第49-51页 |
| 4.4.2 CG30427基因可变多外显子簇内部内含子均有较强的剪接信号 | 第51-54页 |
| 4.4.3 果蝇CG30427基因可变多外显子簇内部内含子优先剪接保障外显子成簇 | 第54页 |
| 4.5 黑腹果蝇CG30427基因调控元件的研究 | 第54-56页 |
| 4.6 研究小结 | 第56-59页 |
| 第五章 研究创新与展望 | 第59-60页 |
| 5.1 研究创新点 | 第59页 |
| 5.2 研究展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 个人简历 | 第64页 |
